变形链球菌表面蛋白可变区与葡聚糖合成的关系

目的：探讨变形链球菌表面蛋白可变区与葡聚糖合成的关系。方法：取本课题组前期工作所获得的变链c型临床株，分成水溶性葡聚糖（WSG）组和水不溶性葡聚糖（WIG）组；每组又按葡聚糖合成能力分为合成量高（ABS〉0．5）与合成量低（ABS〈0．15）组。以所选细菌DNA为模板，PCR扩增表面蛋白V区编码基因SrV＋，经DdeI酶切分型，比较各基因型在两组细菌中的分布情况。结果：1）两组均有4种基因型（A、B、C、D）并且在构成比上都以A、B型占多数，C、D型所占比例较少且存在明显差异；2）在WSG组主要基因型的分布出现差异：合成量高的以A型为主占50％，B型占33．33％，C型占11．11％；合成量低的以B型为主占50％，A型占30．77％，C型19．15％。5）在WIG组A、B型的分配基本相似，均在40～48％之间。结论：变形链球菌表面蛋白可变区的基因型分布与水溶性葡聚糖的合成存在一定的相关性而与水不溶性葡聚糖的合成未见明显关联。

变形链球菌表面蛋白可变区(extended-V)的遗传多态性分析

目的:从分子水平探讨变形链球菌(血清c、f型)表面蛋白可变区(extended-V,V+)的遗传状况,分析其基因中存在的变异,为进一步研究其结构和功能提供遗传信息。方法:选择临床最常见的血清型c、f型菌株117株(包括7株参考株),提取DNA,行PCR扩增,获得SrV+区片段基因;利用限制性内切酶DdeI进行限制性片段长度多态性分析(RFLP),并与部分国际参考株进行比较归类。从所占比例较多的基因型中,各选一代表株的PCR产物分别测序,将测序结果用Clone3.1version软件比较各型酶切位点。结果:117株菌株共分出5种基因型(A、B、C、D、E型);血清f型OMZ175为其中的一种;A型48株,B型45株,C型20株,D、E型则分别只有1株和3株,显示出明显差异;以参考株基因型为准,分别将A、B、C型定为p1样、spaP样或sr样、pac样;D型只有1株临床株,不排除实验过程中突发变异的可能;E型的3株也为临床株,尚无参考株与其相对应。结论:变形链球菌(血清c、f型)表面蛋白可变区呈多态性分布,有5种基因型,分布较为集中者分别为p1样、spaP或sr样、pac样,且血清f型属于血清c型的spaP样。