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无载体主干序列的bar和cecropin B基因表达框共转化水稻 被引量:16
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作者 赵艳 于彦春 +2 位作者 钱前 颜美仙 黄大年 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第2期135-141,共7页
基因枪等直接转化法可将去除质粒载体主干序列的外源基因表达框导入植物基因组 ,消除质粒主干序列对植物基因组的影响 ,同时由于转基因分子较小 ,比较容易实现多个基因的共转化 ,在植物基因工程育种上有重要的应用价值。研究了基因枪介... 基因枪等直接转化法可将去除质粒载体主干序列的外源基因表达框导入植物基因组 ,消除质粒主干序列对植物基因组的影响 ,同时由于转基因分子较小 ,比较容易实现多个基因的共转化 ,在植物基因工程育种上有重要的应用价值。研究了基因枪介导外源基因表达框 (包括启动子、基因开放阅读框和终止子 )转化水稻的影响因素和转基因的整合模式 ,结果表明 :(1)基因枪介导外源基因表达框转化水稻的频率约在 0 1%~ 0 5 %之间 ,非选择标记基因与选择标记基因的共转化频率约为 5 0 %~ 6 0 % ,增加基因表达框DNA浓度可提高转化率。相同基因构建物对不同品种水稻的转化率不同 ,基因构建物的侧边序列对基因枪转化的品种差异可能具有重要影响。 (2 )非选择标记基因cecropinB表达框在水稻基因组内整合模式简单 ,仅有 1~ 3个拷贝 ;筛选标记基因bar表达框却比完整质粒转化后的整合模式复杂得多 ,插入拷贝数在 4~ 14个之间。线形基因表达框的游离DNA末端和CaMV 展开更多
关键词 无载体主干序列 BAR CECROPIN B基因 表达框 共转化 水稻
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tRNA^(val)-shRNA表达框在筛选HBV C基因小干扰RNA靶位中的应用 被引量:6
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作者 潘修成 陈智 +3 位作者 倪勤 羊正纲 徐宁 金晗英 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第2期154-160,共7页
目的:以tRNAval-shRNA表达框技术筛选高效的HBV C基因siRNA靶位。方法:针对HBV C基因序列设定5个siRNA靶位,以一步重叠延伸PCR技术生成含tRNAval启动子的shRNA表达框(SEC),分别与HBV C基因与EGFP融合表达质粒(pC-EGFP)共转染AD 293细胞... 目的:以tRNAval-shRNA表达框技术筛选高效的HBV C基因siRNA靶位。方法:针对HBV C基因序列设定5个siRNA靶位,以一步重叠延伸PCR技术生成含tRNAval启动子的shRNA表达框(SEC),分别与HBV C基因与EGFP融合表达质粒(pC-EGFP)共转染AD 293细胞,转染后48 h,流式细胞术检测融合基因荧光表达情况,半定量RT-PCR法检测HBV-C基因mRNA表达水平。以筛选的shRNA表达框转染hepG 2.2.15细胞,72 h后放免法检测细胞培养上清HbsA g、HbeA g水平,RT-PCR检测细胞HBV pgRNA水平。结果:共转染shRNA表达框能有效抑制融合表达质粒(pC-GFP)荧光强度和HBV C mRNA表达,其中SEC-492 i抑制效率最佳,而SEC-282 i相对较差。选定的492 i表达框(SEC-492 i)及282 ishRNA表达框(SEC-282 i),均呈剂量依赖性抑制hepG 2.2.15细胞HbeA g分泌和HBV pgRNA水平,其中SEC-492 i抑制HbeA g和HBV pgRNA水平明显优于SEC-282 i。结论:在选定的5个siRNA靶位中,以492 i靶位RNA i效率最高。tRNAval-shRNA表达框技术可用于抗HBV高效siRNA靶位的筛选,有进一步推广应用价值。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 基因 shRNA表达框 小干扰RNA 筛选 HBV C基因
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农杆菌介导法将fad2基因的ihpRNA表达框转入甘蓝型油菜 被引量:4
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作者 陈松 浦惠明 +4 位作者 张洁夫 陈锋 陈新军 龙卫华 戚存扣 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2008年第2期130-135,共6页
为获得转基因高油酸油菜新种质,以甘蓝型油菜品种宁油12号带柄子叶为转基因受体,通过与含有油酸脱饱和酶基因(fad2)ihpRNA表达载体(pCNFIRnos)的农杆菌LBA4404共培养,将油菜fad2基因的反向重复序列表达框转入宁油12号,获得转基因植株。... 为获得转基因高油酸油菜新种质,以甘蓝型油菜品种宁油12号带柄子叶为转基因受体,通过与含有油酸脱饱和酶基因(fad2)ihpRNA表达载体(pCNFIRnos)的农杆菌LBA4404共培养,将油菜fad2基因的反向重复序列表达框转入宁油12号,获得转基因植株。结果表明:4日龄的带柄子叶在含有2,4-D 1 mg/L的共培养基中预培养48 h后,再进入不定芽诱导培养基中进行培养,能显著提高不定芽的诱导频率;在含20 mg/L卡那霉素的诱导培养基中抗性绿芽的频率达到5.04%;PCR检测卡那霉素抗性苗的基因组DNA,均扩增出NPTII基因和目的基因序列表达框的特定条带。初步证明目的基因序列已经整合到了油菜的基因组中。 展开更多
关键词 转基因油菜 农杆菌 油酸脱饱和酶基因 ihpRNA表达框
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Bar表达框基因载体高频转化栽培小麦 被引量:1
4
作者 施农农 何光源 +1 位作者 李克秀 王慧中 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期137-142,共6页
为探讨无载体主干序列(细菌DNA)的表达框基因直接转化栽培小麦的可行性和有效性,对栽培小麦(Triticum aestivum L.)进行了bar表达框基因的基因枪转化.通过试材培养、外植体分离、bar表达框基因分离提取和纯化、基因枪轰击、诱导... 为探讨无载体主干序列(细菌DNA)的表达框基因直接转化栽培小麦的可行性和有效性,对栽培小麦(Triticum aestivum L.)进行了bar表达框基因的基因枪转化.通过试材培养、外植体分离、bar表达框基因分离提取和纯化、基因枪轰击、诱导分化与再生培养、再生苗核酸抽提、转基因检测及除草荆涂抹试验等方法,筛选到23株全部来自幼胚愈伤的独立再生苗,其中18株显示bar表达框基因的整合,且均表现抗除草荆效应.基因型鄂麦12号的转化频率(1.55%)高于鄂恩1号(0.87%),两基因型在1100psi轰击压下的转化频率均高于900psi,其中鄂麦12号达到3.51%,明显优于鄂恩1号,且高于常规小麦基因枪的平均转化频率0.50%~1.00%.鄂麦12号幼胚在1100psi轰击压下转化bar表达框基因可获高转化效应.袁明受体基因型、外植体类型、轰击压等因素在优化表达框基因转化体系中具重要作用.推断表达框基因转化方法具有片段小、环境安全、转化效率高、整合模式简单、表达高效等优势,在作物遗传转化中具有广泛应用前景. 展开更多
关键词 小麦(Triticum aestivurn L.) BAR 表达框基因 转化效应
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子房滴注法将GUS基因表达框转入大豆的研究
5
作者 刘建凤 苏乔 +1 位作者 安利佳 冉学忠 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期191-194,共4页
为了验证大豆子房滴注转化方法的可重复性与遗传稳定性,将由报告基因GUS、表达调控序列(35S启动子,NOS终止子)和T-DNA边界序列3部分组成的基因表达框转入大豆。对T0代转化材料进行GUS组织化学染色分析和PCR检测。结果表明:在检测的340... 为了验证大豆子房滴注转化方法的可重复性与遗传稳定性,将由报告基因GUS、表达调控序列(35S启动子,NOS终止子)和T-DNA边界序列3部分组成的基因表达框转入大豆。对T0代转化材料进行GUS组织化学染色分析和PCR检测。结果表明:在检测的340个幼胚中有12个呈GUS阳性,且在180个转化植株中有6个呈PCR阳性同时其叶片也呈GUS阳性,转化率分别为3.53%和3.33%。Southern杂交表明外源GUS基因表达框以低拷贝的形式整合到大豆基因组中。对转基因后代叶片GUS染色、PCR分析及Northern blot检测结果表明外源基因已遗传给了后代,其中S2株系符合孟德尔分离规律。 展开更多
关键词 大豆 无载体 无选择标记 GUS基因表达框 子房滴注 转化
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bar基因表达框和完整质粒转化对水稻农艺性状的变异效应比较
6
作者 赵艳 《杭州师范学院学报(自然科学版)》 CAS 2004年第2期133-135,共3页
通过分析转基因植株的株高、分蘖数、结实率、千粒重四个主要农艺性状的变异,比较基因枪法转化的基因表达框(仅含启动子、基因开放阅读框和终止子序列)和完整质粒两种基因载体形式对水稻农艺性状的变异效应.结果表明,与非转基因亲本相比... 通过分析转基因植株的株高、分蘖数、结实率、千粒重四个主要农艺性状的变异,比较基因枪法转化的基因表达框(仅含启动子、基因开放阅读框和终止子序列)和完整质粒两种基因载体形式对水稻农艺性状的变异效应.结果表明,与非转基因亲本相比,转基因植株的千粒重和分蘖数与对照无显著差异;株高变异也不大,17个转基因株系中,仅基因表达框转化的2个株系XFb-36和XFb-63株高变矮;而结实率变异最大,有9个转基因株系结实率显著降低,变异率达50%以上.总体上看,基因表达框和完整质粒两种基因载体形式对水稻农艺性状的变异效应差异不明显,基因枪转化对水稻农艺性状的变异效应主要表现为降低植株的育性,转基因水稻植株的农艺性状变异主要来源于转基因过程中组织培养引起的无性系变异. 展开更多
关键词 水稻 基因表达框 质粒 农艺性状 变异效应比较
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用核基质结合区(SAR)序列提高小麦最小表达框转基因表达的稳定性 被引量:1
7
作者 苏瑞波 陈明 +3 位作者 徐兆师 李连城 马庆 马有志 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期63-71,共9页
采用最小表达框技术转化植物可以规避由骨架序列引起的安全风险。核基质结合区序列SAR(scaffold attachment region)可作为边界元件与核基质结合阻挡转基因片段邻近染色质区的作用与影响,提高外源基因稳定性。本研究在最小表达框序列... 采用最小表达框技术转化植物可以规避由骨架序列引起的安全风险。核基质结合区序列SAR(scaffold attachment region)可作为边界元件与核基质结合阻挡转基因片段邻近染色质区的作用与影响,提高外源基因稳定性。本研究在最小表达框序列两端添加SAR序列,提高小麦最小表达框转基因表达的稳定性,提高转化基因的表达效率。首先,以GUS为目的基因构建带有SAR序列的最小表达框,以科农199为受体进行基因枪转化,同时以不加SAR序列的最小表达框片段为对照。带有SAR序列的最小表达框片段共轰击857个幼胚,T0代获得40株再生植株,PCR检测到16株阳性植株,转化效率为1.87%;对这16个阳性单株进行GUS染色,15株显色;从来自4个T0阳性植株的18个T1代植株中随机选取18株进行PCR和GUS染色检测,有15株表现为阳性。不带SAR序列的对照片段轰击1012个幼胚,获得31株再生植株,其中5株PCR阳性,转化效率0.49%,这5个阳性植株中仅2株为GUS染色阳性;来自于5个T0代PCR阳性株系的10个T1代单株中没有发现PCR和GUS染色阳性株。表明SAR序列可以提高基因枪转基因效率和目的基因表达稳定性。为了创制抗旱转基因小麦,以来自大豆的抗旱相关转录因子基因GmDREB3为目的基因,Bar基因为筛选标记基因,转化受体小麦济麦22,共轰击6045个幼胚,获得再生植株130株,PCR检测阳性植株30株,转化效率为0.50%;随机选取6株PCR阳性植株进行RT-PCR分析,其中5株可检测到外源基因的转录。进一步对这5株RT-PCR阳性植株插入片段完整性进行分析,其中4株插入片段基本完整。通过real-time PCR分析,发现T0代6个RT-PCR阳性植株的外源GmDREB3的拷贝数为1~3个。以上结果证明,在最小表达框两端加上SAR序列后可以提高小麦最小表达框转基因表达的稳定性。 展开更多
关键词 SAR序列 最小表达框转化法 DREB类基因 基因枪转化法
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利用线性表达框高通量表达人源单克隆抗体 被引量:1
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作者 张梦雄 杨志新 +4 位作者 王荣 陆健昇 夏炳辉 周晓巍 黄培堂 《生物技术通讯》 CAS 2016年第2期158-162,共5页
目的:建立不通过克隆步骤高通量表达来源于人单个B细胞的抗体轻、重链基因的方法。方法和结果:PCR扩增3个末端重叠的DNA片段,即1CMV启动子和编码抗体引导区序列的片段;2抗体Ig G1重链恒定区序列和牛生长激素(BGH)poly(A)信号序列,轻链I... 目的:建立不通过克隆步骤高通量表达来源于人单个B细胞的抗体轻、重链基因的方法。方法和结果:PCR扩增3个末端重叠的DNA片段,即1CMV启动子和编码抗体引导区序列的片段;2抗体Ig G1重链恒定区序列和牛生长激素(BGH)poly(A)信号序列,轻链Igκ恒定区序列和BGH poly(A)信号序列,轻链Igλ恒定区序列和BGH poly(A)信号序列;以及3抗体基因可变区序列V_H、V_κ或V_λ。3个片段通过重叠延伸PCR构建全长线性片段即线性表达框,将此来源于人单个B细胞的配对的抗体轻、重链线性表达框共转染293E细胞,72 h收集上清检测到表达的抗体。结论:构建的抗体基因线性表达框是无须克隆,快速高通量表达抗体基因进行筛选分析的策略。 展开更多
关键词 单克隆抗体 单个B细胞 抗体基因 重叠延伸PCR 线性表达框
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有关PCR制备siRNA表达框的研究及其应用
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作者 高云波 汪磊 钱旻 《生命科学仪器》 2006年第1期50-51,共2页
RNA干扰(RNAi)是指具有同源性的双链RNA导致靶mRNA发生序列特异性降解的现象。随着对RNAi分子机制研究的深入,该技术在哺乳动物的实现策略不断改进,最初是以化学方法合成小干扰RNA(siRNA),目前则包括化学合成法、体外转录法、RNaseⅢ家... RNA干扰(RNAi)是指具有同源性的双链RNA导致靶mRNA发生序列特异性降解的现象。随着对RNAi分子机制研究的深入,该技术在哺乳动物的实现策略不断改进,最初是以化学方法合成小干扰RNA(siRNA),目前则包括化学合成法、体外转录法、RNaseⅢ家族体外消化法、表达载体法和PCR制备siRNA表达框法等。本文将对PCR制备siRNA表达框法的原理以及具体过程以及其特点还有运用作一详细综述。 展开更多
关键词 RNA干扰 小干扰RNA(siRNA) siRNA表达框
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针对S基因的siRNA或shRNA表达框对HepG2.2.15细胞中HBV基因表达和病毒复制的抑制作用比较 被引量:2
10
作者 温伟红 刘家云 +7 位作者 王凯 薛茜 孟艳玲 赵晶 贾林涛 薛采芳 王成济 杨安钢 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期353-357,共5页
目的 化学合成针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因的siRNA,同时制备针对相同区段的shRNA表达框,并比较二者对HepG2.2.15细胞中HBV基因表达和病毒复制的抑制作用。方法 化学合成针对HBVS基因的带有FITC标记的siRNA,设计合成带有FTrc标记... 目的 化学合成针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因的siRNA,同时制备针对相同区段的shRNA表达框,并比较二者对HepG2.2.15细胞中HBV基因表达和病毒复制的抑制作用。方法 化学合成针对HBVS基因的带有FITC标记的siRNA,设计合成带有FTrc标记的引物,PCR扩增含有RNA聚合酶Ⅲ启动子H1序列和shRNA编码序列的表达框,并对扩增产物进行纯化,将等摩尔数siRNA和shRNA表达框分别用脂质体转染稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞,转染1d后流式细胞仪检测转染效率,转染3d后RT-PCR检测靶基因mRNA的水平,用SDS-PAGE、Westem blot及间接免疫荧光染色检测HBsAg的表达。收集转染前和转染后1、3、5和7d的细胞培养上清,检测HBsAg水平,同时用荧光定量PCR方法检测HBV DNA的含量。结果成功制备了针对HBVS基因的shRNA表达框,将其与等摩尔数siRNA分别转染HepG2.2.15细胞后,RT-PCR证实细胞中HBV mRNA水平降低,SDS-PAGE、Westem blot及间接免疫荧光染色检测到HBsAg的表达受到抑制,细胞培养上清中HBsAg和HBV DNA含量下降。与siRNA相比,shRNA表达框对HBV的抑制作用虽然起效较慢,但持续时间更长。结论shRNA表达框和siRNA均可明显抑制HBV的转录和表达,与siRNA相比,shRNA表达框能够更持久地抑制靶基因的表达。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 RNA干扰 shRNA表达框 SIRNA
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RNAi对人类皮肤成纤维细胞COL1A1及COL3A1表达的影响 被引量:3
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作者 王琼 彭振辉 +4 位作者 王万卷 耿松梅 牛新武 王梅 刘平 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期1-6,共6页
目的研究RNA干扰(RNAi)技术对人类皮肤成纤维细胞(HSF)COL1A1及COL3A1表达的影响。I型胶原和III型胶原是构成皮肤结缔组织的主要成份,其异常是造成真皮结缔组织以及纤维增生性疾病病理变化的主要因素。RNAi技术可有效抑制特定基因的表... 目的研究RNA干扰(RNAi)技术对人类皮肤成纤维细胞(HSF)COL1A1及COL3A1表达的影响。I型胶原和III型胶原是构成皮肤结缔组织的主要成份,其异常是造成真皮结缔组织以及纤维增生性疾病病理变化的主要因素。RNAi技术可有效抑制特定基因的表达。方法利用小干扰RNA(siRNA)表达框(SEC)快速筛选有效干扰序列,再将有效SEC的siRNA片段连接入表达载体并转染HSFs,获得稳定抑制效果。结果经过筛选的有效SEC可特异性抑制HSFs中COL1A1和COL3A1的表达(分别至野生株的5.00%和6.48%),载体介导的有效干扰序列可稳定抑制HSFs中COL1A1和COL3A1的表达,抑制效果达30d(分别至阴性对照的25.21%和22.12%)。结论SEC和载体介导的RNAi均可有效并且特异性抑制COL1A1和COL3A1在HSFs中的表达。 展开更多
关键词 RNA干扰 基因沉默 COL1A1 COL3A1 胶原 siRNA表达框
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RNA干扰分子的制作 被引量:4
12
作者 荀恒杰 于源华 蔡林君 《生命科学》 CSCD 2006年第2期190-194,共5页
小干扰RNA是一种能够在各种生物体和细胞(包括蠕虫、果蝇、植物、哺乳动物)中减弱基因表达的有效工具。在哺乳动物中转染的siRNA能够抑制特殊基因的表达,这已经证明是探索基因功能、基因敲除、抗病毒研究、基因治疗的有效方法。简单、... 小干扰RNA是一种能够在各种生物体和细胞(包括蠕虫、果蝇、植物、哺乳动物)中减弱基因表达的有效工具。在哺乳动物中转染的siRNA能够抑制特殊基因的表达,这已经证明是探索基因功能、基因敲除、抗病毒研究、基因治疗的有效方法。简单、有效、特异性地抑制基因的表达具有巨大的科学、商业和医学治疗价值。如何设计和制作siRNA是影响RNA干扰效率的一个很重要的方面。本文就siRNA的设计和制作等方面作扼要的介绍。 展开更多
关键词 T7启动子 小干扰RNA 小发夹RNA 小干扰RNA表达框 U6聚合酶Ⅲ启动子
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结直肠癌组织中T-框蛋白5表达与临床病理特征及预后的关系
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作者 陆森 慕迪 《中国肿瘤临床与康复》 2022年第8期918-921,共4页
目的 探讨结直肠癌组织中T-框蛋白5表达与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2020年2月至2021年2月间锦州市中心医院收治的180例结直肠癌患者,分析结直肠癌组织中TBX5表达与临床病理特征的关系,统计分析人结肠癌细胞株中、各组HT29细... 目的 探讨结直肠癌组织中T-框蛋白5表达与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2020年2月至2021年2月间锦州市中心医院收治的180例结直肠癌患者,分析结直肠癌组织中TBX5表达与临床病理特征的关系,统计分析人结肠癌细胞株中、各组HT29细胞中TBX5 mRNA和蛋白表达水平。结果 180例患者中,TBX5表达阳性44例,阳性率为24.4%,其中浸润深度T1、T2、T3、T4患者的TBX5表达阳性率逐渐降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。有淋巴结转移、神经侵犯患者的TBX5表达阳性率分别低于无淋巴结转移、无神经侵犯患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。SW620细胞、LOVO细胞、HCT116细胞、SW480细胞、HT29细胞中TBX5 mRNA和蛋白表达水平均逐渐降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。TBX5转染组HT29细胞中TBX5 mRNA和蛋白表达水平均高于阴性对照组、空白对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 结直肠癌组织中T-框蛋白5表达与浸润深度、淋巴结转移、神经侵犯及预后的关系密切。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 组织 T-蛋白5表达 临床病理特征 预后 关系
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Expression and localization of a novel phosducin-like protein from amphioxus Branchiostoma belcheri
14
作者 萨仁高娃 赵永刚 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2009年第2期324-330,共7页
A full length amphioxus cDNA, encoding a novel phosducin-like protein (Amphi-PhLP), was identified for the first time from the gut cDNA library of Branchiostoma belcheri. It is comprised of 1 550 bp and an open read... A full length amphioxus cDNA, encoding a novel phosducin-like protein (Amphi-PhLP), was identified for the first time from the gut cDNA library of Branchiostoma belcheri. It is comprised of 1 550 bp and an open reading frame (ORF) of 241 amino acids, with a predicted molecular mass of approximately 28 kDa. In situ hybridization histochemistry revealed a tissue-specific expression pattern of Amphi-PhLP with the high levels in the ovary, and at a lower level in the hind grit and testis, hepatic caecum, gill, endostyle, and epipbaryngeal groove, while it was absent in the muscle, neural tube and notochord. In the Chinese Hamster Ovary (CHO) cells transfected with the expression plasmid pEGFP-NI/Amphi-PhLP, the fusion protein was targeted in the cytoplasm of CHO cells, suggesting that Amphi-PhLP is a cytosolic protein. This work may provide a framework for further understanding of the physiological function of Amphi-PhLP in B. belcheri. 展开更多
关键词 amphioxus B. belcheri Amphi-PhLP northern blotting in situ hybridization cellularlocalization
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Efficient Path Query and Reasoning Method Based on Rare Axis
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作者 姜洋 冯志勇 +1 位作者 王鑫 马晓宁 《Transactions of Tianjin University》 EI CAS 2015年第3期278-283,共6页
A new concept of rare axis based on statistical facts is proposed, and an evaluation algorithm is designed thereafter. For the nested regular expressions containing rare axes, the proposed algorithm can reduce its eva... A new concept of rare axis based on statistical facts is proposed, and an evaluation algorithm is designed thereafter. For the nested regular expressions containing rare axes, the proposed algorithm can reduce its evaluation complexity from polynomial time to nearly linear time. The distributed technique is also employed to construct the navigation axis indexes for resource description framework(RDF) graph data. Experiment results in Drug Bank and Bio GRID show that this method can improve the query efficiency significantly while ensuring the accuracy and meet the query requirements on Web-scale RDF graph data. 展开更多
关键词 GRAPH PATH regular expression COMPLEXITY distribution
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Construction and Identification of the Helper Plasmids for Reverse Genetic System of Rabies Virus Street Strain
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作者 Ping-gang MING Ying HUANG +4 位作者 Qing TANG Jia-liang DU Xiao-yan TAO Jia-xin YAN Rong-liang HU 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2009年第6期559-565,共7页
To obtain the helper plasmids for a reverse genetics system of rabies virus, the cDNAs of the complete open reading frames of the N, P, G, and L genes of rabies street virus stain HN10 were each cloned into expression... To obtain the helper plasmids for a reverse genetics system of rabies virus, the cDNAs of the complete open reading frames of the N, P, G, and L genes of rabies street virus stain HN10 were each cloned into expression vector pVAX1, These four plasmids were identified by restriction enzyme digestion and gene sequencing. The plasmid encoding the N protein was selected to determine the expression effect of these plasmids in NA cells. The results showed that the helper plasmids for a reverse genetics system of rabies street virus strain HN10 had been successfully constructed. 展开更多
关键词 Rabies virus Helper plasmids Reverse genetic system
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