葡萄糖调节蛋白78在卵巢癌细胞衰老过程中的作用

目的拟了解葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在卵巢癌细胞衰老过程中所发挥的作用,并初步进行相关机制探讨。方法亚凋亡剂量顺铂诱导卵巢癌A2780细胞衰老,并继续培养至出现衰老逃脱现象;衰老相关的!-半乳糖苷酶检测细胞衰老情况;流式细胞仪分析细胞周期情况;Western blot检测GRP78及相关蛋白表达情况。siRNA反义抑制GRP78的表达,观察衰老逃脱细胞克隆形成情况。结果亚凋亡剂量顺铂作用A2780细胞后发生明显G2/M期阻滞,细胞衰老染色阳性。继续培养3周后出现衰老逃脱细胞克隆的形成,并可被顺铂再次诱导进入衰老状态。GRP78蛋白在衰老的A2780细胞及再次被顺铂诱导进入衰老状态的衰老逃脱细胞中均呈低表达,而在衰老逃脱细胞中重新恢复其高表达。反义抑制A2780细胞中GRP78蛋白表达后P53及Cyclin B1蛋白表达均明显升高,Cdc2蛋白表达明显下降,同时伴有细胞衰老逃脱能力的明显降低。结论 GRP78在顺铂诱导卵巢癌细胞衰老过程中起到抵抗衰老的作用。