Tie2阳性表达的单核细胞在肿瘤血管生成中的作用

肿瘤的转移和复发与肿瘤血管的生成密切相关，肿瘤新生血管的发生机制以及相关的抗肿瘤治疗策略已成为近期的研究热点。何胜利等[1]研究表明，Tie2／血管生成素（angiopoietin，Ang）体系在肿瘤血管生成中发挥重要作用。Ang是一种分泌型的生长因子家族，该家族主要由4种因子组成，其中Ang-1、Ang-2和它们共同的受体Tie2与血管生成密切相关。

重组人内皮单核细胞活化多肽Ⅱ原对Saos-2细胞基因的表达调控

目的:将重组人内皮单核细胞活化多肽Ⅱ原(pro-EMAPⅡ)作用于Saos-2细胞,研究后者相关基因表达水平的变化。方法:在大肠杆菌中表达重组人pro-EMAPⅡ,并纯化获得目的蛋白;利用基因芯片技术研究重组人pro-EMAPⅡ对Saos-2细胞基因的表达调控。结果:获得重组人pro-EMAPⅡ;基因表达芯片分析表明,重组人pro-EMAPⅡ作用于Saos-2细胞后,后者有39个基因表达上调,29个基因表达下调,在这68个基因中有12个差异基因参与多个信号通路。结论:重组人pro-EMAPⅡ作用于Saos-2细胞,使其多个基因表达水平发生改变,有助于揭示pro-EMAPⅡ的调控机制及信号通路。

1-(5-异喹啉磺酰基)-2-甲基哌嗪(H-7)对肺纤维化大鼠肺单核细胞趋化蛋白-1 mRNA表达的影响

研究蛋白激酶C(PKC)抑制剂 1 (5 异喹啉磺酰基 ) 2 甲基哌嗪 (H 7)对肺纤维化大鼠单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)mRNA表达的影响 ,为临床治疗肺纤维化提供理论基础 .博来霉素致大鼠肺纤维化动物模型 ,腹腔注射H 7后 ,定量RT PCR方法检测其对肺组织MCP 1mRNA表达的影响 ;测定实验组和对照组肺组织匀浆内羟脯氨酸的含量 ,观察肺组织病理学变化并计数单核细胞 .结果发现 ,H 7能显著抑制大鼠肺纤维化组织MCP 1mRNA表达和单核细胞的聚集以及羟脯氨酸的含量 .结果表明 ,H 7通过抑制肺组织MCP 1mRNA的表达 ,对博来霉素致肺纤维化有明显的防治作用 .

循环可溶性生长刺激表达基因2蛋白水平与白细胞介素1受体样分子1基因多态性的相关性分析

目的探讨循环可溶性生长刺激表达基因2蛋白(s ST2)与白细胞介素1受体样分子1(IL1RL1)基因多态性的关系。方法利用国际千人基因组项目筛选出完整的IL1RL1基因和标签单核苷酸多态性(SNP),然后提取2016年10月至2017年4月于首都医科大学附属北京安贞医院进行体检的350例受试者的全基因组DNA,聚合酶链反应扩增后,采用MALDI-TOF质谱仪分析,检测结果使用TYPER 4.0软件获取原始数据及基因分型图。分析s ST2水平与IL1RL1基因标签SNP的相关性。结果所有受试者s ST2水平为6.45(4.58,9.38)μg/L。IL1RL1基因共筛选出5个标签SNP,分别为rs12712135、rs1921622、rs11123923、rs3821204、rs4988958,均与s ST2水平相关(均P<0.05),其中rs12712135位点与s ST2水平相关性最显著。调整年龄、性别、体重指数、吸烟、基础疾病后,5个SNP仍与高s ST2水平(≥6.45μg/L)风险独立相关(均P<0.05)。结论循环s ST2水平受IL1RL1基因遗传变异的影响。

重型肝炎患者fgl2凝血酶原酶基因的表达

目的 探讨重型肝炎患者外周血单个核细胞 (PBMNC)中fgl2凝血酶原酶mRNA的变化及其意义。方法 选择重型肝炎患者 18例 ,非重型急性肝炎 15例、非重型慢性肝炎 14例 ,应用RT PCR方法对其外周血fgl2凝血酶原酶mRNA进行半定量检测。结果 重型肝炎组外周血fgl2凝血酶原酶mRNA与 β actinmRNA表达灰度值比值为 1 55±0 2 3 ,明显高于非重型急性肝炎组 (1 3 4± 0 18)、非重型慢性肝炎组 (1 2 9± 0 16)及正常对照组 (1 3 1± 0 12 ) ,均为P <0 0 1。结论 重型肝炎患者的肝坏死可能与fgl2凝血酶原酶的高表达有关 。

血管内皮细胞特异表达Cre重组酶转基因小鼠的建立(英文)

血管内皮细胞参与血管形成、血管稳态维持、血栓形成、炎症和血管重建等生理和病理过程。为了便于通过Cre-LoxP系统研究相关基因在血管内皮细胞中的功能,创建了Tie2-Cre转基因小鼠,利用Tie2基因的启动子驱动Cre重组酶基因在血管内皮细胞中表达。经基因组PCR和SouthernBlot鉴定有6只小鼠在基因组上整合有Cre基因,整合率为11%。为了验证Cre重组酶的剪切活性和表达组织分布,我们将Tie2-Cre转基因小鼠分别与Smad4条件基因打靶小鼠和报告小鼠ROSA26交配。Tie2-Cre;Smad4Co/+小鼠的多个组织的基因组DNA的PCR结果显示,Cre重组酶在所有包含血管内皮细胞的组织中表达并能介导LoxP间的重组。Tie2-Cre;ROSA26双转基因胚胎LacZ染色结果显示,Cre重组酶在所有被检测组织的血管内皮细胞中特异性表达。因此,Tie2-Cre转基因小鼠可作血管内皮细胞谱系分析和在血管内皮细胞进行条件基因打靶的理想工具小鼠。

COX-2在系统性红斑狼疮病人PBMC中的表达及意义

目的 检测环氧全酶 -2 (Cyclooxygenase -2 ,COX -2 )蛋白在系统性红斑狼疮 (Systemiclupuserythematosus ,SLE)患者外周血单核细胞 (Peripheralbloodmonocytes ,PBMC)中的表达情况。探讨COX -2蛋白表达水平与SLE病情活动程度之间的关系。 方法 从外周血中分离PBMC后涂片 ,用免疫组化染色的方法测定COX -2蛋白的表达情况。 结果 COX -2蛋白在SLE实验组呈高表达状态 ,与SLE疾病的活动性之间呈正相关。 结论 COX -2的表达与SLE的发病有关 。

表达Tie2基因单核细胞在肿瘤血管生成中作用

近些年来，恶性肿瘤的发病率及死亡率逐年上升。而恶性肿瘤的侵袭、转移、发展已经成治疗肿瘤的瓶颈。从1971年提出“阻断血管，饿死肿瘤”假说，到2004年第1个抑制肿瘤血管药物问世，

卵巢上皮性癌中表达Tie2单核巨噬细胞的研究

目的 探讨卵巢上皮性癌(EOC,epithelial ovarian cancer)患者外周血和癌旁腹膜中表达Tie2单核巨噬细胞(Tie2-expressing moncytes/macrophages,TEMs)的分布情况。方法 2011年7月至2012年12月于同济大学附属第一妇婴保健院,分离正常成年女性、卵巢良性肿瘤及EOC患者外周血单核细胞;RT-PCR检测Tie2 mRNA的表达情况,流式细胞术检测Tie2^+细胞占CD14^+外周血单个核细胞的比例;免疫荧光技术分析TEMs在良性卵巢肿瘤、EOC原位灶及癌旁腹膜中的浸润情况。结果 正常成年女性、良性卵巢肿瘤及EOC患者外周血单核细胞在mRNA和蛋白水平均表达Tie2;良性卵巢肿瘤及EOC患者外周血TEMs的比例分别为(9.41±5.93)%、(1.82%~23.45%)和(7.99±3.90)%(1.71%~15.03%),较正常对照组(4.13±2.86)%(1.18%~9.56%)比例增加,差异有统计学意义(P<0.05);形态学研究证实EOC患者癌旁腹膜中浸润着数量丰富的TEMs(15.17±8.84)%(2.27%~25.81%),而良性卵巢肿瘤患者腹膜中几乎没有TEMs的浸润。结论 EOC患者外周血、原位灶及癌旁腹膜组织中存在表达Tie2的单核巨噬细胞;TEMs比例在EOC患者外周血、腹膜局部显著上升,有利于肿瘤微环境中血管的生成,从而参与调控卵巢癌的进展。

表达Tie2的单核巨噬细胞在肿瘤微环境形成中的作用及机制研究进展

表达Tie2的单核巨噬细胞（Tie2 expressing monocyte/macrophages,TEMs）是肿瘤相关巨噬细胞的重要亚群,存在于外周血、实体肿瘤等组织中。在肿瘤免疫抑制微环境中,TEMs能促进肿瘤生长、转移和复发,是肿瘤预后不良的新的指标,其作用机制主要通过促进血管生成、调节血管重塑、增加微血管密度、促进肿瘤微血管的形成;同时还可以抑制T细胞增殖、促进Treg的浸润、抑制抗肿瘤免疫应答。Ang-Tie2介导的Rheb/m TOR/p70S6K1信号通路是TEMs在肿瘤免疫微环境中促进肿瘤微血管生成的作用机制,对该细胞及相关通路的干预将成为新的肿瘤治疗靶点和策略。

慢性乙型肝炎病毒感染患者血清IL-33、sST2、MCP-1水平变化及其临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎病毒感染患者血清白细胞介素-33(IL-33)及其受体可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)与单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平变化,并分析其临床意义。方法选取2017年1月~2018年1月广东省东莞市人民医院收治的105例慢性乙型肝炎病毒感染患者作为观察组,其中单纯慢性乙肝患者67例(慢性乙肝组),合并肝衰竭38例(肝衰竭组),同期选择50名无肝脏疾病的健康志愿者作为对照组。分别测定各组血清IL-33、sST2以及MCP-1水平,并根据Ishak病理评分对慢性乙肝组患者的肝纤维化程度进行评定,比较不同肝纤维化程度患者的上述指标表达情况。结果慢性乙肝组与肝衰竭组的IL-33、sST2与MCP-1水平均明显高于对照组,且肝衰竭组的IL-33、sST2与MCP-1表达水平明显高于慢性乙肝组,差异有统计学意义(P < 0.05)。与轻度肝纤维化组比较,中度肝纤维化组、重度肝纤维化组和肝硬化组的IL-33、sST2与MCP-1均升高,且重度肝纤维化组和肝硬化组IL-33、sST2与MCP-1水平高于中度肝纤维化组,肝硬化组IL-33、sST2与MCP-1水平高于重度肝纤维化组,差异有统计学意义(P < 0.05)。经Pearson相关分析显示,慢性乙肝组患者IL-33、sST2与MCP-1与Ishak评分呈正相关(r = 0.573、0.728、0.654,P < 0.05)。结论血清IL-33、sST2与MCP-1对慢性乙型肝炎病毒感染及其病情加重有评估预测作用,对患者开展血清指标检验有助于疾病诊断与预后评估。

Involvement of annexin A2 in anti-β2GPI/β2 GPI-induced tissue factor expression on monocytes

Dear Editor： Growing evidence demonstrates that β2-glycoprotein Ⅰ （β2GPI） is the key target for antiphospholipid antibodies which are closely associated with thrombotic events in antiphospholipid syndrome （APS） . Anti-β2GPI/β2GPI complex can bind to the surface membrane ofmonocytes and endothelial cells, promoting tissue factor （TF） activity on these cells, and thus increasing the risk of thrombosis.

乙型肝炎慢加急性肝衰竭患者血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1水平及其与肝功能的相关性分析

目的探讨乙型肝炎慢加急性肝衰竭患者血清白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、可溶性生长刺激表达基因2(soluble growth-stimulating expression gene 2,sST2)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)水平变化及其与肝功能的相关性。方法选择2020年6月至2021年6月杭州市西溪医院收治的50例乙型肝炎病毒感染慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,HBV-ACLF)患者(HBV-ACLF组)、50例单纯慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者(CHB组)、50名健康人员(对照组)作为研究对象,比较3组患者的肝功能各项指标天门冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、总胆红素(total bilirubin,TBiL)、白蛋白(albumin,ALB)及血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1的表达水平,并比较血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1水平和肝功能指标的相关性。结果HBV-ACLF组AST、ALT、TBiL、血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1水平均高于CHB组与对照组,ALB均低于CHB组与对照组,CHB组AST、ALT、TBiL、血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1水平均高于对照组,ALB均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);皮尔逊(Pearson)相关性分析显示,血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1和AST、ALT、TBiL均呈正相关,与ALB呈负相关(P<0.05)。结论血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1水平在HBV-ACLF患者中表达明显升高,与患者的肝功能具有相关性。

多发性硬化患者外周血单个核细胞转录因子Sp3基因表达缺失及其与免疫的关系

目的 研究多发性硬化（MS）患者外周血单个核细胞（PBMC）转录因子Sp3基因的表达情况及其与机体免疫功能的关系。方法 贵州地区发病的汉族MS患者31例及健康对照30名，采用逆转录PCR（RT-PCR）检测其PBMC的Sp3基因表达情况；双抗体夹心ELISA法检测血清可溶性自细胞介素-2受体（sIL-2R）水平。结果 MS组与健康对照组PBMC cDNA扩增Sp3基因阴性率差异有统计学意义[分别为41．9％（12／31）和6．7％（2／30），Х^2=7．133，P=0．008]。MS组血清sIL-2R含量较健康对照组明显升高[（2788．5±1079．8）、（1270．6±489．4）μg／L，t=6．170，P=0．001]，其中Sp3基因阴性[（3364．0±1252．3）μg／L]、阳性[（2450．0±827．0）μg／L]表达患者血清sIL-2R含量较健康对照组均明显升高（F=32．059，P〈0．05），Sp3基因阴性表达患者比阳性表达患者sIL-2R含量明显升高（q=4．213，P〈0．05）。结论贵州地区发病的汉族MS患者PBMC中存在Sp3基因表达缺失，提示汉族MS患者Sp3基因表达无明显的地域差异。sIL-2R参与了MS的发病过程，Sp3基因表达缺失后机体发生了更严重的免疫功能障碍。

醛固酮对高糖状态下肾小球系膜细胞血管紧张素Ⅱ受体基因表达的影响

血管紧张素Ⅱ能通过其1型受体（AT1R）和2型受体（AT2R）途径活化NF—κB，诱导单核细胞趋化蛋白1（MCP—1）表达12I，导致炎性反应。而醛同酮（ALD）是否也有类似的作用，尚未阐明。由于ALD能通过作用于肾脏周有细胞参与肾脏的损伤。因此，本实验通过研究ALD对高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞（RMC）上AT1aR和AT2R基因表达的影响，探讨ALD在糖尿病肾病（DN）中的作用机制。

B7-H3^＋ TEMs在肾透明细胞癌血管生成中的作用

目的探讨B7-H3在Tie2表达单核巨噬细胞（Tie2 expressing monocytes, TEMs）介导肾透明细胞癌（ccRCC）血管生成中的作用。方法2016年4—12月采用流式细胞术检测确诊的20例肾透明细胞癌组织及癌旁正常肾组织中TEMs表面B7-H3表达情况；利用免疫组化染色法检测肾透明细胞癌B7-H3^＋TEMs高表达和B7-H3^＋TEMs低表达者CD34标记的微血管密度之间的差异；将786-O肾癌细胞株与B7-H3^＋TEMs和B7-H3^－TEMs共培养，收集B7-H3^＋TEMs和B7-H3^－TEMs培养上清液作为条件培养基（分别为B7-H3^＋TEMs组和B7-H3^－TEMs组，另外以普通培养基为空白对照组），通过小管形成实验和小鼠主动脉环实验验证B7-H3^＋TEMs对血管形成能力的影响。结果肾透明细胞癌组织中TEMs表面B7-H3分子表达率为（45.10±17.78）%，癌旁正常肾组织的表达率为（10.28±4.28 ）%，差异有统计学意义（P〈0.01）；B7-H3^＋TEMs低表达者微血管密度为76.55±20.80，B7-H3^＋TEMs高表达者微血管密度为103.81±29.28，差异有统计学意义（P=0.027）；小管形成实验结果显示B7-H3^＋TEMs组脐静脉内皮细胞的小管形成数量（55.25±11.48）显著多于B7-H3^－TEMs组（31.34±8.45）和空白对照组（25.00±6.74） （P〈0.001）。小鼠主动脉环实验结果显示B7-H3^＋TEMs组新生血管形成数量（77.35±18.47）显著多于B7-H3^－TEMs组（39.42±8.29）和空白对照组（28.79±7.63） （P〈0.001）。结论B7-H3＋TEMs在肾透明细胞癌的血管生成中可能发挥重要作用，有望成为肾透明细胞癌抗血管生成治疗的有效靶标。

重症心力衰竭患者血清可溶性生长刺激表达基因2蛋白水平及意义

目的观察重症心力衰竭患者血清可溶性生长刺激表达基因2蛋白(soluble suppression of tumorigenicity 2, sST2)水平及中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio, NLR)、单核细胞与高密度脂蛋白胆固醇比值(monocyte to high-density lipoprotein cholesterol ratio, MHR)变化,探讨其与重症心力衰竭患者预后的关系。方法 85例重症心力衰竭患者均给予规范治疗,病情缓解出院后随访6个月,67例生存者为生存组,18例死亡者为死亡组。比较2组性别、年龄、心率、血压等指标以及入院24 h内白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、单核细胞计数及血清三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、肌酐水平;比较2组入院24 h内及出院前1 d血清N末端脑钠肽前体(N-terminal-probrain natriuretic peptide, NT-proBNP)、sST2水平及NLR、MHR、左室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF);Pearson相关法分析重症心力衰竭患者入院24 h内血清sST2水平及NLR、MHR与血清NT-proBNP水平、LVEF的相关性;绘制ROC曲线,评估血清sST2及NLR、MHR预测重症心力衰竭患者死亡的价值。结果死亡组心率快于生存组(P<0.05),白细胞计数、中性粒细胞计数、单核细胞计数、血肌酐水平均高于生存组(P<0.05),淋巴细胞计数、高密度脂蛋白胆固醇水平均低于生存组(P<0.05),女性比率、年龄、体质量、合并基础疾病比率、入院24 h内收缩压及血清三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平与生存组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。入院24 h内及出院前1 d,死亡组NLR(8.67±1.12、8.11±1.06)、MHR(0.96±0.04、0.89±0.03)及血清sST2[(68.42±8.47)、(66.75±7.06)μg/L]、NT-proBNP[(9 809.01±864.52)、(9 517.35±364.85)μg/L]水平均高于生存组[NLR(5.52±1.37)、(4.12±0.98),MHR(0.78±0.02)、(0.62±0.01),sST2(62.63±6.96)、(57.82±4.19)μg/L,NT-proBNP(9 259.83±585.68)、(4 975.26±322.47)μg/L](P<0.05),LVEF[(31.01±1.86)%、(30.65±1.64)%]低于生存组[(35.17±2.04)%、(37.58±1.72)%](P<0.05);生存组出院前1 d血清NT-proBNP、sST2水平及NLR、MHR均低于入院24 h内(P<0.05),死亡组出院前1 d血清NT-proBNP、sST2水平及NLR、MHR与入院24 h内比较差异均无统计学意义(P>0.05)。重症心力衰竭患者血清sST2水平及NLR、MHR与LVEF均呈负相关(r=-0.837,P=0.010;r=-0.826,P=0.011;r=-0.807,P=0.015),与血清NT-proBNP水平均呈正相关(r=0.893,P=0.002;r=0.786,P=0.021;r=0.879,P=0.004)。血清sST2及NLR、MHR分别以59.5μg/L、5.585、0.760为最佳截断值,单独及联合预测重症心力衰竭患者死亡的AUC分别为0.781(95%CI:0.652~0.910,P=0.016)、0.853(95%CI:0.741~0.965,P=0.027)、0.806(95%CI:0.680~0.933,P=0.015)、0.864(95%CI:0.756~0.973,P=0.001),灵敏度分别为74.2%、82.3%、80.6%、84.2%,特异度分别为64.5%、71.0%、67.7%、73.7%。结论重症心力衰竭患者NLR、MHR及血清sST2水平增高,提示短期死亡风险增高,三者联合检测对重症心力衰竭患者短期死亡预测价值更高。

基于加权基因共表达网络分析运动性精子结构域包含蛋白2在类风湿关节炎中的表达及与疾病活动度的相关性

目的利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)及实验验证寻找RA相关的关键基因。方法从GEO数据库下载了RA患者基因芯片数据,构建基因网络,利用WGCNA将基因划分为不同的模块,将与RA临床症状相关的模块中的关键基因进行了基因本体论分析。随后使用GEO不同的数据集用受试者工作特征曲线(ROC)评价关键基因对RA诊断的准确性。此外,还通过实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)及蛋白质印迹法验证关键基因在RA中的表达,分析其与DAS28的关系。采用配对样本t检验和Pearson相关性分析对结果进行分析。结果共筛选出5413个基因构建了加权基因共表达网络,将基因分为23个模块。其中,黑色模块与RA临床症状密切,包含346个基因。富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析显示其要富集于对IL-6的正调控、IL-1β分泌、破骨细胞分化、NOD样受体信号通路、辅助性T细胞(Th)17细胞分化等多个与RA密切相关的通路。其中运动性精子结构域包含蛋白2(MOSPD2)与临床症状具有明显相关性,在血液单核细胞、骨髓单核细胞中高表达(t=2.238,P=0.032;t=3.153,P=0.006),在RA关节滑膜液中与血液中表达呈正相关(r=0.683,P=0.03)。ROC曲线分析表明,MOSPD2能区分RA和对照组(曲线下面积分别为0.855和0.726)。RT-PCR及蛋白质印迹法结果显示,MOSPD2在RA患者中表达上调(t=-3.96,P=0.02)。MOSPD2在血液中的表达水平与RA患者的DAS28呈正相关(r=0.8846,P=0.0462)。结论MOSDP2与RA患者临床症状密切相关,可能是诊断及治疗RA的靶点之一。