海南安诺兰菌根表面消毒方法研究

采用75%乙醇、次氯酸钠溶液浸泡和无菌水洗涤的方法,对海南安诺兰的菌根进行表面消毒,以消毒强度逐步递减的方式,确定最佳分离植物内生真菌的表面消毒强度;同时设置漂洗液无菌检测和组织印迹无菌检测2种对照处理,确保适度的表面消毒强度,然后采用不同浓度的培养基分离培养内生真菌。结果表明,先用75%乙醇浸泡材料30 s,再用3.0%次氯酸钠浓度浸泡5 min处理,是海南安诺兰菌根内生真菌最佳的表面消毒方法,使用20%PDA双抗培养基、于25℃恒温条件下培养,能最大限度地分离所有植物内生真菌,分离效果最佳。

南方红豆杉内生真菌分离时的表面消毒方法探索

表面消毒是植物内生菌分离的关键环节,在南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)内生真菌分离的过程中,使用75%乙醇、2%次氯酸钠(NaClO)代替升汞对外植体进行了表面消毒摸索。结果显示:红豆杉叶、茎、皮经预处理后,先用75%乙醇浸泡3 min,再用2%次氯酸钠浸泡2 min,然后红豆杉叶、茎、皮分别用75%乙醇浸泡3 min、5 min、7 min,可取得满意的表面消毒效果。