精制蟒蛇油延缓皮肤衰老的实验研究

【目的】观察精制蟒蛇油对D-半乳糖所致衰老小鼠皮肤组织的延缓衰老作用。【方法】选用昆明种小鼠,随机分为蟒蛇油高、中、低剂量组(中药高、中、低剂量组,剂量分别为10、5、2.5 mL/kg),维生素E组(剂量为50 mg/只),模型组和正常对照组;除正常对照组外,其他组均采用颈背部皮下注射D-半乳糖(剂量为1 g/kg)法复制亚急性衰老模型,同时各组皮肤涂布给药,连续42 d。取各组小鼠背部皮肤检测含水量、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,并进行组织病理学检查。【结果】模型组皮肤含水量及SOD活力降低,MDA含量升高,与正常对照组比较差异具有显著性意义(均P<0.01);中药高、中、低剂量组及维生素E组均可升高皮肤含水量和SOD活力,降低MDA含量,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.01),并可改善皮肤组织的病理形态变化。【结论】精制蟒蛇油具有一定延缓皮肤衰老的作用,其机制与其能增加皮肤含水量和SOD活力,降低MDA含量有关。

滋肾宁神胶囊对D-半乳糖所致亚急性衰老模型大鼠的影响

【目的】观察滋肾宁神胶囊对D-半乳糖所致亚急性衰老模型大鼠的影响。【方法】选用SD大鼠随机分成空白对照组,模型组,七宝美髯丸组(剂量为2 g.kg-1.d-1),滋肾宁神丸组(剂量为3.33 g.kg-1.d-1),滋肾宁神胶囊高、中、低剂量组(剂量分别为9.96、4.98、2.49 g.kg-1.d-1);除空白对照组外,其他组均采用D-半乳糖(剂量为200 mg.kg-1.d-1)腹腔注射30 d复制亚急性衰老模型,第31天开始各组分别按设计剂量连续给药90 d。取各组大鼠大脑皮层检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,丙二醛(MDA)含量,以及神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量。【结果】模型组大鼠SOD、GSH-PX活力及NE、DA、5-HT含量均下降,MDA含量升高,与空白对照组比较差异具有显著性意义(P<0.05或P<0.01);滋肾宁神胶囊高、中剂量组可升高SOD、GSH-PX活力和NE、DA含量,降低MDA含量,低剂量组可升高SOD、GSH-PX活力和NE含量,与模型组比较差异均有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。【结论】滋肾宁神胶囊抗衰老作用与其能提高SOD、GSH-PX活力,增强清除自由基能力,提高单胺类神经递质含量有关。

衰老大鼠睾丸增殖细胞核抗原表达与何首乌颗粒的干预效应(英文)

背景:何首乌颗粒由何首乌、肉苁蓉、怀牛膝等组成,具有补肝肾、益精血、延年益寿的功效。目的:观察中药何首乌颗粒对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠血清睾酮含量及睾丸生精细胞增殖细胞核抗原表达的影响。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:承德医学院基础医学研究所。材料:实验于2003-04/07在承德医学院基础医学研究所完成。选用成年雄性SD大鼠32只。大鼠被随机分为4组:正常对照组、模型组、用药组和阴性对照组,每组8只。方法:①模型组、用药组、阴性对照组大鼠均采用D-半乳糖连续腹腔注射200mg/(kg·d),1次/d,共40d,制作亚急性衰老的大鼠模型。模型组大鼠于造模成功后不再作任何处理;用药组大鼠于造模成功后每天用何首乌颗粒(由灸何首乌、怀牛膝、肉从蓉、茯苓、丹参、淫羊藿六味中药组成,经熬制后每毫升含生药1.5g)灌胃;阴性对照组大鼠在造模成功后每天灌胃同等剂量的生理盐水,时间同用药组大鼠。正常对照组大鼠不造成衰老模型,干预措施同阴性对照组。②血清睾酮水平酶联免疫吸附法检测。增殖细胞核抗原的表达情况采用免疫组化法检测,以细胞核呈桔黄色或棕黄色颗粒为阳性。③计量差异性测定采用t检验。主要观察指标:各组大鼠血清睾酮含量、睾丸生精细胞增殖细胞核抗原的表达比较。结果:大鼠32只均进入结果分析。①血清睾酮水平:模型组大鼠血清睾酮水平明显低于正常对照组犤(0.52±0.14),(1.26±0.32)μg/L,P<0.05犦;用药组明显高于模型组犤(1.16±0.32)μg/L,P<0.05犦。②大鼠睾丸增殖细胞核抗原的阳性细胞率:模型组明显低于正常对照组犤(23.26±3.38)%,(39.15±3.48)%,P<0.05犦;用药组大鼠明显高于模型组犤(37.47±3.18)%,P<0.05犦。③增殖细胞核抗原在生精小管中的分布及变化:各组切片均可见增殖细胞核抗原阳性染色,免疫阳性产物位于细胞核,通常呈棕黄色颗粒,小部分呈弥散状;免疫阳性细胞主要是精原细胞,另外还有少量初级精母细胞、支持细胞和肌样细胞核着色。结论:何首乌颗粒可以逆转衰老大鼠血清睾酮含量及睾丸生精细胞增殖细胞核抗原表达水平的下降,从而延缓生殖功能的退化,具有一定延缓衰老的作用。

天年饮干预亚急性衰老大鼠模型的性腺功能(英文)

背景:随着机体衰老性腺功能逐渐降低,中国传统医学认为精气虚弱是导致机体衰老的主要原因。目的:观察中药天年饮对亚急性衰老大鼠血清睾酮含量、睾丸组织超氧化物歧化酶的活性及睾丸生精细胞凋亡的影响。设计:随机对照实验。单位:承德医学院人体解剖学教研室。材料:实验于2003-04/07在承德医学院基础医学研究所进行。选择成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只。模型组、用药组、对照组采用D-半乳糖连续腹腔注射200mg/(kg·d)制备亚急性衰老动物模型,1次/d,共40d,模型组大鼠于造模成功后不再作任何处理。用药组大鼠于造模成功后每天用天年饮灌胃(天年饮由灸何首乌、怀牛膝、肉从蓉、茯苓、丹参、淫羊藿6味中药组成,经熬制后含生药1.5g/mL),1次/d,共30d;对照组大鼠在造模成功后每天灌胃同等剂量的生理盐水,时间同用药组大鼠。方法:各组大鼠血清中睾酮的含量采用酶联免疫吸附方法检测,睾丸组织中超氧化物歧化酶的活性采用黄嘌呤氧化酶法检测,睾丸生精细胞的凋亡情况采用免疫组化法观察。主要观察指标:①各组大鼠血清中睾酮的含量。②睾丸组织中超氧化物歧化酶的活性。③睾丸生精细胞的凋亡情况。结果:40只大鼠均进入结果分析。①血清中睾酮的含量:模型组大鼠血清睾酮含量低于正常组犤(0.52±0.15)μg/L,(1.26±0.32)μg/L,(t=3.004,P<0.05)犦,用药组高于模型组犤(1.16±0.32)μg/L,(0.52±0.15)μg/L,(t=2.321,P<0.05)犦。②睾丸组织超氧化物歧化酶的活性:模型组明显低于正常组犤(107.22±9.33)kNU/g,(147.73±11.9)kNU/g,(t=13.339,P<0.01)犦,用药组明显高于模型组犤(141.05±14.57)kNU/g,(107.22±9.33)kNU/g,(t=9.970,P<0.01)犦。③生精细胞的凋亡情况:模型组凋亡生精小管百分率、凋亡阳性细胞率均明显高于正常组犤(53.95±2.02)%比(34.21±2.10)%,(8.67±0.80)%比(3.86±0.52)%,(χ2=7.9,P<0.01,χ2=5.01,P<0.05)犦;用药组明显低于模型组犤(35.33±2.18)%比(53.95±2.02)%,(4.68±0.74)%比(8.67±0.80)%,(χ2=7.02,P<0.01,χ2=3.96,P<0.05)犦。结论:衰老模型睾丸生精细胞凋亡增多,经天年饮灌胃后可以使凋亡细胞阳性率明显下降,说明天年饮可以清除体内过多的氧自由基,减少凋亡发生,改善动物模型的生精功能。

天年饮延缓亚急性衰老大鼠生殖功能及性腺衰退的作用(英文)

背景:随着机体衰老性腺功能逐渐降低,中国传统医学认为精气虚弱是导致机体衰老的主要原因。目的:观察中药天年饮对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠血清睾酮含量、睾丸组织超氧化物歧化酶的活性及睾丸生精细胞增殖细胞核抗原表达的影响。设计:随机对照实验。单位:承德医学院基础医学研究所。材料:实验于2003-04/07在承德医学院基础医学研究所进行。选择成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只。正常组不做任何处理,模型组、用药组、阴性对照组采用D-半乳糖连续腹腔注射200mg/(kg·d)制备亚急性衰老动物模型,模型组大鼠于造模成功后不再作任何处理。用药组大鼠于造模成功后每天用天年饮灌胃,1次/d,共30d;阴性对照组大鼠在造模成功后每天灌胃同等剂量的生理盐水,时间同用药组大鼠。方法:各组大鼠血清中睾酮的含量采用酶联免疫吸附方法检测,睾丸组织中超氧化物歧化酶的活性采用黄嘌呤氧化酶法检测,增殖细胞核抗原的表达情况采用免疫组织化学法观察。主要观察指标:①血清中睾酮的含量。②睾丸组织中超氧化物歧化酶的活性。③睾丸生精细胞增殖细胞核抗原的表达情况。结果:40只大鼠均进入结果分析。①血清中睾酮的含量:模型组大鼠低于正常组(P<0.05),用药组高于模型组(P<0.05)。②睾丸组织超氧化物歧化酶的活性:模型组明显低于正常组(P<0.01),用药组明显高于模型组(P<0.01)。③睾丸生精细胞增殖细胞核抗原的表达情况:模型组低于正常组(P<0.05);用药组明显高于模型组(P<0.05)。结论:天年饮可延缓生殖功能的退化,具有一定的延缓衰老的作用。

何首乌蛋白质和蒽醌苷对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆及代谢产物的影响

【目的】观察何首乌蛋白质和蒽醌苷对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆与相关酶及代谢产物的影响。【方法】选用昆明种小鼠80只,随机分为8组:正常组,模型组,维生素E(VE)组(剂量为90 mg.kg-1.d-1),何首乌蛋白质(PRPM)高、低剂量组(剂量分别为20、5 mg.kg-1.d-1),何首乌蒽醌苷(AGRPM)高、低剂量组(剂量分别为28、7 mg.kg-1.d-1),AGRPM与PRPM混合组(混合组,均取两者低剂量);除正常组外,其他组均采用长期(7周)皮下注射D-半乳糖复制衰老小鼠模型。采用三等分辐射式迷宫测试小鼠的学习速率,用一次性被动回避反应测试小鼠的记忆能力;采用紫外可见分光光度计测定小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和单胺氧化酶(MAO)的活力及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量;采用荧光分光光度计测定肝组织中脂褐素(LF)的含量。【结果】高剂量PRPM组能显著改善衰老小鼠的记忆能力(P<0.05),高剂量AGRPM组可显著改善衰老小鼠的学习速率和记忆能力(P<0.05或P<0.01);PRPM组和AGRPM组均能显著增加衰老小鼠的肝系数、胸腺系数、脑系数和脾系数(P<0.05或P<0.01),降低衰老小鼠脑组织MAO的活力、脂质过氧化产物MDA的含量及肝组织中LF的含量(均P<0.05或P<0.01);PRPM、AGRPM低剂量组及混合组均能显著增加衰老小鼠脑组织SOD的活力(P<0.05或P<0.01)。【结论】何首乌蛋白质和蒽醌苷具有一定的抗衰老及促进记忆能力的作用。

二至丸加味方对D-半乳糖所致衰老模型大鼠体内自由基和免疫功能的影响

【目的】观察二至丸加味方对衰老模型大鼠体内自由基和免疫功能的影响。【方法】选用2.5月龄SD大鼠60只,随机分为5组:正常对照组,模型组,二至丸加味方高、中、低剂量组(剂量分别为11.5、7.0、3.5g·kg-1·d-1);除正常对照组以外,其他组均采用D-半乳糖300mg·kg-1·d-1腹腔注射2个月复制亚急性衰老模型,二至丸加味方各组分别按设计剂量连续灌胃给药2个月。检测各组大鼠全血超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血清白细胞介素-2(IL-2)水平和脾脏指数。【结果】模型大鼠全血SOD、血清IL-2水平以及脾脏指数均显著性降低,而血清MDA水平显著性升高(均P<0.05);二至丸加味方高、中、低剂量组均可不同程度地升高SOD、IL-2水平及脾脏指数,降低MDA水平(P<0.05或P<0.01)。【结论】二至丸加味方抗衰老的作用可能与其能清除自由基、提高机体免疫功能有关。

补肾生精法对老龄大鼠睾丸蛋白表达谱的影响

【目的】观察补肾生精法对老龄大鼠睾丸蛋白表达谱的影响。【方法】选用20只22月龄老龄雄性SD大鼠随机分为2组,每组10只,分别为空白对照组和补肾生精组;补肾生精组给药剂量为0.05 g.kg-.1d-1,连续灌胃给药60 d。取大鼠右侧睾丸,采用双向凝胶电泳法分析空白对照组和补肾生精组大鼠睾丸差异表达蛋白。【结果】与空白对照组比较,补肾生精组大鼠睾丸中有7种蛋白表达发生了显著变化,其中4种蛋白表达上调,3种下调。对7种差异表达蛋白点胶内酶切后进行质谱分析,其中5种蛋白分别鉴定为磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolamine-binding protein,PEBP)、热休克蛋白8(heat shock 70 kDa protein 8,HSP7C)、磷酸丙糖异构酶(triose-phosphate isomerase,TPIS)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、谷胱苷肽-S-基转移酶1(glutathione S-transferase Mu 1,GSTM1-1)。【结论】补肾生精法延缓衰老的作用可能与其能调节老龄大鼠睾丸蛋白表达有关。