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题名金黄葡萄球菌ClfA活性基因的克隆及原核表达
被引量:1
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作者
尹荣兰
张乃生
张艳晶
杨正涛
刘辉
杨琦
刘珊
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机构
吉林大学畜牧兽医学院
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出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2009年第1期38-40,共3页
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基金
国家自然科学基金资助项目(30771596)
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文摘
目的克隆金黄葡萄球菌表面蛋白凝集因子A(ClfA)活性基因,并进行原核表达。方法以金黄葡萄球菌基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增ClfA(221-550)活性基因,克隆入载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a-ClfA(221-550),转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果PCR扩增出987bp的目的基因片段,重组表达质粒经双酶切证明构建正确。表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约36000处可见目的条带,目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的36.76%,且具有良好的反应原性。结论已成功克隆了金黄葡萄球菌ClfA活性基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了目的蛋白。
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关键词
金黄葡萄球菌
表面蛋白凝集因子a
活性基因
克隆
原核表达
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Keywords
Stapylococcus aureus
Clumping factor A
Active gene
Cloning
Prokaryotic expression
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分类号
R378.11
[医药卫生—病原生物学]
Q785
[生物学—分子生物学]
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