重组变形链球菌V+蛋白的表达和纯化

目的 探讨变形链球菌表面蛋白可变区 (V + )基因在大肠杆菌中高效诱导表达及其表达产物的进一步纯化。方法 将V +基因以C端融合 6个组氨酸的形式在E .coliBL2 1(DE3 )中进行IPTG诱导表达。His6 融合表达产物经金属离子(Ni2 +)配体亲和层析分离纯化 ,SDS PAGE电泳和Westernblot印迹分析表达产物。结果 SDS PAGE分析确定有与His6 融合表达产物 (His6 rV + )理论相对分子质量一致的诱导表达条带 ,其表达量占全菌蛋白的 2 0 %左右 ,表达产物以可溶形式存在。进一步纯化目的蛋白 ,纯度可达 90 %。Westernblot实验表明表达产物具有良好的抗原性。结论 His6 融合表达载体可以高效地表达和纯化重组V +蛋白。