细胞表面抗体相关的自身免疫性脑炎短期预后的影响因素

目的 分析细胞表面抗体相关的自身免疫性脑炎(sAE)短期预后的影响因素。方法 收集郑州大学第一附属医院2019-06—2022-10首次被诊断为sAE的患者98例,分为预后良好组和预后不良组,对sAE患者的一般资料、临床特征、脑脊液检查及短期预后进行回顾性分析。结果 预后良好组和预后不良组比较,起病状态差异有统计学意义(P<0.05);2组血-脑屏障通透性明显不同,差异有统计学意义(P=0.005);预后良好组脑脊液寡克隆蛋白和IgG商与预后不良组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。纳入多因素分析后,起病状态(OR=5.303,95%CI 1.225~22.961,P<0.05),血-脑屏障通透性改变(OR=4.485,95%CI 1.063~18.922,P<0.05)与sAE患者预后相关。结论 起病状态、血-脑屏障通透性是影响sAE患者短期预后的因素。

肺表面活性物质相关蛋白A与肺部免疫防御研究进展

肺表面活性物质相关蛋白A（SP—A）是一种高度保守的亲水性糖蛋白，属于C-型凝素家族成员，相对分子质量为29～36kDa。SP—A是肺部重要的天然免疫防御分子，在肺的局部防御和天然免疫反应中起着十分重要的作用。它不仅可调节局部免疫和炎症反应、调理吞噬作用，还可凝集病原微生物、影响趋化作用及促进杀菌作用等。

Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白基因的克隆和原核表达

目的重组表达Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白(Surfaceimmunogenicprotein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白。方法用PCR的方法从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入pMD18T载体,构建原核表达载体pET32aSIP,用BL21(DE3)/pET系统表达TrixSIP融合蛋白,SDSPAGE和质谱分析鉴定表达产物,并对表达蛋白进行初步纯化。结果PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中Ⅰa/c型GBS的SIP的基因序列同源性为99%。SDSPAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET32aSIP总蛋白中出现一条相对分子质量为66000的新蛋白带。质谱分析和蛋白质库的比较证实其为B族链球菌表面免疫相关蛋白(SIP)的可能性分数为74。结论已成功表达并初步纯化SIP,为SIP在细菌致病中的作用研究以及相关疫苗的制备奠定了基础。

肺表面活性物质相关蛋白A的免疫调节功能

肺表面活性物质相关蛋白A(SP A)是肺表面活性物质相关蛋白中最重要的成分之一。作者概述了SP A的分子结构与免疫的关系 ,以及对微生物、炎症细胞、炎症介质和抗体等的作用 ,提示SP A具有广泛的免疫调节功能。

肺表面活性物质相关蛋白A在肺癌组织中的表达及意义

目的研究肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)在肺腺癌和鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化En Vision二步法,检测27例肺腺癌、15例鳞状细胞癌组织中SP-A的表达,并分析其与临床病理诸因素之间的关系。结果SP-A在肺腺癌、鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为51.85%、6.67%,腺癌组织中SP-A的表达明显高于鳞状细胞癌组织(P<0.01)。SP-A在乳头状腺癌、细支气管肺泡癌、腺泡性腺癌和黏液性腺癌组织中的表达率依次为85.71%、50%、40%和25%。SP-A的表达与患者性别、年龄、肿瘤直径大小和淋巴结转移均无关。结论SPA的表达可能与肺癌的组织学类型有关,可作为鉴别肺腺癌与鳞状细胞癌的参考指标。

人胚肺发育不同阶段表面活性物质相关蛋白-D的表达及意义

目的观察肺表面活性物质相关蛋白-D(SP-D)在人胚胎肺发育成熟过程中表达的特征.方法取11～36周人胎肺组织常规石蜡包埋切片,HE染色观察胚肺各个发育阶段的成熟度,免疫组化检测SP-D时相性表达特征.结果人胚胎发育12周肺组织开始表达SP-D,定位于胚肺支气管上皮和肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)胞质内,在胚肺发育小管期和囊泡期逐渐表达增强;开始由支气管近端逐渐向肺泡Ⅱ型细胞迁移.肺发育末期至出生后,SP-D均在AECⅡ中稳定表达. 结论SP-D随着胎肺发育成熟,表达逐渐增强,阳性细胞开始出现于胚肺支气管上皮细胞,逐渐定位于肺泡Ⅱ型细胞.

肺泡表面活性物质相关蛋白D与肺损伤

肺泡表面活性物质相关蛋白(Suefactant Protein, SP)是肺泡表面活性物质(Pulmonary Surfactant, PS)的组成成分，SP-D是组成SP的亲水性蛋白之一，它分布于肺组织和几乎所有器官粘膜表面，在维持肺表面活性物质稳态、宿主的免疫防御和免疫调节方面起着重要作用。肺损伤的病理生理过程与由于SP-D降解增加所导致的宿主防御功能削弱、免疫细胞呑噬功能降低等机制有关。SP-D在ALI的临床治疗方面有着良好的前景。本文从SP-D的结构、功能、以及与肺损伤和治疗的关系等方面进行了综述和分析。

肺表面活性物质相关蛋白A、D与临床应用研究

肺表面活性物质（pulmonary surfactant,PS）为磷脂蛋白复合物,其中磷脂约占90%,肺表面活性物质相关蛋（surfactant-associatein,SP）占8%-10%。SP包括亲水性的SP-A、SP-D和疏水性的SP-B、SP-C [1], SP-A、SP-D共同发挥宿主的免疫防御和免疫调节功能。本综述主要讲述SP-A、SP-D的结构功能及其临床应用。

肺表面活性蛋白A在变应性鼻炎患者鼻黏膜和血清中的表达

目的观察肺表面活性蛋白A(surfactant protein A,SP-A)在变应性鼻炎(AR)患者鼻黏膜组织及血清中的表达,从而探讨AR与SP-A之间的关系。方法收集鼻中隔偏曲伴AR患者手术标本和血清样本各24例为观察组,同期单纯鼻中隔偏曲伴鼻甲肥大患者手术标本和血清标本各10例为对照组。采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分别检测其鼻黏膜组织样本及血清样本中SP-A表达,免疫组化法观察SP-A在两组鼻黏膜组织样本中的表达。结果 ELISA测得观察组鼻黏膜组织中SP-A浓度为(45.191±15.838)ng/ml显著高于对照组的(13.100±0.760)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.001);观察组血清中SP-A浓度为(23.960±8.281)ng/ml亦显著高于对照组的(10.744±0.475)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.001)。免疫组化检测结果显示观察组SP-A阳性表达多于对照组,差异有统计学意义。结论患者鼻黏膜组织及血清中SP-A的表达增高,提示SP-A可能参与了AR疾病的发生发展。

罗非鱼无乳链球菌SIP微胶囊口服疫苗免疫效果研究

为研究无乳链球菌Streptococcus agalactiae表面免疫蛋白(surface immunogenic protein,SIP)微胶囊口服疫苗对罗非鱼Oreochromis niloticus的免疫效果,将制备的无乳链球菌SIP微胶囊疫苗口服免疫健康的罗非鱼,以注射免疫无乳链球菌灭活疫苗为阳性对照,口服包埋PBS的微胶囊颗粒为阴性对照,分别于免疫后0、7、14、28d取脾脏组织,通过实时荧光定量PCR方法检测脾脏组织中的白细胞分化抗原CD4、白介素IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子TNF-α、核转录因子NF-κB等5种免疫相关基因表达的变化,并于第5周进行人工感染攻毒试验,计算无乳链球菌SIP微胶囊口服疫苗对罗非鱼的相对免疫保护率。结果显示,免疫接种之后,SIP微胶囊疫苗口服免疫组(SIP疫苗组)和全菌灭活疫苗注射免疫组(灭活疫苗组)罗非鱼脾脏中的5种免疫相关基因表达均不同程度上调,且相对表达量显著高于阴性对照免疫组(阴性对照组)(P<0.05)。在人工感染攻毒试验中,SIP疫苗组和灭活疫苗组的死亡率均显著低于阴性对照组(P<0.05),灭活疫苗组比SIP疫苗组得到了更高的免疫保护率,但两组的死亡率差异不显著(P>0.05)。说明罗非鱼无乳链球菌SIP微胶囊口服疫苗免疫效果好,在罗非鱼无乳链球菌病的免疫防治中有良好的应用前景。

罗非鱼无乳链球菌微胶囊口服疫苗的研制及其免疫效果

为了建立罗非鱼无乳链球菌病免疫防控方法,以原核表达SIP（surface immunogenic protein）蛋白为芯材,天然多糖为壁材,制备罗非鱼无乳链球菌聚丙烯酸树脂Ⅱ微胶囊口服疫苗,SIP口服疫苗微胶囊颗粒平均直径约826.5μm,包封率为72.02%,载药量最高达6.11%。微胶囊包裹的SIP蛋白在5种缓冲液中释放效果：p H 6.80〉p H 7.20〉p H 9.18〉p H4.68〉p H 2.00。体外实验证实微胶囊颗粒在模拟胃酸环境中蛋白释放量极小,数值为395.5μg;而在模拟肠液中,释放量最高达5426.0μg,其中240 min释放量为4911.1μg,释放度达90.51%,说明微胶囊能避免胃酸的破坏且肠溶性好。SIP微胶囊口服疫苗以投喂的方式免疫＂新吉富＂罗非鱼,分别以每克罗非鱼体质量免疫5和10μg SIP蛋白的剂量分组测试,4次免疫过程中,5μg免疫剂量组特异性血清效价为100^–1~400^–1,10μg免疫剂量组特异性血清效价为200^–1~1600^–1。4次免疫后,攻毒实验表明,5和10μg的免疫剂量组的免疫保护率分别为44.45%和66.67%。研究表明,微胶囊口服疫苗免疫为罗非鱼无乳链球菌病的免疫防治提供方便、安全、有效的途径。

B族链球菌表面蛋白Sip的制备及其免疫原性的研究

20世纪70年代以来，B族链球菌（Group B Streptococcus，GBs）成为引起新生儿感染的首位原因。疫苗是预防GBS疾病简便有效的方法，传统的荚膜多糖疫苗及单一的荚膜多糖结合疫苗因其保护作用范围有限而使其应用受到限制。用GBS表面保守的蛋白作为疫苗成分可能会对多种血清型GBS的感染提供保护作用，因此引起人们的关注。

刚地弓形虫缓殖子期特异抗原BSR4的重组表达与免疫特性的初步研究

目的重组表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)Prugniaud(PRU)株缓殖子期特异抗原(BSR4)基因,并检测其免疫特性。方法将已构建的重组表达质粒pET28a(+)-BSR4转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化。分别以慢性感染PRU株刚地弓形虫小鼠血清和健康小鼠血清为一抗,用蛋白质印迹(Western blottting)鉴定BSR4重组蛋白的免疫反应性。用3H-TdR掺入法检测慢性感染PRU株刚地弓形虫小鼠脾淋巴细胞对不同浓度BSR4重组蛋白的特异性增殖水平,计算刺激指数(SI)。以BSR4重组蛋白为抗原,用ELISA法检测急性(抗弓形虫IgG-IgM+)和慢性(抗弓形虫IgG+IgM-)弓形虫病患者血清,以及健康人血清,各20份,评判该蛋白的免疫反应性。结果重组质粒pET28a(+)-BSR4经IPTG诱导后表达重组蛋白BSR4,经变性、复性和纯化后获得相对分子质量(Mr)45 000的可溶性蛋白。Western blotting分析结果显示,该蛋白能被慢性弓形虫感染小鼠血清识别。脾淋巴细胞增殖试验表明,1、5和25μg/ml重组蛋白BSR4刺激感染弓形虫小鼠脾淋巴细胞的SI分别为1.13、0.88和1.17,显著高于未感染组(分别为0.46、0.24和0.49,均P<0.01)。ELISA检测结果显示,BSR4抗原能被慢性弓形虫病患者血清(IgG+IgM-)特异性识别(20/20),而不能被急性弓形虫病患者血清(IgG-IgM+)识别(0/20)。结论重组BSR4蛋白具有特异的免疫原性和免疫反应性。

免疫性血小板减少家兔模型的实验研究

原发性血小板减少性紫癜(idiopathicthrombocytopenic purpura,ITP)是一种较常见的出血性疾病,本病的发生与免疫有关。国内对ITP从体液免疫和细胞免疫的角度进行了研究,本文从动物模型角度对此病进行了探讨。我们在Arnott等建立免疫性血小板减少家兔模型基础上,加以改良并成功地建立实验模型。同时观察了血小板计数、血小板粘附率(platelet adhesion test,PAdT)、血小板相关抗体(platelet associatedIgG,PAIgG)、骨髓像巨核细胞、血小板电镜检查等指标,其结果如下。

研究鉴别原发性肺腺癌与转移性肺肿瘤的一组免疫组化标志物

目的:探讨原发性肺腺癌和转移性肺肿瘤中天门冬氨酸蛋白酶(Napsin A)、肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)、甲状腺转移因子-1(TTF-1)临床病理学意义。方法:用免疫组化技术Super PicTureTM Polymer二步法检测Napsin A、SP-A、TTF-1在76例原发性非小细胞肺癌和40例转移性肺肿瘤中的表达水平。结果:Napsin A与原发性肺腺癌的分化程度呈正相关(P<0.05)。Napsin A、SP-A和TTF-1在原发性非小细胞肺癌中的阳性表达与其分型密切相关(均P<0.05)。Napsin A比SP-A、TTF-1具有较高的敏感性和特异性。结论:Napsin A是原发性肺腺癌发生发展过程中较早出现的一种较为敏感的肿瘤标志物,其表达强度与肿瘤的恶性程度密切相关,而且联合使用SP-A、TTF-1有助于鉴别原发性肺腺癌与转移性肺肿瘤。

肺表面活性物质相关蛋白-D与肺部天然免疫及临床意义

肺表面活性物质相关蛋白-D（surfactantprotein-D，SP-D）系C型凝集素超家族成员，是肺部重要的天然防御分子。参与病原体的清除和免疫、炎症、过敏反应的调节，与多种人类肺部疾病有关。血清SP-D的水平可作为某些疾病的标志。人工重组的SP-D对新生儿慢性肺病、囊性纤维化和肺气肿有潜在的治疗作用。

无乳链球菌SIP基因的克隆和原核表达

目的重组表达无乳链球菌表面免疫相关蛋白(Surface immunogenic protein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白。方法用PCR的方法从石河子分离株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入PBST载体,并构建原核表达载体pET-32a(+)—SIP。用BL21(DE3)/pET系统表达Trix-SIP融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物。结果PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中无乳链球菌(DQ650634)的SIP的基因序列同源性为98.62%。SDS—PAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET-32a(+)—SIP总蛋白中出现一条相对分子质量为71KDa的新蛋白带。West-ern blot分析显示,SIP蛋白可与无乳链球菌多克隆抗血清发生特异性反应。结论已成功表达SIP,为SIP在细菌致病中的作用研究以及相关疫苗的制备奠定了基础。