猪肺炎支原体膜蛋白P46基因在大肠杆菌中的表达

把猪肺炎支原体 (Mycoplasmahyopneumoniae) 国际标准株 2 32的P4 6基因克隆进pGEM_T_EASY载体上 ,通过PCR方法把该基因中三个编码Trp的密码子TGA突变为TGG ,然后将该基因亚克隆到载体pMAL_P2X上 ,得到重组表达载体 pMAL_P2X_P4 6。用该重组载体转化大肠杆菌TB1,得到表达重组菌TB1_pMAL_P2XA_P4 6 ,用终浓度为 0 3mM的IPTG在 37℃下诱导表达 ,获得可溶性表达的融合蛋白MBP_P4 6 ,在免疫印迹试验中 ,兔抗MBP高免血清和兔抗猪肺炎支原体高免血清都能与目的蛋白发生阳性反应 ,证明猪肺炎支原体P4 6基因在大肠杆菌里获得了可溶性表达。