山柰酚对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨山柰酚对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法培养多囊肾囊肿衬里上皮细胞,使用不同浓度山柰酚(5、10、20μmol/L)进行处理。采用MTT、克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期、凋亡,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、p-ERK1、p-p38 MAPK蛋白表达。结果与对照组比较,各浓度山柰酚组多囊肾囊肿衬里上皮细胞克隆细胞数、CDK2、PCNA、Bcl-2、p-ERK1、p-p38 MAPK蛋白表达降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达升高(P<0.05)。结论山柰酚可能通过抑制MAPK信号通路抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖,并诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。

角质细胞生长因子对常染色体显性遗传型多囊肾病囊肿衬里上皮细胞的促增殖作用

目的 :观察角质细胞生长因子 (KGF)在体外对常染色体显性遗传型多囊肾病 (ADPKD)囊肿衬里上皮细胞的促增殖作用并探讨其可能的作用机制。方法 :外源性给予不同浓度的 KGF(0～ 10 0 ng/ ml) ,采用 MTT法检测细胞增殖情况 ,流式细胞术检测细胞周期 ,在电镜下观察细胞形态。结果 :KGF呈剂量、时间依赖性地促进了 ADPKD囊肿衬里上皮细胞的增生 ,表现为细胞数量增多 ,S期细胞比率增高 ,细胞分裂活跃 ,增生的细胞形态尤其是细胞核较正常体积增大。结论 :KGF可显著刺激 ADPKD囊肿衬里上皮细胞的增殖 ,提示 KGF可能参与 ADPKD肾囊肿的形成和发展。

多囊肾病囊肿衬里上皮细胞细胞系的建立与鉴定

目的 :建立人常染色体显性遗传型多囊肾病 (ADPKD)囊肿衬里上皮细胞系。 方法 :ADPKD囊肿衬里上皮细胞经FuGENE6介导转染pSV3质粒 ,并以G418筛选转染成功的细胞。转染后的第 48代细胞予以光镜、电镜形态学观察 ,细胞生长率测定 ,细胞染色体检查 ,碱性磷酸酶染色及细胞角蛋白、波形蛋白等免疫组化检查。结果 :第 48代细胞的碱性磷酸酶染色及抗细胞角蛋白、波形蛋白单克隆抗体反应阳性 ;形态学特征 ,细胞生长率与未经转化的第 2代细胞相比也无明显差异 ;但大部份转化细胞染色体为异倍体。 结论 :经鉴定 ,ADPKD囊肿衬里上皮细胞系已建立 ,可用于ADPKD细胞及分子生物学的研究。

塞来昔布通过阻断丝裂原活化蛋白激酶信号途径抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(CXB)能否通过阻断丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖。方法:原代培养多囊肾囊肿衬里上皮细胞,以不同浓度CXB(0、2.5×10-6、5×10-6、1×10-5、2×10-5、3×10-5、4×10-5、5×10-5mol/L)处理细胞,采用BrdU法检测细胞增殖状态。ELISA法检测各组血管内皮生长因子(VEGF)的含量。荧光定量PCR技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)、磷酸化MAPK的mRNA含量,Western印迹法检测PCNA、MAPK和磷酸化MAPK的表达。结果:CXB对囊肿衬里上皮细胞的增殖具有明显抑制作用,呈时间和剂量依赖性,其中2×10-5mol/L CXB作用24 h的抑制作用最强,抑制率为(63.9±1.2)%;CXB可减少囊肿衬里上皮细胞VEGF的分泌,而且抑制作用具有时间、浓度依赖性。CXB剂量依赖性减低PCNA和磷酸化MAPK的mRNA和蛋白表达。结论:CXB明显抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,抑制细胞产生VEGF;其作用与干扰MAPK磷酸化,部分阻断MAPK信号转导通路有关。

霉酚酸酯与雷帕霉素对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡影响的比较

目的:观察霉酚酸酯(MMF)对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响,并与雷帕霉素(RAPA)比较。方法:采用原代培养的人多囊肾囊肿衬里上皮细胞,用不同浓度MMF和RAPA分别作用48 h和72 h。MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;AnnexinⅤ-FITC流式细胞术测定细胞凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构改变。结果:MMF和RAPA均能抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,呈明显的量效和时效关系。作用48 h后MMF使细胞阻滞在S期,RAPA使细胞阻滞在G0/G1期。MMF和RAPA均可诱导细胞凋亡,最大凋亡率分别为(5.53±0.27)%和(4.36±0.10)%;电镜下可见典型的凋亡改变。结论:MMF与RAPA相比同样能明显抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,诱导细胞凋亡,但其对细胞增殖的抑制作用较RAPA弱。

罗格列酮对多囊肾囊肿衬里上皮细胞中β-catenin表达的影响

目的:分析多囊肾组织和正常肾组织中β-catenin表达分布差异,并观察罗格列酮对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞(WT9～12)中β-catenin蛋白水平的干预作用。方法:免疫组织化学方法检测人多囊肾组织及多囊肾动物模型PKDV/V小鼠肾组织与其相应正常肾组织中β-catenin表达分布差异;MTT法检测不同浓度罗格列酮对WT9～12增殖抑制情况;RT-PCR技术检测罗格列酮干预后β-catenin mRNA水平;Western blot技术检测β-catenin的表达。结果:正常肾小管上皮细胞β-catenin主要在胞膜分布,胞核及胞浆少见;囊肿衬里上皮细胞中β-catenin蛋白表达水平明显增加,且存在核转位;PKDV/V小鼠囊肿衬里上皮细胞胞核β-catenin呈强阳性分布。罗格列酮对WT9～12有增殖抑制作用,其作用72h后,对β-catenin mRNA水平无影响,但可明显下调β-catenin蛋白水平,且加入PPAR-γ阻断剂后不能阻断罗格列酮的下调作用。结论:多囊肾组织中存在Wnt/β-catenin通路异常,罗格列酮可抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖,其作用机制可能与下调β-catenin表达从而抑制Wnt/β-catenin通路有关,并且这种下调作用通过非PPAR-γ依赖性途径实现。

多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增生与凋亡的研究

目的 :研究多囊肾病囊肿衬里上皮的增生与凋亡及相关蛋白表达。 方法 :应用原位末端标记(TUNEL)法和免疫组化法 ,对 3例正常肾组织和 12例常染色体显性遗传型多囊肾病 (ADPKD)患者 (2例为终末期肾病患者 ,10例为氮质血症期患者 )肾组织中囊肿衬里上皮细胞的凋亡细胞和增生细胞核抗原 (PCNA)阳性细胞计数 ,并检测c myc、bcl 2、bax、p5 3、Fas蛋白表达。 结果 :多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增生与凋亡均增加 ,增生较凋亡增加显著 ,PCNA阳性细胞 /凋亡细胞为 3 46± 1 6 8。多囊肾组织c myc蛋白和bcl 2蛋白表达显著升高。bax、p5 3和Fas的表达并无改变。 结论 :多囊肾病中囊肿衬里上皮细胞的增生和凋亡失调 ,调节这些过程的基因异常表达介导了多囊肾病囊肿形成。多囊肾组织c myc蛋白高度表达 ,与囊肿衬里上皮过度增生、凋亡相关。多囊肾囊肿衬里上皮细胞的凋亡不依赖于bcl 2、p5 3和Fas。

2-脱氧葡萄糖对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖的影响

目的探讨2-脱氧葡萄糖(2-DG)对常染色体显性多囊肾病(ADPKD)囊肿衬里上皮细胞WT9-12增殖的影响及其可能的作用机制。方法将体外培养的细胞分为对照组、不同浓度2-DG处理组(5、10、20、40 mmol/L)。用CCK-8法筛选不同浓度2-DG处理多囊肾上皮细胞不同时间(12、24、36、48 h)后,抑制细胞增殖活力的最适浓度和最适时间。采用Ed U核酸标记技术和Western blot检测2-DG最适浓度处理多囊肾上皮细胞48 h后细胞的增殖抑制情况及代谢相关磷酸化-AMPKα(P-AMPKα)及增殖相关m TOR信号通路分子磷酸化-m TOR、p70S6K、4E-BP1(P-m TOR、P-p70S6K、P-4E-BP1)的水平变化;流式细胞术及Caspase-3试剂盒检测不同浓度2-DG处理多囊肾上皮细胞48 h后细胞的凋亡率。结果与对照组比较,2-DG可明显抑制多囊肾上皮细胞的增殖,且呈浓度和时间的依赖性(P<0.05);细胞代谢相关分子P-AMPKα的水平明显升高(P<0.05),增殖相关m TOR信号通路分子P-m TOR、P-p70S6K、P-4E-BP1的活性明显抑制(P<0.05);与对照组比较,各浓度2-DG处理组的多囊肾上皮细胞早期凋亡率均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 2-DG可能通过调控AMPK-mTOR信号通路,促进细胞凋亡,共同抑制多囊肾上皮细胞增殖。

肝细胞生长因子对多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成的影响

目的 :研究重组人肝细胞生长因子 (rh HGF)对常染色体显性遗传型多囊肾病 (ADPKD)囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成的影响。方法 :用 3H- Td R掺入法测定不同浓度 (0 .5、1、2 .5、5 ng/m l) rh HGF作用 48h以及最适浓度的 rh HGF分别作用 2 4、48、72 h ADPKD囊肿衬里上皮细胞系细胞的增殖情况 ;并分别用 3H -脯氨酸掺入法和放免法测定最适浓度rh HGF作用最佳时间后 ADPKD囊肿衬里上皮细胞系细胞胶原及层粘连蛋白的合成情况。 结果 :rh HGF促进了 ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖及胶原和层粘连蛋白的合成 ,以 1ng/m l持续作用 48h最为显著。结论 :rh HGF对体外培养的 ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成有明显的促进作用。

羧酸类化合物DJ5对人肾囊肿衬里上皮细胞的增殖抑制作用

目的:观察羧酸类化合物DJ5对人肾囊肿衬里上皮细胞WT9-12的增殖抑制作用并探讨其作用机制。方法:MTT法检测细胞增殖,LDH释放实验检测细胞毒性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot检测周期相关蛋白P21、cyclinA,凋亡蛋白PARP,通路蛋白Akt、FoxO3a蛋白表达。结果:实验表明100μmol/L的DJ5作用WT9-12细胞72h,细胞增殖抑制率为59.2%,DJ5使细胞周期阻滞在S期并促进细胞早期凋亡。DJ5可上调WT9-12细胞周期抑制蛋白P21表达、下调cyclinA表达;使PARP活性片段89kD表达明显增加。DJ5可下调磷酸化Akt、磷酸化FoxO3a表达、上调FoxO3a表达。结论:DJ5通过阻滞细胞周期、促进细胞凋亡及抑制Akt-FoxO3a通路蛋白发挥抑制WT9-12细胞增殖作用。

4-羟苯基维甲酸诱导常染色体显性遗传性多囊肾病囊肿衬里上皮细胞凋亡

目的 :探讨 4 -羟苯基维甲酸 (4- HPR)诱导常染色体显性遗传性多囊肾病 (ADPKD)囊肿衬里上皮细胞凋亡的作用及其机制。方法 :采用 MTT法检测 1、2 .5、5、10μmol/ L 4 - HPR分别作用 ADPKD囊肿衬里上皮细胞 2 4、4 8、72、96 h后细胞的增殖情况 ;采用锥虫蓝染色、DNA电泳、Hoechst 33342染色检测 4 - HPR作用后的肝细胞生长因子 (HGF)刺激的 ADPKD囊肿衬里上皮细胞的存活率和凋亡率 ;采用免疫组化及半定量分析检测 4 - HPR对 HGF刺激的囊肿衬里上皮细胞表达 HGF和c- Myc蛋白的作用。结果 :与对照组比较 ,4 - HPR抑制了 ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖 ,且呈量效和时效关系 ,5 μmol/ L 或10 μmol/ L 4 - HPR作用 96 h后抑制效果最强 (P<0 .0 1)。 4 - HPR显著降低 HGF刺激的囊肿衬里上皮细胞的存活率 ,且诱导细胞凋亡 ,与对照组比较差异显著 (P<0 .0 1)。与 HGF组比较 ,4 - HPR显著降低 HGF刺激的囊肿衬里上皮细胞表达 HGF蛋白 (P<0 .0 1) ,但不影响表达 c- Myc蛋白。 结论 :4 - HPR诱导了 HGF刺激的 ADPKD囊肿衬里上皮细胞凋亡 ,其机制可能通过降低 HGF刺激的 ADPKD囊肿衬里上皮细胞表达 HGF蛋白 ,不是影响 c-

一种新型嘧啶基取代芳基苯酸衍生物对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖抑制的实验研究

目的:观察新型PPARγ激动剂DH9对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞(WT9-12)增殖的影响。方法:予以不同浓度的DH9及罗格列酮作用WT9-12细胞24、48、72、96 h,MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术观察细胞周期的改变;AnnexinV+PI双染色流式细胞术测定细胞凋亡率;Western blotting分析cyclinA、P21CIP/WAF1、Bax和Bcl-2的表达。结果:DH9抑制细胞增殖作用明显优于罗格列酮(P<0.05),并呈量-效和时-效关系。比较加入PPAR-γ抑制剂GW9662前后细胞增殖抑制作用差异无统计学意义(P>0.05)。DH9可增加P21CIP/WAF1蛋白合成,减少CyclinA蛋白合成,使细胞阻滞在S期。DH9作用72 h后Bcl-2/Bax的比值分别为较对照组(2.19±0.08)显著减少(P<0.05),具有促进细胞凋亡的作用。结论:DH9抑制WT9-12细胞增殖活性明显优于罗格列酮,且这种增殖抑制作用与DH9作用在细胞周期的不同调节点,促进WT9-12细胞凋亡有关。

齐墩果酸对人肾囊肿衬里上皮细胞周期及凋亡的影响

目的:观察齐墩果酸对人肾囊肿衬里上皮细胞WT9-12的增殖抑制作用,探讨其对WT9-12细胞周期及凋亡的影响。方法:MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,Western blotting方法检测周期相关蛋白P21 CIP/WAF1、cyclinD1及凋亡蛋白PARP的表达。结果:MTT实验证实齐墩果酸对人肾囊肿衬里上皮细胞WT9-12的增殖有抑制作用,并表现为时间及剂量依赖性,200μmol/L齐墩果酸作用72h对细胞的增殖抑制率为37.15%,与同浓度罗格列酮的增殖抑制率无明显差异;流式细胞术检测发现齐墩果酸能使细胞阻滞在G0/G1期,并诱导细胞早期凋亡,齐墩果酸浓度越高,阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡的作用越明显;western blotting方法检测发现齐墩果酸抑制周期蛋白cyclinD1表达,促进P21 CIP/WAF1表达,并且促进PARP活性片段的表达。结论:齐墩果酸在体外能够抑制人肾囊肿衬里上皮细胞WT9-12的增殖,对细胞周期的阻滞和促进细胞凋亡是其作用机制之一。

雷公藤内酯醇对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的观察雷公藤内酯醇(TP)对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法采用原代培养的人多囊肾囊肿衬里上皮细胞,用不同浓度TP作用12,24,48和72 h。Brdu法检测细胞的增殖活性;流式细胞术检测细胞周期变化;FITC-Annexin V binding/PI染色检测细胞凋亡及凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构变化。结果 TP能抑制囊肿衬里上皮细胞增殖、诱导细胞凋亡,呈明显的量效关系(10~40 ng·m L-1)和时效关系(12~48 h)。电镜下可见典型凋亡细胞的超微结构变化。结论 TP能明显抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能是多靶点、多途径抑制细胞的增殖,诱导细胞的凋亡,从而抑制囊肿生成,延缓囊肿进展。

中药三棱对多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增殖及上皮生长因于受体磷酸化的影响

目的 探讨中药三棱对体外培养的常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤ）囊肿衬里上皮细胞增殖及上皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）磷酸化的影响。方法 体外培养的囊肿衬里上皮细胞经ＥＧＦ、三棱作用后，采用 Ｂｒｄｕ掺入法测定细胞增殖，流式细胞仪测定细胞周期，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测ＥＧＦ－Ｒ磷酸化。结果 与对照组比较，ＥＧＦ（２．５～２０ ｎｇ／ｍｌ）可刺激衬里上皮细胞增殖（Ｐ＜０．０１）；与对照血清比较，三棱含药血清（１％～５％）能明显抑制经ＥＧＦ刺激后的衬里上皮细胞增殖（Ｐ＜００１），阻止细胞从Ｇ_０－Ｇ_１期进入Ｇ_２－Ｍ期，其作用效果呈浓度依赖性；三棱含药血清能抑制囊肿衬里上皮细胞ＥＧＦ－Ｒ的磷酸化（Ｐ＜０．０５）。结论 ＥＧＦ在多囊肾病发病中起促进作用，三棱可能通过对ＥＧＦ－Ｒ磷酸化的干预而达到抑制细胞增殖的作用，从而为延缓多囊肾病的发生与发展提供理论根据。

塞来昔布诱导多囊肾囊肿衬里上皮细胞凋亡的实验研究

目的通过观察特异性环氧酶2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib,CXB)诱导人多囊肾囊肿衬里上皮细胞凋亡,初步探讨该药诱导细胞凋亡的作用机制。方法(1)原代培养囊肿衬里上皮细胞,分为对照组、CXB组,采用Brdu法检测细胞增殖状态。(2)应用透射电镜观察细胞超微结构。(3)TUNEL法检测细胞凋亡及凋亡率。(4)应用AnnexinV+流式细胞术检测CXB诱导细胞凋亡及凋亡率。(5)应用免疫印迹法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果(1)Brdu结果显示,CXB能抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞的增殖,在24～72 h,浓度为(0．25～2)×10^(-5) mol/L的范围内呈时间和剂量依赖性。(2)电镜下可见细胞核浓缩、染色质聚集、胞浆空泡化、凋亡小体出现、沟裂和裸核形成等典型凋亡征象。(3)TUNEL法显示,对照组细胞凋亡率为(2．8±0．2)%,2×10^(-5) mol/L CXB作用24、48 h细胞凋亡率为(28．5±1．6)%和(48．5±1．2)%,两者差异有统计学意义(P＜0．05)。(4)AnnexinV+流式细胞仪法结果显示,不同浓度(0．5、1、2×10^(-5) mol/L)CXB处理24 h凋亡率分别为(7．15±0．11)%、(7．76±0．08)%和(12．15±0．07)%,显著高于无血清对照组(3 15±0．05)%；不同浓度CXB处理48 h的凋亡率分别为(18．36±0．17)%、(24．87±0．25)%和(53．66±0．32)%,显著高于无血清对照组(13．53±0．21)%,组间差异均有统计学意义(P均＜0．01)。(5) Western印迹结果显示,随CXB作用时间延长,Bcl-2的表达逐渐减弱而Bax的表达逐渐增强,Bcl-2/Bax的比值逐渐减少。结论塞来昔布呈时间和剂量依赖性抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,通过下调Bcl-2,上调Bax,减少Bcl-2/Bax的比值诱导细胞凋亡。本研究结果为将CXB用于治疗常染色体显性多囊肾病提供了实验依据。

塞来昔布对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞周期的影响

环氧化酶-2（COX-2）的表达除与已知的炎症反应有关外，其在肿瘤的发生发展中也起重要作用。动物实验及流行病学资料表明，COX-2特异性抑制剂塞来昔布可有效抑制结直肠癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌等肿瘤的发生发展。多囊肾囊肿衬里上皮细胞具有类似良性肿瘤的高增殖抒性，如能抑制其增殖活性，则可阻止囊肿的产生与长大，达到干预性治疗的目的。本研究观察了塞来昔布对囊肿衬里上皮细胞增殖及周期的影响，并初步探讨其作用机制。

细胞角蛋白及其mRNA在根端囊肿上皮衬里中的表达

目的本研究目的是探讨根端囊肿上皮衬里细胞角蛋白及其mRNA的表达情况。方法检测52例根端囊肿衬里上皮的细胞角蛋白(CK8,CK13和CK18)的表达,其中采用免疫组化染色法检测32例上颌根端囊肿和20例下颌根端囊肿;采用原位杂交法检测24例上颌根端囊肿和13例下颌根端囊肿CK-mRNA表达;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测24例上颌囊肿。结果上颌根端囊肿中CK8,CK13,CK18阳性的鳞状上皮衬里分别是20例,29例和19例,下颌根端囊肿中表达阳性的分别为10例,20例和11例。上颌根端囊肿中[CK18(+)-CK13(-)]3例,[CK18(+)-CK13(+)]13例,[CK18(-)-CK13(+)]13例,而下颌根端囊肿中[CK18(+)-CK13(-)]0例,[CK18(+)-CK13(+)]11例,[CK18(-)-CK13(+)]9例。原位杂交显示24例上颌根端囊肿和13例下颌根端囊肿分别有9例和4例囊肿衬里中有CK18-mRNA表达。RT-PCR检测发现CK18-mRNA和CK13-mRNA在正常鼻窦粘膜和牙龈上皮(对照组)及上颌囊肿衬里都有表达。结论CK18-mRNA和CK13-mRNA在根端囊肿鳞状上皮和柱状上皮基本上都有表达。上颌根端囊肿中CK蛋白及其CK18-mRNA表达的不同,可能是囊肿上皮衬里基因型发生转变的结果。

基因沉默多囊蛋白1和水通道蛋白2对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖及基质分泌的影响

目的观察沉默多囊蛋白1(PC-1)和水通道蛋白2(AQP-2)的表达对人常染色体显性遗传性多囊肾囊肿衬里上皮细胞(WT9-12)增殖和基质分泌的影响。方法采用RNA干扰技术(RNAi)特异性抑制PC-1和AQP-2的表达,噻唑蓝法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测WT9-12细胞凋亡和周期的变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定分析细胞基质分泌的变化。结果实验表明,下调细胞中PC-1的表达,在转染24、48、72和96h后,对WT9-12细胞增殖的抑制率分别为12.55%,17.79%、24.69%和35.81%;而下调AQP-2表达,转染72和96h后抑制率为6.77%和8.73%。流式细胞术检测发现下调PC-1可使细胞被阻滞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡,而下调AQP-2表达对细胞周期和凋亡无明显的影响;ELISA检测发现沉默AQP-2的表达能抑制Ⅰ型胶原的分泌[(5.53±1.72)比(9.04±2.83)μg/L,P<0.05]。结论应用RNAi可通过下调PC-1的表达抑制WT9-12细胞增殖,并诱导细胞凋亡;而下调细胞AQP-2的表达则可抑制细胞基质Ⅰ型胶原的分泌抑制肾囊肿的发生发展。

羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂对多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增殖抑制及其机制的研究

目的 探讨羟甲基戊二酷辅酶 Ａ（ＨＭＧ ＣｏＡ）还原酶抑制剂对常染色体显性遗传型多囊肾病（ＡＤＰＫＤ）囊肿衬里上皮细胞的作用及其机制。方法 噻唑蓝（ＭＴＴ）法检测细胞增殖，免疫印迹法检测细胞膜ｐ２１ｒａｓ的表达．免疫细胞化学检测细胞核ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ的表达。结果ＡＤＰＫＤ囊肿衬里上皮细胞经 ＨＭＧ ＣｏＡ还原酶抑制剂处理后，细胞增殖受到显著抑制（Ｐ＜０．０１），细胞膜 ｐ２１ｒａｓ蛋白表达下调，细胞核ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ的表达显著下降（Ｐ＜０．０１）。结论 ＨＭＣ ＣｏＡ还原酶抑制剂能抑制ＡＤＰＫＤ囊肿衬里上皮细胞的增殖，其机制可能与抑制细胞内ｒａｓ蛋白的异戊二烯化并阻断ｒｓ介导的信号转导有关。