衰老标记蛋白-30的表达与肝疾病的关系

目的通过检测人正常肝组织、病毒性肝炎组织、肝硬化组织和肝癌(HCC)组织及相应癌旁组织中衰老标记蛋白-30(SMP-30)的表达,探讨SMP-30与肝疾病的关系。方法将本课题组构建的含SMP-30羧基端165个氨基酸的cDNA序列表达质粒,经表达和纯化获得MBP-SMP-30,免疫家兔制备出抗MBP-SMP-30多克隆抗体。采用免疫组织化学SABC法,检测30例人正常肝组织、10例病毒性肝炎组织、49例肝硬化组织和48例人HCC及相应癌旁组织中SMP-30的表达。结果SMP-30定位于肝细胞的细胞质和细胞核,其在HCC癌旁组织中的表达高于另外4种组织,具有显著性差异(P<0.05),且HCC中SMP-30的表达与肿瘤大小和病理分级无关。结论用MBP-SMP-30融合蛋白制备的多克隆抗体可成功检测出人肝细胞中的SMP-30。SMP-30与肝疾病的发生发展有关,其高表达可能是HCC的早期性、保护性事件。

衰老标记蛋白-30在人晶状体上皮细胞中的表达及意义

目的研究人晶状体上皮细胞中衰老标记蛋白-30(senescence marker protein-30,SMP-30)的表达,探讨其在白内障发生发展中的作用及临床意义。方法制备57例人晶状体前囊膜、4例正常人肝组织和2例正常人肾组织的石蜡切片。采用免疫组织化学SP法检测SMP-30在晶状体上皮细胞中的表达,并结合临床资料进行统计分析。结果实验发现SMP-30在白内障晶状体上皮细胞的表达较透明晶状体弱(P<0.05),其在晶状体上皮细胞的表达与性别、年龄未见相关性。结论SMP-30在晶状体上皮细胞表达的减少可能导致白内障的发生。

衰老标记蛋白-30和β-半乳糖苷酶的表达与晶状体上皮细胞凋亡相关性研究

目的探讨衰老标记蛋白-30和与衰老相关的β-半乳糖苷酶在老年性白内障患者的晶状体上皮细胞凋亡表达的相关性。方法 248例年龄相关性白内障患者(其中126例皮质性白内障154只眼,122例核性白内障有142眼),对每个患者进行晶状体前囊中心部的环形撕囊。TUNEL法观察晶状体上皮细胞凋亡,免疫组织化学染色和实时PCR检测蛋白与mRNA的表达水平。分析衰老标记蛋白-30和β-半乳糖苷酶蛋白表达水平与晶状体上皮细胞凋亡的关系。结果衰老标记蛋白-30在晶状体前囊中心部比晶状体前囊周边有较低的蛋白表达水平,而衰老相关的β-半乳糖苷酶的表达在中央部分明显高于周边部分。与核性白内障患者相比,皮质性白内障患者的衰老标志物蛋白-30和mRNA的表达水平降低了,而衰老相关的β-半乳糖苷酶的表达升高了。TUNEL检测结果显示,两组晶状体上皮细胞的前囊中心部凋亡率明显高于周围部分。在晶状体前囊区中心或周围,皮质性白内障比核性白内障晶状体上皮细胞凋亡明显增高。结论在核性白内障和皮质性白内障,衰老标记蛋白-30和衰老相关的β-半乳糖苷酶的表达均与晶状体上皮细胞的凋亡有相关性。

衰老标记蛋白-30及其研究进展

衰老标记蛋白-30(SMP30)也称为regucalcin是1992年发现的一种新型钙结合蛋白质,在细胞内信 号转导途径中起调节作用,其含量随年龄增加而减少。就其蛋白质生物学特性及其功能进行了综述。

衰老标记蛋白30—一种具有应用前景的新型蛋白

衰老标记蛋白30 (SMP -30) 是近年来发现的一种新型钙结合蛋白, 最初从鼠肝可溶蛋白中分离提出, 具有随年龄增加而含量减少的特性以及抗细胞凋亡的作用, 并且极有可能是一种新型的肝癌相关抗原。本文从该蛋白的结构、表达、可能的生物功能和机制、与肿瘤的相关特性作一综述。

肝癌相关抗原SMP-30羧基端基因的构建、表达及血清学分析

目的 :用基因工程的方法构建、表达和纯化肝癌肿瘤相关抗原衰老标记蛋白 30 (SMP 30 ) ,检测肝癌、肝硬化及其它肿瘤病人血清中相应抗体的阳性率。方法 :PCR方法扩增经SEREX技术筛选出的人肝细胞癌相关抗原SMP 30羧基末端16 5个氨基酸的DNA序列 ,构建其表达质粒 ,经原核表达和亲和层析纯化获得目的蛋白 ,经N 末端氨基酸序列测序证实为SMP 30蛋白。采用ELISA方法检测肝癌、肝硬化与其他肿瘤患者血清中抗SMP 30抗体的阳性率。结果 :以 6 3例正常人血清为对照 ,肝癌、慢性肝炎、肝硬化和鼻咽癌血清中SMP 30抗体阳性率分别为 39 7% (2 3 5 8)、2 1 9% (7 32 )、6 4 7% (11 17)和2 1 6 % (5 2 3)。 7例肺癌和 2 5例胃肠疾病中无一例阳性。Westernblot亦显示部分肝癌患者血清存在有SMP 30蛋白抗体。结论 :SMP 30蛋白抗体检测可望作为肝癌和肝硬化等疾病的血清学诊断指标之一。