抗EGF单克隆抗体表面电荷不均一性的分析

优化了离子交换色谱法分析抗表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)单克隆抗体表面电荷不均一性的条件,分析糖基化对单克隆抗体表面电荷不均一性分布的影响。应用凝胶等电聚焦电泳方法测定单克隆抗体电荷不均一性组分等电点分布范围,再优化离子交换色谱法分析抗EGF单克隆抗体表面电荷不均一的条件,包括色谱柱、流动相pH、梯度及柱温,选择最佳的分析条件分析糖基化对单克隆抗体的电荷不均一性分布的影响。凝胶等电聚焦电泳方法分析抗EGF单克隆抗体电荷不均一性组分等电点分布范围在8.0～8.6范围内,离子交换色谱法分析表面电荷不均一性的最佳条件:TSK-gel CM-STAT离子交换色谱柱、流动相pH 6.0、合适的起始梯度及梯度陡度有利于电荷不均一性各组分的分离,柱温为40℃;去除糖基化的单克隆抗体分布在酸性区的表面电荷不均一组分相对含量增加。合适的分析条件能够使单克隆抗体表面电荷不均一性各组分在离子交换色谱柱上得到最佳分离及获得较高灵敏度,单克隆抗体的糖基化修饰使表面电荷不均一性向碱性区发生偏移。

抗EGFR单克隆抗体表面电荷不均一性的分析条件优化

优化离子交换色谱法分析抗表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体表面电荷不均一性的条件。考察了离子交换色谱法分析抗EGFR单克隆抗体表面电荷不均一的条件,包括色谱柱、流动相pH、梯度及柱温。离子交换色谱法分析表面电荷不均一性的最佳条件:TSK-gelCM-STAT离子交换色谱柱、流动相pH6.0、合适的起始梯度及梯度陡度有利于电荷不均一性各组分的分离,柱温为40℃。合适的分析条件能够使单克隆抗体表面电荷不均一性各组分在离子交换色谱柱上得到最佳分离及获得较高灵敏度。

制剂组成对抗表皮生长因子单克隆抗体稳定性的影响

目的:研究制剂组成对抗表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)单克隆抗体稳定性的影响。方法:应用体积排阻色谱、离子交换色谱、酶联免疫反应对加速试验条件下的单克隆抗体的降解、多聚体的产生、表面电荷的不均一性和活性进行测定。结果:在pH相同的制剂中缓冲组分是稳定单克隆抗体的关键因素,制剂溶液中其他保护成分如非离子型表面活性剂的浓度、糖的类型及浓度对单克隆抗体稳定性有一定的影响。结论:选择合适的制剂组分与浓度能够有效地提高单克隆抗体的稳定性,在单克隆抗体药物制剂工艺开发中,对制剂组成进行优化是必要的。