表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术筛查肺癌血清特异性蛋白质及其临床意义

目的:探讨用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛查肺癌血清特异性蛋白质的临床意义。方法:应用SELDI-TOF-MS对35例正常对照组、43例治疗前肺癌病人的血清样品进行蛋白质指纹图谱测定,用BioMarker Wizard 3．01及BioMarker Parrern System 5．01分析软件对测得的数据进行处理及建立诊断模型。结果:共检测到251个蛋白质峰,筛选出差异蛋白质峰11个,以质荷比(m/z)分别为M2799_26,M3227_41,M5739_70和M8164_30的4个蛋白质峰为依据组合构建分类决策树模型,分出5个终节点。决策树模型的原始判别总准确率为91．0%(71/78),敏感性为88．4%(38/43),特异性为94．3%(33/35);交叉验证总准确率为85．9%(67/78),敏感性为88．4%(38/43),特异性为82．9%(29/35)。结论:SELDI-TOF-MS在肺癌血清特异性蛋白质的筛选及诊断模型的建立有一定的临床意义。

表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱在甲状腺癌诊断及临床分期中的应用

目的:用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析正常人和甲状腺癌患者血清蛋白指纹图谱的变化,建立能鉴别正常人和甲状腺癌及Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型。方法:应用SELDI-TOF-MS技术检测72例血清标本的蛋白质质谱,其中甲状腺癌40例(Ⅰ-Ⅱ期26例,Ⅲ-Ⅳ期14例),正常人32例。应用支持向量机和判别分析的方法分析质谱数据,建立甲状腺癌诊断模型并留一法交叉验证。结果:区分甲状腺癌和正常人的诊断模型交叉检验敏感性为100%,特异性为86%,总的符合率为93%;区分Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型对Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌检出的敏感性为77%,特异性为86%,对Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌检出的敏感性为86%,特异性为77%,总的符合率为80%。结论:应用SELDI-TOF-MS技术平台和生物信息技术建立的诊断模型为甲状腺癌的早期诊断及临床分期提供了新的手段。

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术在病原微生物分析中的应用

病原微生物引起的感染性疾病是危害人类健康、导致患者死亡的重要原因之一。然而，目前病原微生物的鉴定主要依赖传统的鉴定方法，不能满足临床快速诊断和及时治疗的需要。

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术在白血病诊断中的应用

本研究对白血病患者及健康对照者的血清样本进行检测分析,筛选新的生物标记物并建立白血病的蛋白质指纹图谱诊断模型。应用SELDI-TOF-MS技术检测40例白血病标本及37例健康对照标本,用Biomarker Wizard软件分析筛选新的生物标记物,使用Biomarker Patterns 5.0软件进行标记物的比较判别,建立白血病决策树诊断模型。结果表明,蛋白质指纹图谱分析发现有22个差异显著的蛋白峰(P<0.05);由m/z为4650,8609及11660建立的决策树诊断模型对白血病的诊断灵敏度为97.5%(39/40),特异性为91.9%(34/37)。结论:由3个蛋白标记物构成的白血病蛋白质指纹图谱诊断模型为白血病的诊断提供了新的借鉴和参考。

应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱联合磁珠技术寻找肺癌血清蛋白标志物

目的 建立肺癌蛋白质指纹图谱诊断模型,探讨用于肺癌早期诊断及手术疗效评估的血清蛋白标志物。方法 收集38例肺癌患者、12例肺部良性肿瘤患者及32名正常对照者的血清标本,应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS）联合磁珠技术,获得蛋白质指纹图谱,采用BPS分析软件对数据分组及相关性进行分析,初步建立肺癌的血清蛋白质指纹图谱诊断模型,并验证其诊断效率;同时对比肺癌患者手术前后的差异蛋白质谱,结合肺癌的诊断模型,选取合适的蛋白作为肺癌手术疗效的观察指标。结果 在质荷比为1000-50 000范围内,肺癌患者、肺部良性肿瘤患者和正常对照者之间共检测到215个蛋白质峰。其中,质荷比为1115.37、1929.70、3217.57、3246.34、3318.57、11 508.90的6个蛋白质峰表达差异具有统计学意义（P〈0.05）。决策树模型对肺癌的原始判别敏感性为92.11%（35/38）,特异性为90.91%（40/44）;交叉验证敏感性为86.67%（13/15）,特异性为86.67%（13/15）。其中质荷比为1115.37、1929.70、3246.34和11 508.90的蛋白质峰在肺癌患者中明显升高（P〈0.05）,当肺癌患者手术治疗后表达量较术前明显降低（P〈0.01）,表明这4个蛋白质峰对肺癌的诊断及疗效判定具有潜在应用价值。结论 应用SELDI-TOF-MS技术建立的肺癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型具有较高的敏感性和特异性,为发现肺癌早期生物标志物并判断疗效奠定基础。

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术及其在器官移植领域中的应用

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术是较有效的蛋白质组学研究手段,虽然目前尚未应用于临床常规实验室诊断,但已广泛应用于肿瘤、传染病、心血管病和神经系统疾病的研究。近年来,SELDI-TOF-MS技术试用于器官移植领域,如急性移植排斥反应的早期诊断、移植相关疾病的诊断、疾病相关蛋白的鉴定,探讨疾病的发生机制,展现了该技术在器官移植中的广阔应用前景。

应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱筛选大肠癌血清特异标志物

目的采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测大肠癌患者与健康对照者血清中蛋白的差异,为大肠癌的早期诊断提供理论依据。方法应用SELDI-TOF-MS技术及弱阳离子蛋白质芯片(WCX2)检测36例健康成人(对照组)和36例大肠癌患者(大肠组)血清中蛋白含量。结果在质荷比为2000Da～30000Da的范围内,两组样本检测到了对照组82个蛋白峰。其中3604.240Da蛋白峰大肠癌组明显高于对照组(P<0.05),而12861.368Da的蛋白峰对照组明显高于大肠癌组(P<0.05)。利用这两个蛋白筛查大肠癌的特异度为86.11%(31/36),敏感度为77.78%(28/36),阳性预测值为87.5%。结论质荷比为3604.240Da与12861.368Da的两个蛋白峰可以作为大肠癌早期诊断的备选标志物。

表面增强激光解吸电离质谱芯片在蛋白质组学研究中的应用

蛋白质组学是当今生命科学研究中最活跃的前沿领域。其主要技术手段是双向凝胶电泳、质谱技术和生物信息学,但各有其局限性。芯片技术和质谱技术相结合产生的表面增强激光解析离子化-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)技术,将蛋白质样品的制备、生化反应到检测分析的整个过程集成在芯片上进行,实现了新型、高效、快速、高通量的检测,不仅促进了蛋白质组学研究的迅速发展,而且为阐明生命活动的规律和疾病的发病机理以及寻找合适的医药提供提供了有力的工具。

应用蛋白质芯片表面增强激光解吸电离-飞行时间-质谱技术探讨胃癌远处转移的机制

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,发病率及病死率居高不下。由于超过50%的患者诊断时已属晚期,因此根治手术切除率较低,5年生存率仅25%~30%。治疗失败的主要原因是肿瘤转移、复发。因此早期诊断、及早发现胃癌远处微小病灶、及早进行干预,将会大大提高胃癌患者的临床缓解率和长期生存率。

表面增强激光解吸电离—飞行时间—质谱技术在肿瘤早期诊断中的应用进展

基因革命创造了一个关于明确细胞内部运作的基本遗传密码的信息财富。蛋白质是基因表达的最终产物,故了解蛋白质的功能将有利于新型药物靶标的发现,以及崭新的特异性治疗方法。蛋白质组学（proteomics）作为分析化学的一个新领域,主要目标是通过肽类或蛋白类的高表达或低表达,评估那些可以区分健康样本和病患样本,并且可以作为早期诊断的疾病相关肿瘤标志物,同样其可以作为疾病进展的测定指标。

发展表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术用于评估职业性暴露于丙烯酰胺环境的生物标记物

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)是一种用来检测生物样品中蛋白质的生物分析技术。血液或尿液中的蛋白质如果受毒性试剂的影响可能会发生变化。丙烯酰胺是一种广泛使用的工业化学品,很可能是一种致癌物,因此人们很担心暴露在丙烯酰胺中会产生健康问题。丙烯酰胺及其代谢产物环氧丙酰胺很容易与蛋白质结合。目前有多种分析技术评估丙烯酰胺对尿液和血红蛋白的影响,但是这些分析方法耗时而且昂贵。本文考察了SELDI-TOF-MS能否作为一种筛查工具以鉴定受丙烯酰胺影响而发生修饰的尿液蛋白质或血红蛋白。

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术筛查乳腺癌血清特异性蛋白质及其临床意义

目的探讨表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI TOF MS)技术筛查乳腺癌血清特异性蛋白质的临床意义。方法应用SELDI TOF MS技术检测38例乳腺癌、33例乳腺良性疾病和43例健康对照者的血清蛋白质指纹图谱,并联合应用BioMarkerWizard3.01及BioMarkerPattern Software5.01软件分析处理数据,筛选肿瘤标志物并建立诊断模型。结果质荷比分别为M2077_07、M1827_38、M2650_51和M2060_62的4个蛋白质峰组合构建的诊断模型Ⅰ,鉴别乳腺癌和非乳腺癌的交叉验证敏感性为73.7%(28/38),特异性为73.7%(56/76)。质荷比分别为M2251_62、M3405_56、M3428_16、M4666_98和M16239_8的5个蛋白质峰组合构建的诊断模型Ⅱ,鉴别Ⅰ期乳腺癌和乳腺良性疾病的交叉验证敏感性为84.8%(28/33),特异性为55.6%(5/9)。质荷比分别为M1701_48、M3116_17、M1676_88、M5890_33和M2921_02的5个蛋白质峰组合的诊断模型Ⅲ,鉴别Ⅰ期与Ⅱ～Ⅳ期乳腺癌的交叉验证敏感性为88.9%(8/9),特异性为86.2%(25/29)。结论SELDI TOF MS技术在乳腺癌的筛查、早期诊断及临床分期判定等方面具有一定价值,值得进一步深入研究。

应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术筛选牙龈卟啉单胞菌共同外膜蛋白

目的 应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS）技术筛选多种牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）共同外膜蛋白（outer membrane protein,OMP）,为针对多种Pg设计具有交叉保护作用的疫苗提供候选靶抗原.方法 应用超速离心法提取PgATCC33277、Pgw83、Pg301和Pg381菌株外膜蛋白,SELDI疏水性蛋白芯片H50检测OMP,Biomarker Wizard软件分析4种菌株OMP质谱图.结果 OMP质谱图显示,PgATCC33277、PgW83、Pg301和Pg381分别有71、74、76和72个蛋白质峰,并存在13种共同OMP 在美国国立生物信息中心蛋白库中鉴定到一种已知蛋白gil116636495,其功能尚不清楚.结论 发现13种共同OMP可作为牙周病疫苗候选抗原,证实基于SELDI-TOF-MS技术适合检测小相对分子质量（＜20000）、低丰度、疏水性蛋白,且操作简单、重复性好,可用于大规模寻找Pg的共同OMP.

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术在恶性肿瘤患者焦虑情绪评估中的应用

目的研究恶性肿瘤患者焦虑情绪的发生情况，进一步探讨表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS，简称SELDI）技术在焦虑情绪评估中的意义。方法选取1000例恶性肿瘤患者作为研究对象，于人院当天进行焦虑自评量表（SAS）评定，次日清晨抽取患者空腹静脉血，分析比较SELDI检测结果与SAS评分结果的差异。结果有效样本为988例。SAS评分为（56．320±9．665）分，SAS评分出现焦虑情绪者454例，焦虑情绪发生率45．95％。SELDI技术检测阳性者470例，焦虑情绪发生率47．57％。以SAS评分为判断焦虑情绪的金标准，SELDI技术的灵敏度、特异度分别为93．17％、91．20％，阳性预测值、阴性预测值分别为90．00％、94．02％，总符合率为92．11％，SAS评分与SELDI丰度值相关，拟合曲线显示上调趋势，相关系数为0．837。结论恶性肿瘤患者焦虑情绪的发生率相对较高，SELDI技术在焦虑情绪的评估方面表现出较高的灵敏度、特异度、总符合率和相关性，可作为客观评估焦虑情绪的一种手段。

应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱筛选急性特发性血小板减少性紫癜患儿血清生物标志物

目的应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术结合蛋白芯片检测并筛选急性血小板减少性紫癜（AITP）早期诊断、病情变化监测及判断预后的血清蛋白质标志物,建立AITP诊断模型,并验证在血清蛋白质组水平,创立AITP的分子诊断新方法。方法应用SELDI-TOF-MS检测结合在蛋白质芯片上的血清蛋白质,获得35例AITP、35例健康对照者血清蛋白表达指纹图谱,并用Biomarker Wizard软件对数据进行分析,建立人工神经网络诊断模型。结果在分子质量/电荷比值（质荷比,M/E）为2 000~20 000,AITP组与健康对照组之间差异有统计学意义（P〈0.01）的蛋白质峰有29个,其中高表达的蛋白质峰7个,低表达的蛋白质峰22个,从分析的结果看最有意义的蛋白质为质荷比为4 109.23、5 521.35的蛋白质,可以将其作为AITP的血清生物标志物;在蛋白质库中搜索与上述M/E值相对应的蛋白质,M/E为4 109.23的标志物是核蛋白体large subunit,M/E为5 521.35的标志物在蛋白质库中未发现。应用其血清标志物进入人工神经网络组合的诊断模型,将AITP组与健康儿童准确分组,敏感度为95%,特异度为90%。结论 1.M/E比为4 109.23、5 521.35的蛋白质组合的诊断模型能将AITP与健康儿童完全准确地分开,提示该蛋白质可能是AITP的血清生物标志物;其中M/E为5 521.35的蛋白质可能是新的蛋白质。2.SELDI-TOF-MS技术是寻找疾病相关性蛋白质的有效工具。

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱筛查大肠癌早期肝转移病人血清特异性蛋白的探讨

目的寻找筛查大肠癌早期肝转移病人血清特异性蛋白。方法对中国人民解放军第202医院2007-2009年收治的20例大肠癌和20例大肠癌早期肝转移病人,应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测其血清中特异性蛋白的相对含量。结果两组样本质荷比在2000～30000u间有3774u、11851u的2个蛋白峰有显著差异。结论 SELDI-TOF-MS技术对大肠癌早期肝转移的诊断和特异性肿瘤标记物的筛选等方面具有一定价值,值得推广。

表面增强激光解吸电离质谱(SELDI-MS)测定蔬菜中有机磷农药残留的探讨

利用表面增强激光解吸电离质谱(SELDI-MS),采用CHCA作为基质,对9种有机磷类农药进行分析,获得各自的SELDI质谱图及定性选择离子。并以二嗪磷为研究对象,研究了其在蔬菜中的残留,该方法的添加回收率为72.83%～105.64%,与气相色谱方法的检测结果进行比较(添加回收率为83.57%～104.01%),两种方法有良好的相关性。结果表明,SELDI-MS是一种方便、快速的有机磷农药残留分析方法,可作为传统方法的补充。

运用内标校准法提高表面增强激光解吸电离飞行时间质谱检测中的重复性

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）具有高灵敏度、高通量、高效率等优点，是近年来疾病蛋白组学研究的先进技术，但该技术检测结果的重复性较差。因此，建立SELDI—TOF—MS检测流程的标准化至关重要。我们将色谱分析常用的内标法引入SELDI—TOF—MS技术，采用合成多肽分子作为内标物，建立内标校准法以校准SELDI—TOF—MS质谱图的横坐标和纵坐标，以提高该方法检测蛋白质分子量和丰度的重复性。

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术检测乳腺癌患者焦虑情绪的临床研究

目的 调查乳腺癌患者焦虑发生情况,探讨表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS,简称SELDI）技术在焦虑评估中的临床应用价值.方法 采用便利抽样法选取121例乳腺癌患者作为研究对象,入院当日应用焦虑自评量表（SAS）对其进行评估,征得患者同意后,于次日清晨抽取患者空腹静脉血,应用SELDI技术检测血清,筛选焦虑相关蛋白质指纹图谱.分析比较SELDI检测结果与SAS量表评分.结果 121例乳腺癌患者的SAS评分为（53.45±9.78）分,发生焦虑患者63例（52.07％）.以质荷比15000＋H- 16800＋H之间5％蛋白质指纹丰度建立诊断模型,即以SELDI检测蛋白质指纹丰度值≥5％判断为阳性,反之为阴性,在此基础上准确将乳腺癌患者分为焦虑组与非焦虑组.SELDI正确率（总符合率）为91.74％,特异度和灵敏度分别为89.66％（52/58）、93.65％（59/63）,阳性预测值为90.77％（59/65）,阴性预测值为92.86％（52/56）.结论 乳腺癌患者焦虑发生率较高.SELDI技术在焦虑情绪的评估方面表现出较高的灵敏性和特异性,作为一种客观的评估手段,具有较好的临床运用前景。

应用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱诊断乳腺钙化病变

进行乳腺X线检查的妇女，有30％～60％发现钙化。有报道约50％临床触诊阴性的乳腺病变进行活检是由于钼靶片发现钙化灶，恶性病变占40％～50％。这意味着有50％～60％的触诊阳性的钙化患者的手术或活检是不必要的。近年来，应用蛋白质组学方法寻找肿瘤诊断的特异性标志物是研究的热点。