芦荟提取物对衰老模型鼠抗自由基氧化损伤DNA作用的实验研究

目的 :探讨芦荟延缓衰老的疗效及其可能机理。方法 :利用小鼠吸入臭氧 (O3)制造衰老模型 ,并在其造模过程中以不同浓度的芦荟提取液实施治疗 ,9周后检测小鼠全血超氧化物歧化酶 (SOD)的活性 ,肝组织过氧化脂质代谢产物丙二醛 (MDA)的含量 ,并用彗星实验 (CometAssay)检测肝、脾组织细胞DNA氧化损伤的程度。结果 :与模型组相比 ,经芦荟治疗后 ,模型小鼠不仅全血SOD活性及肝组织MDA含量两项指标明显改善并趋向正常 ,而且肝、脾细胞DNA拖尾尾长减短 ,有效地减轻了肝、脾细胞DNA的损伤程度 ,作用较复方丹参片对照组全面。结论 :芦荟能提高机体抗自由基氧化损伤的能力 ,减轻肝、脾细胞DNA损伤程度 。

维生素E对D-半乳糖亚急性中毒拟衰老模型鼠氧自由基及相关生化指标的影响

目的研究维生素E(VE)对D-半乳糖(D-gal)亚急性中毒拟衰老模型鼠自由基产生及相关生化指标的影响。方法昆明小鼠颈背部皮下注射D-gal40mg·kg-1.d-1制备D-gal亚急性中毒导致的衰老鼠模型。将模型鼠分为模型组和高、中、低剂量VE组(分别灌胃60、30、15mg·kg-1.d-1VE),10w后杀鼠。采用硫代巴比妥酸(TBA)法检测血清中丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测血清中总超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用ISP半自动生化分析仪检测血清中血糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量。结果模型鼠血清中MDA含量、Glu、TC、TG含量显著高于正常对照组,SOD含量显著低于正常对照组(均P<0.05),高、中、低剂量VE组血清MDA含量显著低于模型对照组,总SOD含量显著高于模型对照组(均P<0.05)。高、中、低剂量VE组小鼠血清Glu、TC、TG含量与模型对照组无显著差异。结论VE可以对衰老鼠的氧自由基损伤发挥保护作用,为临床将VE作为一种抗衰老药物应用提供了进一步的试验依据。

维生素E对D-半乳糖亚急性中毒拟衰老模型鼠自由基及相关生化指标的影响

目的研究维生素E(VE)对D-半乳糖(D-gal)亚急性中毒拟衰老模型鼠自由基产生及相关生化指标的影响。方法昆明小鼠颈背部皮下注射D-gal40mg.kg-1.d-1制备D-gal亚急性中毒导致的衰老鼠模型。将模型鼠分为4组,除对照组外,其他3组模型鼠分别灌胃以60、30、15mg.kg-1.d-1VE,10w后杀鼠。摘眼球取血,室温离心,分离血清,采用硫代巴比妥酸(TBA)法检测血清中丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测血清中总超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用ISP半自动生化分析仪检测血清中血糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量。结果模型鼠血清中MDA含量显著高于正常对照组(P<0.05),VE喂饲的3个实验组小鼠血清MDA含量显著低于对照组(P<0.05)。模型鼠血清总SOD含量显著低于正常对照组(P<0.05),VE喂饲的3个实验组小鼠血清总SOD含量显著高于对照组(P<0.05)。模型鼠血清中的Glu、TC、TG含量显著高于正常对照组(P<0.05)。VE喂饲的3个实验组小鼠血清中Glu、TC、TG与对照组无显著差异。结论VE可以对衰老鼠的氧自由基损伤发挥保护作用,为临床将VE作为一种抗衰老药物应用提供了进一步的试验依据。

D-半乳糖所致衰老模型鼠的免疫功能变化

自我国的科学家首次提出D-半乳糖致衰老模型后，由于此方法造模时间短，成模容易，重复性好等特点，目前此法已得到了广泛的应用和大量的文献报道。该模型引起的机体多组织、多器官、多水平损伤符合自然衰老规律，表现出与自然衰老相类似的生理改变。

丹皮酚、绿原酸和没食子酸复配物对D-半乳糖致小鼠衰老模型的抗氧化作用研究

目的研究丹皮酚、绿原酸和没食子酸复配物对衰老模型小鼠的抵抗作用。方法采用小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖的方法构建小鼠衰老模型;模型小鼠随机分为模型组、丹皮酚、绿原酸和没食子酸复配物高(200 mg·kg^(-1))、中(100 mg·kg^(-1))、低(50 mg·kg^(-1))剂量组,每天按规定给药剂量分别灌胃,维生素C对照组每天按100 mg·kg^(-1)的给药剂量进行灌胃。连续给药4 w后,观察并记录小鼠体重和形态方面的变化,测定小鼠胸腺和脾脏指数,检测小鼠血清及肝脏组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力三个指标。结果与空白组相比较,模型组小鼠的体质量和脏器指数明显下降,血清和各脏器组织中的SOD、GSH-Px活力均有所降低,MDA含量有所升高,且大部分差异显著(P<0.05),说明衰老小鼠模型构建成功。与模型组相比,复配物各剂量组小鼠体质量和脏器指数均有所升高,血清和脏器中的SOD、GSH-Px活力均有不同程度的回升,MDA含量显著下降(P<0.05)。其中复配物高剂量组大鼠血清中SOD、GSH-Px和MDA含量分别为(118.78±6.87)U·mL^(-1)、(111.27±10.36)U·mL^(-1)和(3.86±2.13)nmol·mL^(-1),大鼠肝脏中SOD、GSH-Px和MDA含量分别为(126.73±11.48)U·mg^(-1)、(105.56±11.57)U·mg^(-1)和(7.95±0.99)nmol·mg^(-1),与模型组相比具有显著差异(P<0.05)。结论丹皮酚、绿原酸和没食子酸复配物能有效提高衰老小鼠的抗氧化能力,高剂量组作用效果最为显著。其抗氧化机制可能与抑制氧化酶的活性,增强机体抗氧化酶的活性有关。

GSH/GPx4介导的铁死亡通路在有氧运动预防自然衰老小鼠模型肝过氧化损伤中的作用

目的阐明谷胱甘肽(glutathione,GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPx4)介导的铁死亡(ferroptosis)通路在有氧运动预防小鼠增龄性肝细胞过氧化损伤中的作用机制,为运动改善肝衰老和糖脂代谢紊乱提供新的作用靶点。方法52周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠20只,随机分为老年对照组(EC组)和老年运动组(EE组),每组10只。16周递增负荷中等强度运动(1~2周14 m/min,3~4周15 m/min,5~10周16 m/min,11~16周17 m/min,每天60 min,坡度为0°)。升主动脉灌流后,取肝外侧叶制作HE切片和超薄透射电镜切片。ELISA检测肝线粒体8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2 deoxyguanosine,8-OHdG)、白介素6(interleukin-6,IL-6)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)。比色法测定肝糖原、甘油三酯(triglyceride,TG)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、肝非血红素铁(non-heme iron)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)、GSH。Western Blot检测肝GPx4、醌氧化还原酶1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NAPDH oxidase 2,NOX2)、溶质载体家族7成员11(solute carrier protein 7 family member 11,SLC7A11)表达量。结果(1)有氧运动可有效延缓老年小鼠随年龄增长的肝细胞过氧化损伤,保持肝细胞线粒体正常结构和糖原储备量。(2)与EC组相比,EE组小鼠肝GSH和NADPH显著增加(P<0.01)。(3)与EC组相比,EE组小鼠肝线粒体8-OHdG和4-HNE、MDA、铁含量和血清炎症因子IL-6含量显著下降(P<0.01)。(4)运动增加肝GPx4、NQO1、SLC7A11表达量(P<0.01),降低NOX2表达量(P<0.01)。结论有氧运动通过SLC7A11增加GSH合成,为GPx4提供充足的反应底物,激活GSH/GPx4通路,抑制铁死亡进程,改善增龄引发的肝细胞过氧化损伤,维持肝细胞正常结构与生理功能。

葡萄籽原花青素提取物对衰老模型小鼠抗氧化作用

目的:研究葡萄籽原花青素提取物对衰老小鼠心脏、肝、脑和血清抗氧化功能的影响。方法:采用纤维素酶辅助浸提葡萄籽原花青素,经大孔树脂吸附纯化后灌胃由D-半乳糖连续皮下注射诱导的亚急性衰老模型小鼠,以各组小鼠心脏、肝、脑和血清中的总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量为指标,全面评价葡萄籽原花青素提取物在小鼠体内的抗氧化能力。结果:与空白对照组相比,模型对照组小鼠心脏、肝、脑和血清中T-AOC、SOD、GSH-Px活力均有不同程度的降低,MDA含量有不同程度的升高,其大多变化差异显著,说明小鼠衰老模型构建成功。与模型对照组相比,葡萄籽原花青素提取物各剂量组能增强模型小鼠心脏、肝、脑和血清中T-AOC、SOD、GSH-Px活力,同时降低MDA值,其中大多变化差异显著,而血清中各值变化差异极显著。结论:葡萄籽原花青素提取物能够显著增强亚急性衰老小鼠的抗氧化能力,具有延缓衰老的作用。

金银花叶黄酮对衰老模型小鼠的体内抗氧化作用

目的:研究金银花叶黄酮对衰老小鼠体内抗氧化系统的调节作用。方法:采用颈背部皮下注射D-半乳糖法构建衰老小鼠模型,用不同剂量(低、中、高剂量分别为50、100、200 mg/(kg·d))的金银花叶黄酮灌胃小鼠,观察小鼠体质量变化,并计算肝脏、脑、肾脏、脾脏及心脏指数,测定小鼠血清及肝脏、脑、肾脏及心脏组织中总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力及丙二醛(malondialdehyde,MAD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量。结果:与空白组相比,模型组小鼠体质量和脏器指数显著下降,血清和各脏器组织中的T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT活力及GSH含量均有所降低,MDA含量升高,且大部分差异显著(P<0.05),说明衰老小鼠模型构建成功。与模型组相比,金银花叶黄酮各剂量组小鼠体质量和脏器指数均有所升高,血清和脏器中的T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT活力及GSH含量均有不同程度的回升,MDA含量降低,高剂量组效果最显著。结论:金银花叶黄酮能有效提高衰老小鼠的抗氧化能力,其抗氧化机制可能与提高机体抗氧化酶活性和还原性保护物质含量、降低脂质过氧化物含量有关。

昆仑雪菊黄酮对衰老模型小鼠脑及脏器指数的影响

采用D-半乳糖颈背部皮下注射小鼠建立亚急性衰老小鼠模型,观察不同浓度的昆仑雪菊黄酮(100、200、400mg/kg)灌服小鼠后,对衰老模型小鼠脑及脏器指数的影响。结果表明,昆仑雪菊黄酮3个剂量组脑及脏器指数均高于衰老模型组,且都呈现明显的剂量依赖效应,其中3个剂量组的脾脏指数、高剂量组的脑指数和中、高剂量组的肾脏指数均极显著高于衰老模型组(P<0.01),3个剂量组的胸腺指数、中剂量组的脑指数和高剂量组的肝脏指数均显著高于衰老模型组(P<0.05)。此外,3个剂量组间的脾脏指数、肾脏指数有明显差异。结果提示,昆仑雪菊黄酮具有抗衰老、延缓动物脑及脏器萎缩与退化、促进机体代谢、提高机体免疫力作用。

松花粉对亚急性衰老模型大鼠抗衰老作用的实验研究

目的通过对亚急性衰老大鼠模型血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(T-AOC)的测定,观察大鼠精子数量、活动度和存活率的变化,从而探讨松花粉的抗衰老作用。方法D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老大鼠模型,采用生物化学方法检测了各实验组血清中SOD、MDA、GSH-Px和T-AOC的含量;观察了大鼠精子数量、活动度和存活率的变化。结果D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠模型组SOD活力、GSH-Px活力和T-AOC均明显下降,MDA含量明显上升,与正常对照组比较差异显著(P<0.01);而经松花粉给药后SOD活力、GSH-Px活力和T-AOC三者均有显著提高,MDA含量明显下降;松花粉可提高D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠精子的数量、活动度和存活率。结论松花粉可显著提高亚急性衰老大鼠抗氧自由基的能力,提高精子的数量、活动度和存活率,具有延缓衰老的作用。

虾青素对正常小鼠与衰老模型大鼠免疫指标的影响

虾青素是一种具有极强抗氧化和抗衰老活性的类胡萝卜素,在医药、食品和化妆品等方面有着广泛的应用价值.以小鼠和大鼠为研究对象,考察虾青素对生物体免疫性能的影响.通过对小鼠灌胃低(4mg/(kg·d))、中(20mg/(kg·d))、高剂量(100mg/(kg·d))的虾青素,考察实验组与对照组的免疫器官脏器指数、巨噬细胞吞噬功能和血清抗体水平.结果表明,各剂量组小鼠血清抗体水平均显著升高(p<0.01),中剂量组小鼠脾脏指数显著升高(p<0.05),中、高剂量组小鼠的胸腺指数和吞噬系数均显著升高(p<0.05).采用腹腔注射D-半乳糖的方式建立大鼠的致衰老模型,考察虾青素灌胃对其免疫器官脏器指数及其形态的影响.结果显示,衰老灌胃虾青素组与衰老对照组相比胸腺指数显著升高(p<0.01),同时D-半乳糖诱导致使的肝脏、胸腺和脾脏细胞损伤得到明显改善.由此可以看出,虾青素可提高非特异性免疫和体液免疫功能,该结果为虾青素免疫机理的进一步研究奠定了基础.

菟丝子醇提液对衰老模型小鼠肝线粒体保护作用的实验研究

目的探讨菟丝子醇提液对衰老模型小鼠肝脏线粒体的保护作用及机制。方法将纯系昆明种小鼠50只,随机分为青年组、衰老模型组、给药15d组、给药30d组和给药45d组。D-半乳糖制作衰老模型,经胃灌服菟丝子醇提液。采用比色分析法测定呼吸链复合体Ⅳ活性,PCR法检测线粒体DNA缺失,RT-PCR法检测COⅠmRNA的表达水平;同时观察不同给药天数对上述指标的影响。结果D-半乳糖可诱导小鼠肝线粒体呼吸链复合体Ⅳ活性降低(P<0.01),肝mtDNA的缺失增加,呼吸链复合体ⅣCOⅠ亚基mRNA的表达水平增高。菟丝子醇提液可提高呼吸链复合体Ⅳ活性,减少mtDNA缺失,降低呼吸链复合体ⅣCOⅠ亚基mRNA的表达。结论菟丝子醇提液可提高衰老模型小鼠呼吸链复合体Ⅳ活性,降低COⅠ亚基mRNA表达,减少mtDNA缺失,而发挥保护肝脏线粒体的作用,并随给药时间的延长作用更显著。

茜草多糖对衰老模型小鼠心肌线粒体酶活性影响的实验研究

目的探讨茜草多糖对衰老小鼠心肌线粒体酶活性的影响。方法通过建立D半乳糖人工致衰小鼠模型,测定心肌线粒体超氧化物歧化酶(SOD),Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶的活性。结果衰老模型组SOD、Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶的活性均明显降低;茜草多糖可升高衰老模型组SOD、Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶活性(P<0.05,P<0.01)。结论茜草多糖对衰老模型小鼠心肌线粒体有保护作用。

山茱萸多糖对衰老模型大鼠学习记忆能力影响的研究

目的以山茱萸多糖对D-半乳糖致衰大鼠抗脑老化及学习记忆能力的影响,探讨其在改善脑老化方面的作用及可能机制。方法采用D-半乳糖诱导的衰老模型Wistar大鼠为实验对象,经胃灌服不同剂量山茱萸多糖(0.14、0.28 g/kg),连续灌服30 d。测定各组大鼠学习记忆能力、脑组织丙二醛(MDA)、脂褐素(LF)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和单胺氧化酶B(MAO-B)活性,同时观察不同剂量山茱萸多糖对衰老模型大鼠上述指标的影响。结果衰老模型组MDA、LF含量、MAO-B活性较青年组明显增加(P<0.01),而学习记忆能力、SOD活性明显低于青年组(P<0.01);不同剂量山茱萸多糖组学习记忆能力、SOD活性明显高于衰老模型组(P<0.05,P<0.01),而MDA、LF含量、MAO-B活性显著低于衰老模型组(P<0.05,P<0.01),以山茱萸多糖大剂量组效果更显著,山茱萸多糖大剂量组作用优于小剂量组。结论山茱萸多糖可通过提高机体抗氧化能力、抑制脂质过氧化、提高老化相关酶活性发挥抗脑老化作用,提高大鼠学习记忆能力。

菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响

目的研究菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响,探讨菟丝子延缓衰老作用的机制。方法实验以50只Wistar大鼠为研究对象,采用D-半乳糖法制作衰老模型,采用经胃灌服法按照0.8 g.kg-1.d-1给药,采用半定量RT-PCR法测定大鼠肝组织p16和cyclinD1 mRNA的表达,免疫组化SABC法检测p16和cyclinD1蛋白的表达,并观察菟丝子醇提液对其影响。结果衰老模型大鼠p16 mR-NA及蛋白表达较青年组明显增高(P<0.01),而cyclinD1mRNA及蛋白表达降低(P<0.05)。菟丝子醇提液可降低p16基因表达(P<0.01),使cy-clinD1基因表达增强(P<0.05),并呈现时间渐进性改变。结论菟丝子醇提液通过影响细胞调控因子p16、cyclinD1表达延缓肝细胞的衰老。

何首乌苷对亚急性衰老模型小鼠学习记忆能力及海马内ChAT和AChE表达的影响

目的研究何首乌苷(Polygonum multiflorum Thunb.glycoside)对亚急性衰老模型小鼠学习记忆能力及海马组织内胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)表达的影响。方法采用AlCl_3(10mg·kg^(-1))灌胃及D-半乳糖(120 mg·kg^(-1))颈部皮下注射,持续处理60 d井通过跳台逃避行为学实验法筛选出亚急性衰老KM小鼠模型;将成功构建的衰老模型小鼠,雌雄各半,随机分为5组,包括:衰老模型组、雌二醇阳性对照组(10 mg·kg^(-1))和何首乌苷高、中、低剂量组(剂量分别为:80mg·kg^(-1)、40 mg·kg^(-1)、20 mg·kg^(-1));并选择健康小鼠作为正常对照组。治疗组小鼠在造模后15 d起分别颈部皮下注射高、中、低剂量的何首乌苷和雌二醇,持续给药15 d;衰老模型组和正常对照组小鼠分别给予等体积生理盐水。利用跳台逃避行为学实验法判断各组小鼠的学习记忆能力的变化和差异;利用Western Blot法检测小鼠海马体组织细胞内胆碱酯酶系统ChAT和AChE蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,各实验组小鼠学习记忆能力显著下降,小鼠跳台回避错误次数显著增加(P<0.05);与衰老模型组比较,不同剂量何首乌苷组与雌二醇阳性对照组小鼠学习记忆能力明显改善,小鼠跳台回避错误次数明显减少(P<0.05或P<0.001),而不同剂量何首乌苷组与雌二醇阳性对照组小鼠跳台回避错误次数相近(P>0.05);与衰老模型组比较,不同剂量何首乌苷组与雌二醇阳性对照组小鼠海马体组织细胞内的ChAT表达量升高而AChE表达量下降,差异有统计学意义或高度统计学意义(P<0.05或P<0.001)。结论何首乌苷能有效改善亚急性衰老模型小鼠的学习记忆能力障碍,其机制与其使海马内组织细胞的ChAT表达升高和AChE表达降低,从而增加乙酰胆碱的含量以改善胆碱能系统损害有关。

水解珍珠粉对D-半乳糖或臭氧所致衰老模型小鼠的抗氧化作用

小鼠sc D-半乳糖40mg/kg·d×40d或在臭氧(0.53±0.12mg/m^3)环境中动式染毒8h/d×15d造成亚急性衰老模型。与此同时ig水解珍珠粉溶液50、100或200mg/kg·d。结果表明,与D-半乳糖组相比,水解珍珠粉100、200mg/kg可显著提高全血GSH-Px的活性,200mg/kg可显著降低血清MDA的含量,100、200mg/kg可以显著降低心脏脂褐素的含量。3个剂量均可显著降低脑脂褐素的含量。与臭氧组相比,珍珠粉3个剂量组均可显著提高全血GSH-Px的活性,100、200mg/kg可显著降低血清MDA的含量,100mg/kg组能显著降低肝脂褐素含量,心脑脂褐素含量的变化不显著。