表面活性蛋白A单核苷酸基因多态性与过敏性鼻炎皮下特异性免疫治疗疗效相关性分析

目的:探讨表面活性蛋白A基因单核苷酸多态性与过敏性鼻炎皮下特异性免疫治疗疗效相关性分析。方法:前瞻性募集接受皮下特异性免疫治疗的过敏性鼻炎患者160例,随访1年,记录治疗前、治疗后5个月、治疗后1年过敏性鼻炎症状评分,根据治疗疗效分为好转组和未好转组。提取外周血基因组DNA。采用TaqMan MGB探针技术对表面活性蛋白A基因上的9个标签(rs1059047、rs1136450、rs1136451、rs1059057、rs4253527、rs1059046、rs17886395、rs1965407、rs1965708)进行基因分型。比较两组之间基因型和等位基因分布差异的显著性。结果:共119例患者完成随访,好转组81例,未好转组38例,好转率68%。-50C>G位点(rs1136450)CC基因型患者免疫治疗有效率明显高于GG基因型患者(P<0.05);-223A>C位点(rs1965708)AC基因型患者免疫治疗有效率显著高于AA型患者(P<0.05),其余位点基因型(rs1059047、rs1136451、rs1059057、rs4253527、rs1059046、rs17886395、rs1965407)与免疫治疗有效率无显著相关性。结论:表面活性蛋白A可能是与SCIT治疗效果有关联的易感基因,-50C>G位点(rs1136450),-223A>C位点(rs1965708)多态性可能与过敏性鼻炎皮下特异性免疫治疗疗效有关。

血清内皮细胞特异性分子-1、表面活性蛋白-D及转化生长因子-β1对脓毒症患儿继发急性肺损伤的预测价值

目的探讨血清内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell specific molecule-1,ESM-1)、表面活性蛋白-D(surfactant protein D,SP-D)及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对脓毒症患儿继发急性肺损伤的预测价值。方法回顾性选取2017年1月至2020年12月徐州医科大学附属徐州儿童医院269例脓毒症患儿为研究对象,根据是否并发急性肺损伤分为脓毒症组(216例)和急性肺损伤组(53例)。检测两组血清ESM-1、SP-D及TGF-β1水平,绘制受试者工作特征曲线评估ESM-1、SP-D及TGF-β1对脓毒症患儿继发急性肺损伤的预测效能。结果急性肺损伤组血清ESM-1、SP-D、TGF-β1水平以及急性生理与慢性健康Ⅱ评分、肺损伤预测评分均明显高于脓毒症组(P<0.05)。急性肺损伤组血清ESM-1、SP-D、TGF-β1水平与急性生理与慢性健康Ⅱ评分呈正相关,且与肺损伤预测评分也呈显著正相关(P<0.05)。联合检测血清ESM-1、SP-D及TGF-β1的受试者工作特征曲线下面积为0.929(95%CI 0.894~0.965),其早期预测灵敏度为92.5%,显著优于各指标单独检测(P<0.05);而联合检测的特异度与单独检测比较,差异无显著性(P>0.05)。结论血清ESM-1、SP-D及TGF-β1水平与脓毒症患儿病情有关,联合检测血清三项指标水平能够为早期预测脓毒症继发急性肺损伤提供依据。

不同胎龄人胚肺支气管肺泡灌洗液表面活性物质蛋白A、D的变化

目的探讨不同发育时期人胚胎支气管肺泡灌洗液(BALF)中表面活性蛋白A、D(SP—A、SP—D)含量的变化规律。方法对临床收集来的水囊引产正常胎儿进行支气管肺泡灌洗(30mL生理盐水),回收灌洗液[总回收率(856±13.1)%],并进行蛋白定量分析.反向间接血凝法和ELISA法测定不同胎龄胎儿和新生儿BALF中SP—A、SP—D含量。结果BALF中总蛋白浓度从胎龄第10周开始随胚肺发育逐渐升高至出生时的高峰。其中SP-A和SP—D含量也分别由[(0.34±007)、(0.05±001)ng/L]逐渐达到出生时峰值[(6.42±0.36)、(1.22±0.13)ng/L]。结论随着胎龄增长和胚肺发育.胚肺BALF中蛋白分泌增加.SP—A和SP—D合成逐渐达到出生时高峰.是新生儿肺成熟度的重要标志。

结核性和肺腺癌性胸腔积液中肺表面活性物质相关蛋白A、D的检测分析

目的探讨胸水中肺表面活性物质相关蛋白-A、D联合对原发性肺腺癌性与结核性胸腔积液的鉴别诊断价值。方法收集36例原发性肺腺癌性和28例结核性胸腔积液患者的胸水,采用western blotting检测胸水中肺表面活性物质相关蛋白-A、D。结果原发性肺腺癌和结核性胸膜炎患者胸水中SP-A光密度值分别为265.1±141.16和180.0±64.1;原发性肺腺癌和结核性胸膜炎患者胸水中SP-D光密度值分别为299.9±140.6和206.8±86.8。36例原发性肺腺癌患者中有23例胸水中SP-A>250,有16例SP-D>250,而SP-A>250和(或)SP-D>250有29例。28例结核性胸膜炎患者胸水中SP-A、SP-D均未超过250。结论肺表面活性物质相关蛋白A对结核性胸膜炎与原发性肺腺癌所致胸腔积液鉴别诊断有临床价值,联合肺表面活性物质相关蛋白D对两者的鉴别诊断更有意义。

孟鲁司特对儿童哮喘患者血清肺表面活性蛋白A、D水平的影响及疗效观察

近年来研究发现,肺表面活性物质,尤其是肺表面活性蛋白A、D（SP-A、D）与哮喘的发生、发展和预后密切相关。孟鲁司特是一种临床治疗儿童哮喘的常用药物,但其对儿童哮喘患者血清SP-A、D水平的影响报道较少。本文观察了孟鲁司特对儿童哮喘患者血清SP-A、D水平的影响及疗效,现报道如下。

硫化氢对大鼠内毒素性急性肺损伤肺泡表面活性物质的影响

目的:观察脂多糖(LPS)所致内毒素性急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡表面活性物质(PS)的变化及硫化氢(H2S)对PS的影响,探讨H2S对肺脏的作用机制。方法:雄性SD大鼠共48只,随机分为6组(n=8):空白对照组、LPS组、LPS+NaHS低、中、高剂量组、LPS+PPG组。空白对照组给予生理盐水,LPS组给予LPS,LPS+NaHS低、中、高剂量组和LPS+PPG组分别在给予LPS 3 h时腹腔注射低、中、高剂量氢硫化钠(NaHS)或炔丙基甘氨酸(PPG)。各组均于给予生理盐水或LPS 6 h时电镜下观察肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC-Ⅱ)的形态改变,检测血浆中H2S含量、肺组织中胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性、肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白(TP)和总磷脂(TPL)含量、及肺组织中肺泡表面活性蛋白A、B、C(SP-A、B、C)mRNA表达的变化。结果:①与空白对照组比较,LPS组AEC-Ⅱ超微结构明显受损,血浆中H2S含量、肺组织中CSE活性、BALF中TPL的含量、及肺组织中SP-A、B、CmRNA表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),BALF中TP的含量明显增加(P<0.01);②与LPS组比较,LPS+NaHS低、中、高剂量组,AEC-Ⅱ超微结构均有所恢复,血浆中H2S含量、肺组织中CSE活性、SP-AmRNA表达均明显升高(P<0.05,P<0.01);LPS+NaHS中、高剂量组BALF中TPL含量明显增高,SP-BmRNA表达升高(P<0.05);LPS+NaHS高剂量组BALF中TP含量明显降低(P<0.05);LPS+NaHS各剂量组SP-CmRNA表达无明显变化;③与LPS组比较,LPS+PPG组AEC-Ⅱ超微结构仍损伤严重,血浆中H2S含量、肺组织中CSE活性、BALF中TPL的含量、及肺组织中SP-A、B、CmRNA表达均明显降低(P<0.05),BALF中TP的含量明显升高(P<0.05)。结论:PS降低是内毒素性ALI的重要病理生理过程,H2S对LPS诱导的ALI有保护性作用,其机制可能与H2S对PS的调节有关。

特异性蛋白1(SP1)上调FOXP4-AS1促进结直肠癌细胞增殖

大量的证据表明,长链非编码RNAs (long non-coding RNAs)在结直肠癌发生发展中发挥重要作用。有迹象表明,lncRNA FOXP4-AS1推动结直肠癌的进程。本文通过数据库信息分析发现,FOXP4-AS1在结直肠癌中高表达且与患者较差的预后正相关。实时荧光定量PCR方法也证实,FOXP4-AS1在结直肠癌细胞和组织中的表达量均高于正常细胞和组织。其中,FOXP4-AS1在结肠癌细胞LOVO中表达量最高,是正常结直肠细胞的13倍。生物信息学预测结合双荧光素酶报告基因实验和染色质沉淀研究结果表明,特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)可直接结合在FOXP4-AS1启动子上,上调其活性。过表达FOXP4-AS1,可下调p16和p18表达,同时上调CDK4、CDK6和细胞周期蛋白D1表达,最终促进结直肠癌细胞增殖。相反,敲低FOXP4-AS1将上调p16和p18表达,抑制CDK4、CDK6和细胞周期蛋白D1,获得相反的结果。总之,特异性蛋白1(SP1)上调FOXP4-AS1,促进结直肠癌细胞增殖。

单次及多次应用肺表面活性物质对COPD鼠肺的保护作用比较

目的观察单次及多次应用外源性肺表面活性物质(PS)对实验性慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠肺的保护作用比较。方法设立正常大鼠组和3个实验组:对照组(不用药);PS一次干预组(PS1组,气道内注入PS 1次,100mg/kg),PS多次干预组(PS3组,气道内注入PS 3次,100mg/kg)。60d后测定动脉血气,光镜和透射电镜观察肺组织病理学改变;免疫组化法检测肺组织表面活性物质相关蛋白A(SP-A)的阳性表达。结果吸烟60d及气道内注入脂多糖2次,大鼠有明显的慢性支气管炎及肺气肿的变化,应用PS治疗1次,肺组织病变出现轻度改善,应用3次后肺组织损伤程度明显减轻,PaO2升高,PaCO2降低,SP-A表达增加。结论PS干预可减轻吸烟及LPS对肺组织的破坏,改善PaO2,抑制气道炎症,保护肺泡Ⅱ型上皮细胞和SP-A表达,从而可有效减轻COPD的肺部病变,且多次用药效果好。

肺表面活性蛋白A在渗出性胸腔积液中的临床应用

目的:评估肺表面活性蛋白A(surfactant protein-A,SP-A)在诊断渗出性胸腔积液(exudate pleural effusions,EPE)中的临床应用价值。方法:采用前瞻性研究,选取215例胸腔积液患者,分漏出性胸腔积液(transudate pleural effusions,TPE)和EPE两组,TPE组作为对照组。运用ELISA实验测定并比较胸腔积液中SP-A(pleural effusion SP-A,SP-Apl)和血清中SP-A(serum SP-A,SP-Ase)浓度。运用受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线及多变量Cox回归研究SP-A在诊断胸腔积液中的临床价值。结果:EPE组SP-Apl浓度明显高于TPE组[(189.8±43.4)ng/m L vs(22.3±5.1)ng/m L,P<0.01];EPE组SP-Ase浓度明显高于TPE组[(78.9±11.3)ng/m L vs(25.8±12.4)ng/m L,P<0.05];EPE组SP-Apl浓度明显高于SP-Ase浓度(P<0.01)。EPE组中肺腺癌患者SP-Apl浓度和SP-Ase浓度最高,且SP-Apl浓度明显高于SP-Ase浓度(P<0.01)。当SP-Apl浓度≥484.5 ng/m L时,诊断肺腺癌的敏感性为85.4%,特异性为95.2%,曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.943(95%CI:0.852~0.934,P<0.01);当SP-Ase≥84.2 ng/m L时,诊断肺腺癌的敏感性为76.4%,特异性为94.3%,AUC为0.910(95%CI:0.921~0.953,P<0.01)。结论:SP-Apl浓度≥484.5 ng/m L和/或SP-Ase浓度≥84.2 ng/m L有助于诊断肺腺癌性胸腔积液。

猪牛肉掺假鉴定技术及其特异性物质研究进展

目前肉品掺假现象层出不穷,这些掺假制品通过感官判断很难区分真伪。研究表明一些现代分析技术通过检测肉的特异性物质能够鉴定肉的种类。本文主要以猪肉和牛肉为例,以其内在存在的种间特异性差异,从蛋白质和基因等角度分别论述各种肉的特异性物质,为肉制品掺假鉴定提供一定参考的依据。

孟鲁司特治疗小儿咳嗽变异性哮喘的临床效果

目的 观察孟鲁司特治疗小儿咳嗽变异性哮喘的临床效果。方法 选取2020年1—12月湖南旺旺医院收治的咳嗽变异性哮喘患儿66例,采用随机数字表法分为观察组(n=33)和对照组(n=33)。2组均给予氨茶碱片治疗,在此基础上,对照组行富马酸酮替芬片治疗,观察组行孟鲁司特治疗,2组均治疗30 d。比较2组患儿治疗前后咳嗽评分、临床疗效、治疗前后巨噬细胞炎性蛋白-1(MIP-1)、P物质(SP)水平及肺功能。结果 观察组患儿治疗总有效率为90.91%,高于对照组的69.70%,差异有统计学意义(χ^(2)=4.694,P=0.030)。治疗1个月后,2组患儿的白日和夜晚咳嗽评分均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);2组患儿血清MIP-1及SP水平均降低,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);2组患儿的用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、FEV_(1)/FVC及日间最大呼气流量(PEF)均高于治疗前,且观察组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 孟鲁司特治疗咳嗽变异性哮喘的效果明显,可显著改善血清指标,降低血清因子,病症更稳定,改善肺功能。

高频振荡通气联合肺表面活性物质对吸入性损伤肺组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3和p73的影响

目的探讨高频振荡通气（HFOV）联合肺表面活性物质（PS）对吸入性损伤兔肺组织细胞凋亡的影响。方法采用兔蒸汽吸入性损伤模型，将32只兔按不同通气治疗方式分为常规控制机械通气（CMV）组、HFOV组、CMV＋PS组及HFOV＋PS组4组，每组8只。治疗4h后处死动物，取右肺中叶组织，分别检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、p73的含量及其mRNA表达水平。结果①HFOV组和HFOV＋PS组肺组织caspase-3和p73的含量分别较CMV组和CMV＋PS组明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；加入外源性PS后，CMV＋PS组和HFOV＋PS组的caspase-3和p73含量也较相应未加入组明显减少，差异也有统计学意义（P均〈0．05）。③HFOV组和HFOV＋PS组caspase-3 mRNA和p73 mRNA表达分别较CMV组和CMV＋PS组明显减少，差异有统计学意义（P均〈0．01）；加入外源性PS后，CMV＋PS组和HFOV＋PS组肺组织caspase-3 mRNA和p73 mRNA的表达也明显低于相应未加入组，差异也有统计学意义（P均〈0．05）。结论与CMV或CMV＋PS比较，HFOV或HFOV＋PS能减少吸入性损伤肺组织细胞中caspase-3、p73的含量及其mRNA表达，从而可能减少通气肺的肺细胞凋亡。

特发性肺纤维化患者肺泡灌洗液和血清中Napsin A、KL-6、SP-A、SP-D表达的意义及与肺功能相关性

目的特发性肺纤维化(IPF)是一种不明原因的慢性进行性间质性肺疾病。其发病率、死亡率均较高。但IPF的发病机制至今尚未完全清楚,临床上对此病发生发展的掌握不够,检验指标的敏感性及特异性不高,从而影响诊断及临床判断的准确性。因此寻找IPF发生发展的生物标记物成为近年来较为热门的研究方向。方法挑选2017年3月-2019年3月间在我院就诊并诊断明确的30例IPF患者入组IPF观察组,20例临床症状类似的I期肺结节病患者作为阴性对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测IPF和I期肺结节病对照组BALF和血清中Napsin A/KL-6/SP-A/SP-D水平,并对患者的肺功能进行检测,评估上述生物标记物与肺纤维化病程进展的相关性。结果IPF组患者的血清/肺泡灌洗液中Napsin A/KL-6/SP-A/SP-D水平均明显高于由I期肺结节病阴性对照组(P<0.05)。灌洗液中Napsin A/KL-6/SP-D含量与肺通气功能呈负相关(P<0.05),而Napsin A/KL-6含量与弥散功能呈现负相关(P<0.05)。血清中Napsin A/KL-6/SP-A/SP-D水平均与肺通气功能呈负相关(P<0.05),Napsin A/KL-6血清含量与肺弥散功能呈明显负相关(P<0.05),与肺泡灌洗液检测结果一致。结论Napsin A/KL-6/SP-A/SP-D在IPF患者灌洗液中的含量亦显著升高。其中血清Napsin A/KL-6水平相关度最高,高水平的血清及灌洗液中Napsin A/KL-6浓度提示IPF病灶进展,且与肺通气功能及弥散指标呈负相关,可作为诊断IPF严重程度判断的指标之一。而SP-A、SP-D也可以作为IPF早期的一种早期预测指标,敏感性特异性差于Napsin A/KL-6,但SP-D对于肺功能下降、肺纤维化早期炎症反应,优于SP-A。

高体积分数氧致A549细胞肺表面活性物质蛋白-A表达的变化

目的探索高体积分数氧(高氧)致A549细胞肺表面活性物质蛋白(SP)-A表达的变化规律。方法将A549细胞分为高氧组和常氧组。高氧组细胞置于含950 mL·L-1氧气和50 mL·L-1二氧化碳的条件下培养,常氧组以空气替代氧气,于0 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h在倒置相差显微镜下观察细胞生长状况,提取细胞内总蛋白,采用硫代巴比妥酸比色法检测其丙二醛(MDA)水平,Western blot检测其SP-A表达水平。结果高氧48 h可导致A549细胞生长明显减慢,72 h后细胞生长停滞,可见较多漂浮死亡细胞,96 h后漂浮死亡细胞明显增多。高氧组各时间点A549细胞SP-A表达水平均高于常氧组,高氧24 h SP-A表达增多最显著,此后增多的幅度逐渐减小,高氧48 h后细胞内MDA水平显著高于常氧组,随时间延长,MDA水平进一步升高。结论高氧可导致A549细胞损伤,SP-A表达在细胞高氧损伤早期代偿性增加,晚期降低,推测SP-A表达降低可能与细胞损伤加重有关,增加SP-A的表达可能有助于减轻高氧引起的细胞损伤。

一种N-酰肌氨酸在四氧化三铁纳米颗粒表面的吸附特征

根据表面活性剂固液界面吸附理论和表面改性颗粒亲水疏水特性及红外光谱分析,提出了不同pH条件和表面活性剂用量下不同的吸附模型。

不同时期难治性支原体肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中表面活性物质相关蛋白-A的变化及其与肺功能的相关性

目的探讨不同时期难治性支原体肺炎患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中表面活性物质相关蛋白-A(SPA)的变化及其与肺功能的相关性,为临床诊疗提供参考。方法选择宝鸡市妇幼保健院于2018年3月—2019年3月收治的难治性支原体肺炎患儿97例,根据不同时期分为急性期(57例)与恢复期(40例)。所有患儿在局部麻醉及镇静下行纤维支气管镜检查,于X线片提示肺不张部位或者肺部严重炎症进行支气管肺泡BALF采集,采用酶联免疫吸附法测定SPA表达水平,采用肺功能检测仪测定第1秒用力呼气量(FEV1)、第1秒用力呼气量占预计值百分比(FEV1%)和FEV1/用力肺活量(FVC)。结果急性期组SPA表达水平为(59.83±12.35)μg/L,低于恢复期组的(128.97±28.43)μg/L,差异有统计学意义(t=16.323,P<0.05)。急性期组患儿FEV1、FEV1%和FEV1/FVC均低于恢复期组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。SPA与肺功能FEV1、FEV1%及FEV1/FVC均呈线性正相关(r=0.739,0.781,0.706,均P<0.05)。结论急性期患儿难治性支原体肺炎BALF中SPA表达高于恢复期,且与肺功能呈线性正相关,可作为评估患儿病情和肺功能有效指标,值得临床借鉴,具有重要研究价值。

2-十三烷酮和槲皮素诱导棉铃虫谷胱甘肽S-转移酶组织特异性表达

利用分光光度酶动力学和定量PCR的方法,从蛋白质水平和基因水平上研究了棉铃虫幼虫谷胱甘肽S-转移酶(GST)的组织特异性表达和植物次生物质的诱导表达作用.结果表明,以1-氯-2, 4-二硝基苯(CDNB)为底物检测到的棉铃虫幼虫不同组织GST的活性与其GST mRNA相对表达量的趋势是一致的.酶动力学活性测定结果表明的棉铃虫各组织GST活性大小的顺序与定量PCR结果表明的各组织GST mRNA相对量大小的顺序都依次为:脂肪体、中肠、头和体壁.通过培养基混药法研究植物次生物质对棉铃虫幼虫GST的诱导表明,2-十三烷酮和槲皮素对棉铃虫幼虫GST活性的诱导与其对mRNA表达量的影响是一致的.2-十三烷酮对GST活性及其GST mRNA表达量的诱导作用比槲皮素强.说明mRNA的转录量增加是植物次生物质诱导GST活性增加的主要机制.该结果对于进一步研究植物次生物质诱导作用对棉铃虫对杀虫药剂敏感度的影响具有重要的意义.

大鼠吸入氯气后肺表面活性物质相关蛋白-A表达变化

取40只雄性SD大鼠随机分为1个对照组和4个不同浓度的氯气染毒组,染毒10min,6h后行血气分析,取肺组织测湿干重比(W/D)和病理切片观察,ELISA法测支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清SP-A蛋白表达水平,RT-PCR法测肺组织SP-A mRNA相对表达。与对照组相比,各染毒组大鼠BALF中SP-A蛋白和肺组织SP-A mRNA水平均有降低,血清SP-A蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结果提示SP-A表达改变可能是大鼠吸入氯气后急性肺损伤(ALI)重要的发病机制之一。