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黄粉虫纤溶活性基因的克隆及在毕赤酵母中的表达及活性检测
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作者 韩雅莉 林非凡 +2 位作者 林泽飞 段雪娟 朱晓琳 《广东工业大学学报》 CAS 2017年第1期19-23,共5页
采用PCR技术,以含有TFP(Tenebrio Fibrinolyric Proteins,TFP)c DNA质粒作为模板,扩增出TFP基因片段.将克隆获得的目的基因插入到毕赤酵母表达载体p PIC9K中,经测序无误后,获得重组表达质粒p PIC9K-TFP.将重组表达质粒线性化后电击转化... 采用PCR技术,以含有TFP(Tenebrio Fibrinolyric Proteins,TFP)c DNA质粒作为模板,扩增出TFP基因片段.将克隆获得的目的基因插入到毕赤酵母表达载体p PIC9K中,经测序无误后,获得重组表达质粒p PIC9K-TFP.将重组表达质粒线性化后电击转化到毕赤酵母GS115中,经筛选并PCR验证获得多拷贝整合型酵母工程菌,对工程菌进行发酵和甲醇诱导表达.阳性样品经纤溶平板实验验证,表明该表达蛋白具有生物活性. 展开更多
关键词 黄粉虫 纤溶酶 基因 载体pPIC9K 毕赤酵母 表达及活性检测
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