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人参、三七、川芎提取物对血管平滑肌细胞衰老相关β半乳糖苷酶及p16-cyclinD/CDK-Rb通路的影响 被引量:17
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作者 陶丽丽 雷燕 《中西医结合学报》 CAS 2012年第1期76-84,共9页
目的:观察人参、三七、川芎提取物延缓自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)衰老的作用及其可能的细胞周期调控机制。方法:取大鼠胸主动脉用于分离VMSC,采用原代细... 目的:观察人参、三七、川芎提取物延缓自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)衰老的作用及其可能的细胞周期调控机制。方法:取大鼠胸主动脉用于分离VMSC,采用原代细胞培养的方法建立SHR大鼠VMSC模型,实验分为Wistar-Kyoto(WKY)大鼠对照组、SHR模型组、缬沙坦组、中药低剂量组和中药高剂量组。采用衰老相关β半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色法观察细胞衰老情况,流式细胞仪分析细胞周期分布,逆转录聚合酶链式反应和蛋白质印迹法检测各组细胞p16、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase4,CDK4)和成视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma protein,Rb)的表达。结果:SA-β-gal染色显示,与WKY组比较,SHR组SA-β-gal阳性细胞数明显增多(P<0.01),人参、三七、川芎提取物可使SHR VSMC SA-β-gal阳性细胞数明显减少(P<0.01);流式细胞仪检测显示,与WKY组比较,SHR组VSMC在G1期明显减少,S期细胞明显增加,中药干预后SHR的VSMC G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少(P<0.05);实时荧光定量聚合酶链式反应检测显示,与WKY组比较,SHR组VSMC的p16和Rb mRNA表达量明显减少,cyclin D1和CDK4mRNA表达增加;人参、三七、川芎提取物干预后SHR VSMC p16和Rb mRNA表达量增加,cyclin D1和CDK4mRNA减少。蛋白质印迹法显示,与WKY组比较,SHR组VSMC的p16蛋白表达量明显减少,cyclin D1、CDK4和磷酸化Rb蛋白表达量明显增加(P<0.05);中药干预后SHR VSMC p16蛋白表达增加,cyclin D1、CDK4和磷酸化Rb蛋白表达量减少(P<0.05)。结论:人参、三七、川芎提取物通过改变p16-cyclin D/CDK-Rb通路因子的表达而发挥延缓SHR VSMC衰老的作用。 展开更多
关键词 高血压 血管老化 植物提取物 衰老相关β-乳糖 P16基因 细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白份数蛋白激4 视网膜母细胞瘤蛋白质
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苦参总黄酮对D-半乳糖致神经细胞衰老的改善作用及相关机制
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作者 马亚飞 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期917-921,共5页
目的探讨苦参总黄酮对D-半乳糖致神经细胞衰老的改善作用及相关机制。方法D-半乳糖处理PC12神经元细胞建立细胞衰老模型,分为模型组,10、20、40μg/ml苦参总黄酮组,同时设置空白对照组。检测各组细胞存活率、衰老细胞情况、凋亡率、细... 目的探讨苦参总黄酮对D-半乳糖致神经细胞衰老的改善作用及相关机制。方法D-半乳糖处理PC12神经元细胞建立细胞衰老模型,分为模型组,10、20、40μg/ml苦参总黄酮组,同时设置空白对照组。检测各组细胞存活率、衰老细胞情况、凋亡率、细胞周期分布情况;测定细胞中抗氧化指标:超氧化物歧化酶、丙二醛、乳酸脱氢酶浓度;Western印迹检测细胞中B淋巴细胞瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素(Cyt)-C、Bcl-2、人核因子E2相关因子(Nrf)2、血红素氧合酶1蛋白表达水平。结论模型组细胞存活率明显低于空白对照组,β-半乳糖苷酶阳性染色率、细胞凋亡率明显高于空白对照组(P<0.01);苦参总黄酮组细胞存活率明显高于模型组,β-半乳糖苷酶阳性染色率、细胞凋亡率明显低于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显(P<0.05)。各组G0/G1期、S期细胞比例差异有统计学意义(P<0.01);模型组G0/G1期细胞比例明显高于空白对照组,S期细胞比例明显低于空白对照组(P<0.01);苦参总黄酮组G0/G1期细胞比例明显低于模型组,S期细胞比例明显高于模型组(P<0.05)。模型组超氧化物歧化酶浓度明显低于空白对照组,丙二醛、乳酸脱氢酶浓度明显高于空白对照组(P<0.01);苦参总黄酮组超氧化物歧化酶浓度明显高于模型组,丙二醛、乳酸脱氢酶浓度明显低于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组Bax蛋白表达明显升高(P<0.01),Cyt-C、Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.01);苦参总黄酮组Bax蛋白表达水平明显低于模型组,Cyt-C、Bcl-2蛋白表达水平明显高于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组Nrf2、血红素氧合酶1蛋白表达明显升高(P<0.01);苦参总黄酮组Nrf2、血红素氧合酶1蛋白表达水平明显低于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论苦参总黄酮可改善D半乳糖诱导的神经细胞衰老,且呈剂量依赖性,可能与激活Nrf2抗氧化信号途径、抑制氧化应激反应、降低细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 苦参总黄酮 PC12神经元细胞 D-乳糖 衰老 氧化应激损伤 凋亡相关蛋白
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园艺作物果实β-半乳糖苷酶研究进展
3
作者 俞沁佩 孙鹂 +3 位作者 张淑文 俞浙萍 郑锡良 戚行江 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第9期2184-2192,共9页
β-半乳糖苷酶属于糖苷水解酶GH35家族,参与了植物不同生长阶段细胞壁的合成与修饰,尤其对肉质水果发育和成熟过程中多糖的裂解具有重要作用。文章概述了β-半乳糖苷酶的蛋白功能、不同亚型、亚细胞定位和活性规律,重点阐述了该基因家... β-半乳糖苷酶属于糖苷水解酶GH35家族,参与了植物不同生长阶段细胞壁的合成与修饰,尤其对肉质水果发育和成熟过程中多糖的裂解具有重要作用。文章概述了β-半乳糖苷酶的蛋白功能、不同亚型、亚细胞定位和活性规律,重点阐述了该基因家族在园艺作物果实质地变化中的作用及相关研究进展。 展开更多
关键词 Β-乳糖 园艺作物 果实软化 基因功能
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适冷β-半乳糖苷酶及其在食品工业中的应用
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作者 周玲 龚金炎 +3 位作者 何光华 肖功年 许韩山 李玲 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期314-320,共7页
β-半乳糖苷酶,又称乳糖酶,广泛存在于细菌、真菌、酵母菌等微生物中,主要功能是乳糖水解和合成低聚半乳糖。利用β-半乳糖苷酶生产低乳糖牛奶等乳制品成为解决乳糖不耐受问题最有效的途径,然而常用的商业化β-半乳糖苷酶的最适反应温... β-半乳糖苷酶,又称乳糖酶,广泛存在于细菌、真菌、酵母菌等微生物中,主要功能是乳糖水解和合成低聚半乳糖。利用β-半乳糖苷酶生产低乳糖牛奶等乳制品成为解决乳糖不耐受问题最有效的途径,然而常用的商业化β-半乳糖苷酶的最适反应温度大多较高,对pH的要求比较严格,存在生产成本较高、消耗能量高等问题。适冷β-半乳糖苷酶在低温下也具有较高的酶活性,广泛应用于食品行业中,尤其在乳品工业。在低温下水解乳糖,生产低乳糖或无乳糖乳制品,供乳糖不耐受者食用,可降低成本、节约能源,具有重要意义。该文综述了β-半乳糖苷酶的微生物来源、特性、催化特性的研究现状,对适冷β-半乳糖苷酶的来源、特性、耐冷机制及工业化应用进行了系统阐述,并对其前景进行了展望。 展开更多
关键词 Β-乳糖 适冷β-乳糖 耐冷机制
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普通烟草β-半乳糖苷酶基因(NtBGAL)的生信分析及其在不同组织及原核诱导的表达
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作者 曹领改 刘杰 +2 位作者 张洁 张盼 余世洲 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期1220-1227,共8页
【目的】探明普通烟草β-半乳糖苷酶基因NtBGAL的表达模式与蛋白特征,为后期创制烟草多用途利用的底盘材料提供依据。【方法】通过比对普通烟草K326基因序列与本氏烟草NbBGAL1基因的同源性,以K326的cDNA为模板经PCR技术克隆获得NtBGAL基... 【目的】探明普通烟草β-半乳糖苷酶基因NtBGAL的表达模式与蛋白特征,为后期创制烟草多用途利用的底盘材料提供依据。【方法】通过比对普通烟草K326基因序列与本氏烟草NbBGAL1基因的同源性,以K326的cDNA为模板经PCR技术克隆获得NtBGAL基因,随后利用生信工具软件分析其基因结构及蛋白理化性质,并采用qRT-PCR检测该基因在烟草不同组织部位(根、茎、叶和花)的表达模式,最后开展原核诱导表达、蛋白纯化及蛋白表征研究。【结果】克隆获得烟草NtBGAL基因,其与本氏烟草NbBGAL1基因同源性最高,二者具有相同的结构域(Motif);该基因定位于9号染色体上,含有18个内含子,mRNA长度为6649 bp,CDS长度为2541 bp,编码846个氨基酸,翻译的β-半乳糖苷酶属于GH35家族,NtBGAL蛋白的分子量为92.44 kDa,理论等电点(pI)为6.8,GRAVY为-0.222,定位于细胞壁。该基因在普通烟草不同组织部位的表达量为花>叶>茎>根,差异显著。在37℃下进行原核诱导,NtBGAL蛋白有明显表达;采用包涵体纯化方法获得较高纯度的NtBGAL蛋白。NtBGAL蛋白酶促反应最适温度为30~40℃,最适pH为4.0~6.5,Mn^(2+)浓度为0.05~0.15 mmol/L时对NtBGAL酶活性有增强作用。【结论】研究明确NtBGAL基因的组织表达模式及蛋白表征,为进一步通过改造NtBGAL基因,利用普通烟草生产人源化糖蛋白奠定基础。 展开更多
关键词 烟草 NtBGAL基因 Β-乳糖 生信分析 原核诱导 蛋白表征
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骨关节炎软骨中衰老相关β-半乳糖苷酶和c-Fos蛋白的表达 被引量:5
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作者 李良军 雷光华 +4 位作者 涂敏 程超 陈霞光 高曙光 曾凯斌 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期196-200,共5页
背景:文献在对软骨细胞衰老的研究中,常以衰老相关β-半乳糖苷酶的表达作为其细胞老化的一个指标,而c-Fos在骨关节炎软骨中表达情况罕见报道。目的:观察β-半乳糖苷酶、c-Fos蛋白在正常关节软骨和骨关节炎不同退变程度关节软骨中表达水... 背景:文献在对软骨细胞衰老的研究中,常以衰老相关β-半乳糖苷酶的表达作为其细胞老化的一个指标,而c-Fos在骨关节炎软骨中表达情况罕见报道。目的:观察β-半乳糖苷酶、c-Fos蛋白在正常关节软骨和骨关节炎不同退变程度关节软骨中表达水平的差异。方法:选取正常关节软骨标本10个,骨关节炎软骨标本26个,根据大体观察凿取正常和骨关节炎不同退变严重程度软骨块50个,再根据关节软骨改良Mankin病理评分法分为正常关节软骨组、轻度退变组、中度退变组、重度退变组。采用免疫组织化学SABC法,计算各组标本中软骨细胞β-半乳糖苷酶、c-Fos蛋白染色阳性细胞率,比较各组中二者阳性细胞率的差异性并分析其与关节软骨不同退变程度之间的相关性。结果与结论:随着衰老软骨细胞阳性率逐渐增加,软骨退变程度逐渐加重,提示软骨细胞衰老与骨关节炎病程进展有关,软骨细胞衰老是骨关节炎可能的发病机制之一。c-Fos蛋白与骨关节炎软骨退变严重程度和软骨细胞衰老均无直接相关性,但可能在软骨退变早中期促进软骨细胞代偿性分裂增殖活跃。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨细胞 衰老相关β-乳糖 C-FOS蛋白 原癌基因C-FOS
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衰老相关-β-半乳糖苷酶和P16在老年大鼠脾内的表达及意义 被引量:3
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作者 邢文英 金辉 丁一 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期486-488,共3页
目的:研究衰老相关-β-半乳糖苷酶和P16在老年大鼠脾内的表达及意义。方法:采用组织化学及SABC免疫组织化学检测成年及老年Wistar大鼠脾组织内衰老相关-β-半乳糖甘酶及P16蛋白的表达。结果:衰老相关-β-半乳糖苷酶阳性细胞主要分布于... 目的:研究衰老相关-β-半乳糖苷酶和P16在老年大鼠脾内的表达及意义。方法:采用组织化学及SABC免疫组织化学检测成年及老年Wistar大鼠脾组织内衰老相关-β-半乳糖甘酶及P16蛋白的表达。结果:衰老相关-β-半乳糖苷酶阳性细胞主要分布于脾内的边缘区及脾索,老年大鼠较成年大鼠阳性细胞数量显著增多。P16阳性细胞也主要分布于脾内的边缘区及脾索;与成年鼠相比,老年大鼠P16阳性细胞显著增多。结论:P16和衰老相关-β-半乳糖苷酶在大鼠脾内高表达,可能与脾的衰老相关。 展开更多
关键词 衰老相关-β-乳糖 P16 大鼠
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衰老相关β-半乳糖苷酶在老年大鼠肾脏组织中的变化及意义 被引量:3
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作者 陈俊香 卓莉 +5 位作者 马强 成梅初 李瑛 刘虹 彭佑铭 刘伏友 《医学临床研究》 CAS 2009年第11期2022-2025,共4页
【目的】研究大鼠肾脏组织随增龄衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)活性的变化规律,并探讨其与肾脏衰老的关系,以寻找可用于评判肾脏衰老的相关指标。【方法】留取3,12,24月龄Wistar大鼠肾脏(每组各6只)。采用PAS和Masson染色... 【目的】研究大鼠肾脏组织随增龄衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)活性的变化规律,并探讨其与肾脏衰老的关系,以寻找可用于评判肾脏衰老的相关指标。【方法】留取3,12,24月龄Wistar大鼠肾脏(每组各6只)。采用PAS和Masson染色观察肾组织病理变化;β-gal染色观察大鼠肾组织SA-β-Gal活性的变化。【结果】随增龄,老年大鼠肾组织出现肾小球肥大,节段性肾小球硬化,局灶性肾小管萎缩、间质纤维化和炎性细胞浸润;肾脏病理评分显示肾小球和小管间质病变评分随增龄逐渐增高,24月龄组评分值显著高于3月龄和12月龄组(P〈0.05)。大鼠肾组织SA-β-gal染色阳性面积百分比随增龄逐渐升高,24月龄组阳性百分比显著高于3月和12月龄组(P〈0.05),并与同月龄组肾脏病理评分(肾小球和肾小管间质)呈正相关(r=0.585和0.612,P〈0.05)。【结论】随增龄大鼠肾组织SA-β-Gal表达逐渐增强,可能作为大鼠肾脏衰老的一项检测指标。 展开更多
关键词 衰老 β半乳糖 大鼠
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衰老标记蛋白-30和β-半乳糖苷酶的表达与晶状体上皮细胞凋亡相关性研究 被引量:3
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作者 周丹 刘平 +1 位作者 赵德海 隋春杰 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2017年第5期422-426,共5页
目的探讨衰老标记蛋白-30和与衰老相关的β-半乳糖苷酶在老年性白内障患者的晶状体上皮细胞凋亡表达的相关性。方法 248例年龄相关性白内障患者(其中126例皮质性白内障154只眼,122例核性白内障有142眼),对每个患者进行晶状体前囊中心部... 目的探讨衰老标记蛋白-30和与衰老相关的β-半乳糖苷酶在老年性白内障患者的晶状体上皮细胞凋亡表达的相关性。方法 248例年龄相关性白内障患者(其中126例皮质性白内障154只眼,122例核性白内障有142眼),对每个患者进行晶状体前囊中心部的环形撕囊。TUNEL法观察晶状体上皮细胞凋亡,免疫组织化学染色和实时PCR检测蛋白与mRNA的表达水平。分析衰老标记蛋白-30和β-半乳糖苷酶蛋白表达水平与晶状体上皮细胞凋亡的关系。结果衰老标记蛋白-30在晶状体前囊中心部比晶状体前囊周边有较低的蛋白表达水平,而衰老相关的β-半乳糖苷酶的表达在中央部分明显高于周边部分。与核性白内障患者相比,皮质性白内障患者的衰老标志物蛋白-30和mRNA的表达水平降低了,而衰老相关的β-半乳糖苷酶的表达升高了。TUNEL检测结果显示,两组晶状体上皮细胞的前囊中心部凋亡率明显高于周围部分。在晶状体前囊区中心或周围,皮质性白内障比核性白内障晶状体上皮细胞凋亡明显增高。结论在核性白内障和皮质性白内障,衰老标记蛋白-30和衰老相关的β-半乳糖苷酶的表达均与晶状体上皮细胞的凋亡有相关性。 展开更多
关键词 衰老标记蛋白-30 Β-乳糖 凋亡 上皮细胞
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不同类型标本的衰老相关β-半乳糖苷酶染色方法 被引量:1
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作者 张静 丁一 +1 位作者 史学义 邢文英 《河南医科大学学报》 2000年第4期334-335,共2页
目的 :研究衰老相关 β 半乳糖苷酶 (SA β Gal)组化染色在不同类型组织切片中的应用。方法 :比较血涂片、冰冻切片及石蜡切片在不同条件下SA β Gal的显色效果。结果与结论 :冰冻切片结果良好 ;石蜡切片经抗原修复后 ,结果不及未... 目的 :研究衰老相关 β 半乳糖苷酶 (SA β Gal)组化染色在不同类型组织切片中的应用。方法 :比较血涂片、冰冻切片及石蜡切片在不同条件下SA β Gal的显色效果。结果与结论 :冰冻切片结果良好 ;石蜡切片经抗原修复后 ,结果不及未经抗原修复者 ;血涂片以 40g/L多聚甲醛固定 45min者效果最佳。SA β Gal可用于不同类型的组织标本。 展开更多
关键词 衰老 Β-乳糖 组织化学 染色
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低剂量率β射线照射后肿瘤细胞表达衰老相关性β-半乳糖苷酶
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作者 丁为民 田嘉禾 +3 位作者 张锦明 冯惠茹 何义杰 邵明哲 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期51-55,共5页
用32P放射性贴片照射HeLa细胞,细胞化学染色和生长曲线校正相结合检测照射后表达衰老相关性β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)的细胞及其数量变化趋势.结果表明,照射后,部分肿瘤细胞可以逆转进入表达SA-β-Gal的死亡相M1或M2.由照射诱发的染色... 用32P放射性贴片照射HeLa细胞,细胞化学染色和生长曲线校正相结合检测照射后表达衰老相关性β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)的细胞及其数量变化趋势.结果表明,照射后,部分肿瘤细胞可以逆转进入表达SA-β-Gal的死亡相M1或M2.由照射诱发的染色阳性细胞的绝对数量在观察时间内持续增长,并且,在一定剂量率范围内(7.5-60cGy/h)的等剂量照射后,低剂量率β射线可以诱发更多的SA-β-Gal阳性细胞.此外,诱发衰老是核素内照射治疗肿瘤中存在的远期治疗效应的可能机制. 展开更多
关键词 低剂量率 Β射线照射 放射治疗 肿瘤治疗 细胞衰老 Β-乳糖 HELA细胞 贴壁细胞生长
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雄激素对雄性大鼠心脏衰老相关的β-半乳糖苷酶的影响
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作者 王艳妮 谈世进 《中华老年多器官疾病杂志》 2012年第1期54-57,共4页
目的 观察补充外源性睾酮及给予雄激素受体阻断剂后对衰老相关p-半乳糖苷酶( SA-β-Gal)的影响,探讨雄激素与心脏衰老的关系.方法 雄性Wistar大鼠40只随机分为去势组(10只)、补充睾酮组(去势+生理剂量睾酮组,10只)、氟他胺组(... 目的 观察补充外源性睾酮及给予雄激素受体阻断剂后对衰老相关p-半乳糖苷酶( SA-β-Gal)的影响,探讨雄激素与心脏衰老的关系.方法 雄性Wistar大鼠40只随机分为去势组(10只)、补充睾酮组(去势+生理剂量睾酮组,10只)、氟他胺组(去势+生理剂量睾酮+氟他胺组,10只)、假手术组(10只).干预8周后测定各组血浆睾酮浓度,取心肌组织用HE染色观察心肌组织学变化;组织化学染色观察心肌组织细胞SA-β-Gal的活性.结果 较假手术组睾酮浓度,氟他胺组升高近3倍(P<0.01);与假手术组比较,去势组SA-p-Gal活性明显增强[(2.0±0.9)vs(1.2±0.7),P<0.01];与去势组比较,生理剂量补充睾酮组SA-β-Gal活性(0.9±0.8)明显减弱(P<0.01);与单纯补充生理剂量睾酮组比较,氟他胺组SA- β-Gal活性(2.1±0.8)反而增强(P<0.01);补充生理剂量睾酮组与假手术组SA-β-Gal的活性相比差异无统计学意义(P=0.309).结论 雄激素缺乏可能影响雄性大鼠心肌组织中SA-β-Gal的活性,提示心脏老化可能与雄激素水平相关. 展开更多
关键词 雄激素 雄激素拮抗药 心肌 衰老 Β-乳糖
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不同年龄大鼠VSMCs培养及衰老相关β-半乳糖苷酶的表达
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作者 莫显刚 罗兴林 严斌 《泸州医学院学报》 2009年第2期112-115,共4页
目的:培养出不同年龄组SD大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs),探讨VSMCs复制衰老过程。方法:取出主动脉,0.2%Ⅱ型胶原酶溶液消化分离细胞,培养,按比例1:3传代。免疫细胞化学鉴定平滑肌细胞α-actin。制备老年组、年轻组的第2、6、11代细胞爬片,... 目的:培养出不同年龄组SD大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs),探讨VSMCs复制衰老过程。方法:取出主动脉,0.2%Ⅱ型胶原酶溶液消化分离细胞,培养,按比例1:3传代。免疫细胞化学鉴定平滑肌细胞α-actin。制备老年组、年轻组的第2、6、11代细胞爬片,用SA-β-gal工作液染色,显微镜下计数蓝染细胞阳性,计算衰老细胞率。结果:免疫细胞化学染色显示细胞纯度在95%以上。细胞衰老β-半乳糖苷酶染色显示随代龄增加,衰老细胞数量增加(P<0.05);第6、11代龄,老年组衰老细胞率较年轻组高。结论:1.单纯Ⅱ型胶原酶消化法可以成功培养出不同年龄组大鼠主动脉VSMCs。2.培养的SD大鼠VSMCs表现出复制衰老过程,这可能为探讨细胞衰老及其与年龄相关的疾病机制提供新的视角。 展开更多
关键词 衰老相关-β-乳糖 复制衰老 血管平滑肌细胞
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耐热性α-半乳糖苷酶突变体的筛选及酶学性质研究
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作者 马焕 张秀江 +5 位作者 胡虹 冯菲 解复红 向凌云 武艳芳 刁文涛 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第9期80-84,共5页
研究旨在改造株链球菌来源的α-半乳糖苷酶基因Gal_(2)7A,获得耐热性高的突变体。在常规PCR体系中加入不同水平的MnCl_(2),将基因克隆至载体pGAPZαA并成功构建表达酶产物的重组质粒pGAPZαA-Gal_(2)7A。将线性化的重组质粒电转至毕赤酵... 研究旨在改造株链球菌来源的α-半乳糖苷酶基因Gal_(2)7A,获得耐热性高的突变体。在常规PCR体系中加入不同水平的MnCl_(2),将基因克隆至载体pGAPZαA并成功构建表达酶产物的重组质粒pGAPZαA-Gal_(2)7A。将线性化的重组质粒电转至毕赤酵母GS115,在含有100 g/L博来霉素的YPDS平板上筛选耐热性提高的突变体,通过pNPG的方法测定重组酶的酶学性质为最适温度65℃,最适pH值6.5,Ag^(2+)、Hg^(2+)对重组酶的酶学活性具有明显的抑制作用,Cu^(2+)对重组酶的酶活性具有促进作用。研究表明,试验成功构建耐热α-半乳糖苷酶高效表达菌株29和54,在55℃保温10 min与同等条件下的野生型进行对比,加热前后的保留酶活比的增幅大于45%。 展开更多
关键词 Α-乳糖 耐温性 重组质粒pGAPZαA-Gal27A 保留活比 学性质
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日粮添加α-半乳糖苷酶对断奶苏姜仔猪生长性能、养分消化率及血清免疫指标的影响
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作者 韩大勇 周明夏 +2 位作者 朱爱文 倪黎纲 张伟 《中国饲料》 北大核心 2023年第24期50-53,共4页
本试验将不同水平的α-半乳糖苷酶添加到断奶苏姜仔猪日粮中,研究对其生长性能、血清免疫指标和养分消化率的影响。试验将108只断奶苏姜仔猪平均分为4组,每组3个重复,每个重复9只仔猪,分别为对照组(喂养普通日粮)、试验Ι组(日粮+50U/kg... 本试验将不同水平的α-半乳糖苷酶添加到断奶苏姜仔猪日粮中,研究对其生长性能、血清免疫指标和养分消化率的影响。试验将108只断奶苏姜仔猪平均分为4组,每组3个重复,每个重复9只仔猪,分别为对照组(喂养普通日粮)、试验Ι组(日粮+50U/kgα-半乳糖苷酶)、试验Ⅱ组(日粮+100U/kgα-半乳糖苷酶)、试验Ⅲ组(日粮+200U/kgα-半乳糖苷酶),试验期为40d。结果发现:与对照组相比,在日粮中添加不同水平的α-半乳糖苷酶对断奶苏姜仔猪的末重、平均日增重及料重比均有显著影响(P<0.05),其中添加100U/kgα-半乳糖苷酶对提高断奶苏姜仔猪的生长性能效果最显著(P<0.05),断奶苏姜仔猪平均日增重比对照组提高了9.07%,料重比较对照组降低了8.82%;其次,在日粮中添加不同水平的α-半乳糖苷酶对断奶苏姜仔猪血清中的IgA、IgG、IgM等免疫指标均有显著影响(P<0.05),其中添加100U/kgα-半乳糖苷酶的试验组免疫指标与对照组相比差异最显著(P<0.05),IgA、IgG、IgM分别提高16.5%、21.6%和52.9%。最后,在日粮中添加不同水平的α-半乳糖苷酶,对断奶苏姜仔猪的养分消化率也有显著影响(P<0.05),其中添加100U/kgα-半乳糖苷酶的试验组养分消化率与对照组相比差异最显著(P<0.05),粗纤维消化率和粗蛋白质消化率分别比对照组提高8.29%和8.02%。结果表明,在日粮中添加100U/kg的α-半乳糖苷酶,对断奶苏姜仔猪的生长促进效果最明显,可使断奶苏姜仔猪的饲料效率最佳。 展开更多
关键词 Α-乳糖 仔猪 生长性能 免疫球蛋白 消化率
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β-半乳糖苷酶的来源、改造、异源表达及其在食品中的应用
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作者 李云亮 谢鹏飞 +4 位作者 刘晓霜 晁嘉品 赵晓雪 王晓静 马海乐 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第23期387-393,共7页
β-半乳糖苷酶作为一种安全无毒的酶制剂,不仅广泛应用于食品工业领域中,而且在酶工程、蛋白质工程等生物技术领域也有着很大的应用潜力。微生物发酵法作为生产β-半乳糖苷酶的主流生产方法,仍存在发酵时间较长、提取率低等问题;而利用... β-半乳糖苷酶作为一种安全无毒的酶制剂,不仅广泛应用于食品工业领域中,而且在酶工程、蛋白质工程等生物技术领域也有着很大的应用潜力。微生物发酵法作为生产β-半乳糖苷酶的主流生产方法,仍存在发酵时间较长、提取率低等问题;而利用工程菌的异源表达系统生产β-半乳糖苷酶的方式具有表达量高、成本低等优点。本文对β-半乳糖苷酶异源表达系统的基因来源、表达宿主菌、表达方式以及β-半乳糖苷酶应用价值等进行阐述,旨在为新型β-半乳糖苷酶产品的开发利用提供科学依据与理论参考。 展开更多
关键词 Β-乳糖 应用价值 基因改造 固定化 异源表达
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两种生育酚酯衍生物对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用
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作者 陈炜莉 贝翎 +5 位作者 杨扬 王璧莹 李家旭 阚绪甜 李文治 杜冰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期97-104,共8页
为探究两种生育酚酯衍生物(D-α-生育酚醋酸酯和DL-α-生育酚醋酸酯)的抗衰老作用,本实验测定其体外抗氧化能力,并采用D-半乳糖构建衰老小鼠模型,同时用两种生育酚酯衍生物干预42 d,分析衰老相关指标变化规律。结果表明:在0.1~0.3 mg/m... 为探究两种生育酚酯衍生物(D-α-生育酚醋酸酯和DL-α-生育酚醋酸酯)的抗衰老作用,本实验测定其体外抗氧化能力,并采用D-半乳糖构建衰老小鼠模型,同时用两种生育酚酯衍生物干预42 d,分析衰老相关指标变化规律。结果表明:在0.1~0.3 mg/mL质量浓度范围内,两种生育酚酯衍生物的羟自由基清除能力、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基清除能力、Fe2+螯合能力、总还原能力均优于VC。与衰老模型组相比,经过生育酚酯衍生物干预后,小鼠血清中丙二醛含量显著下降(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001),谷胱甘肽过氧化物酶和总抗氧化能力显著升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001);血清中炎症因子白细胞介素-6、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α和肝功能指标天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶水平显著降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001);小鼠肝脏中核因子-E2-相关因子(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase,NQO1)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的mRNA及蛋白相对表达量提升,其中DL-α-生育酚醋酸酯的Nrf2、NQO1、HO-1 mRNA相对表达量分别增加了514.08%、461.78%、515.32%,蛋白相对表达量分别增加了620.00%、988.89%、1200.00%(P<0.0001)。综上所述,两种生育酚酯衍生物对D-半乳糖致衰老小鼠具有抗衰老作用,且DL-α-生育酚醋酸酯效果更好,二者抗衰老作用可能与调控Nrf2信号通路相关。 展开更多
关键词 生育酚酯衍生物 D-乳糖 抗氧化 衰老 核因子-E2-相关因子
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β-半乳糖苷酶荧光探针的研究进展
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作者 李敏艳 闫新豪 《化学与生物工程》 CAS 2023年第4期1-6,共6页
β-半乳糖苷酶属于糖苷水解酶,在食品工业、基因工程、酶工程、蛋白质工程、生物医学等领域发挥着重要作用。β-半乳糖苷酶活性及含量的异常与癌症的发生发展密切相关,因此该酶检测对早期癌症诊断有着重要意义。传统酶活性检测方法具有... β-半乳糖苷酶属于糖苷水解酶,在食品工业、基因工程、酶工程、蛋白质工程、生物医学等领域发挥着重要作用。β-半乳糖苷酶活性及含量的异常与癌症的发生发展密切相关,因此该酶检测对早期癌症诊断有着重要意义。传统酶活性检测方法具有一定的局限性,无法实现对β-半乳糖苷酶的原位无损检测。荧光探针因灵敏度高、选择性好、可用显微镜直接观察、分辨率高、响应时间短、操作方便、成本低等优点深受研究者青睐。在简述荧光探针设计原理的基础上,对近年来β-半乳糖苷酶荧光探针的设计合成研究进展进行了综述,阐述了β-半乳糖苷酶荧光探针在生物成像、早期癌症诊断等应用进展,为β-半乳糖苷酶高效检测技术的研究提供了帮助。 展开更多
关键词 Β-乳糖 荧光探针 生物成像
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黄芪多糖对衰老HDFβ-半乳糖苷酶活性影响的实验研究 被引量:10
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作者 赵丹威 欧芹 +1 位作者 魏晓东 王明富 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1361-1362,共2页
目的探讨黄芪多糖(APS)对衰老人胚肺二倍体成纤维细胞(HDF)衰老相关β-半乳糖苷酶(SAβ-gal)活性的影响。方法MTT法测细胞活力;免疫组化法测衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数。结果黄芪多糖可以增强细胞活力,降低SAβ-gal染色阳性... 目的探讨黄芪多糖(APS)对衰老人胚肺二倍体成纤维细胞(HDF)衰老相关β-半乳糖苷酶(SAβ-gal)活性的影响。方法MTT法测细胞活力;免疫组化法测衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数。结果黄芪多糖可以增强细胞活力,降低SAβ-gal染色阳性细胞数。结论黄芪多糖延缓HDF细胞衰老的机制之一可能是减少了SAβ-gal的表达。 展开更多
关键词 黄芪多糖 人胚肺二倍体成纤维细胞 细胞衰老 Β-乳糖
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香蕉果实软化相关β-半乳糖苷酶基因的克隆及其表达分析(英文) 被引量:17
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作者 庄军平 苏菁 +1 位作者 李雪萍 陈维信 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期411-419,共9页
β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)通过分解细胞壁半纤维素切除半乳糖键而参与果实软化。为了阐明香蕉(Musasp.)果实成熟过程中的软化与细胞壁代谢酶β-半乳糖苷酶基因表达之间的关系,采用RT-PCR方法,从成熟香蕉果实果肉中分离了编码β-... β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)通过分解细胞壁半纤维素切除半乳糖键而参与果实软化。为了阐明香蕉(Musasp.)果实成熟过程中的软化与细胞壁代谢酶β-半乳糖苷酶基因表达之间的关系,采用RT-PCR方法,从成熟香蕉果实果肉中分离了编码β-半乳糖苷酶基因的部分cDNA(MA-Gal),序列分析表明,MA-Gal包含927bp,编码309个氨基酸,包含5 个β-半乳糖苷酶结构域(典型真核生物中β-半乳糖苷酶包含7 个结构域),推导的MA-Gal 蛋白质中有β-半乳糖苷酶蛋白的催化活性部位GGPIILSQIENEY(F);系统进化树分析结果表明MA-Gal属于第一类β-半乳糖苷酶基因(该类主要在果实中表达);β-半乳糖苷酶活性和硬度的变化表明其与香蕉果实硬度变化密切相关;Northern 分析显示,跃变前期的果肉中,MA-Gal 基因的表达量很低,后随着果实的软化表达量不断增加,并在呼吸跃变后达到最高。所有结果表明,MA-Gal 参与香蕉果实成熟过程中的软化。 展开更多
关键词 香蕉果实 成熟软化 Β-乳糖 CDNA克隆
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