袁氏生脉成骨片对激素干预后大鼠成骨细胞的差异表达miRNA的实验研究

目的:成骨细胞和骨细胞凋亡学说是激素性股骨头坏死的机制之一,袁氏生脉成骨片已被证实在临床治疗激素性股骨头坏死有一定疗效,但两者具体作用机制有待深入,实验研究袁氏生脉成骨片对激素干预后大鼠成骨细胞的差异表达miRNA,预测其靶基因以推测作用机制。方法:取乳鼠(大鼠)的成骨细胞进行培养、传代,将第三代成骨细胞分为空白组,激素组,中药组;分别提取总RNA并进行质检;采用RNA标记与芯片杂交,采集数据及标准化,找出三组间的差异表达miRNA并对其表达谱进行分析。利用miranda、microcosm、mirdb 3个靶点预测软件对最明显的miR-672-5p进行靶基因预测。结果:和空白组相比,激素组中倍数>2.0倍的miRNA共有6个(4个miRNA表达上调,2个miRNA表达下调);和空白组相比,中药组中倍数>2.0倍miRNA共有63个(19个miRNA表达上调,44个miRNA表达下调);和激素组相比,中药组中倍数>2.0倍的miRNA共有56个(11个miRNA表达上调,45个miRNA表达下调)。在激素组与空白组对照中上调,在中药组与激素组对照中相对应下降的倍数>2.0倍的miRNA共4个(miR-672-5p、miR-3559-3p、miR-98-3p、miR-92a-1-5p),并预测出Angptl4、Ccdc51、RGD1306991、Ssbp3作为miR-672-5p的靶基因。结论:袁氏生脉成骨片对激素干预后大鼠成骨细胞的miRNA表达发生了明显变化,以miR-672-5p最为显著。这表明了它有可能参与了成骨细胞的凋亡,为袁氏生脉成骨片治疗激素性股骨头坏死提供理论依据。

反相高效液相色谱法测定袁氏生脉成骨片中牡荆苷的含量

【目的】建立袁氏生脉成骨片中牡荆苷含量的测定方法。【方法】采用 Hypersiol ODS_2 C_(18)色谱柱,流动相:甲醇--10mL/L冰醋酸(梯度洗脱),柱温:室温,检测波长:339nm,流速:1.0mL/min。【结果】牡荆苷在0.108-0.541μg范围内具有良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为98.13％,RSD为1.27％。【结论】该方法简便、重复性好,为袁氏生脉成骨片的质量控制提供了依据。

袁氏生脉成骨片HPLC指纹图谱的初步研究

目的采用高效液相色谱法建立袁氏生脉成骨片的指纹图谱。方法色谱柱:HypersilODS2;流动相:甲醇-1%冰醋酸(梯度洗脱);柱温:20℃;检测波长:268nm;分析时间:55min;流速:1.0mL/min。结果总共标示出25个共有峰,初步研究结果表明,各批样品均是以牡荆苷为最强吸收峰,其峰面积在22%～25%,各批样品间差异不大,具有指纹图谱的特征意义。结论该方法简便、重复性好,为袁氏生脉成骨片的指纹图谱质量控制提供了初步研究基础。

高能量体外冲击波配合袁氏生脉成骨片治疗早期股骨头坏死34例

目的探讨高能量体外冲击波(ESWT)配合袁氏生脉成骨片治疗早期股骨头坏死(ONFH)的临床疗效。方法收集2016年1月至2016年12月期间在广州中医药大学第一附属医院三骨科保髋病区就诊的早期ONFH患者68例,根据随机数表法分为对照组和观察组,每组34例。对照组给予单纯高能体外冲击波治疗,观察组在对照组治疗基础上联合袁氏生脉成骨片治疗,疗程为6个月。治疗后,评价两组患者的临床疗效及ONFH范围,同时比较治疗前、治疗后3个月和12个月时两组患者的VAS疼痛评分和Harris评分。结果观察组患者的治疗总有效率为97.1%,明显优于对照组的76.5%,差异有显著统计学意义(P<0.01);观察组患者的股骨头总坏死率为17.6%,明显低于对照组的61.8%,差异有显著统计学意义(P<0.01);治疗后12个月,观察组患者的VAS和Harris评分分别为(0.23±0.65)分、(88.61±5.34)分,与对照组的(3.53±1.48)分、(79.43±3.62)分比较,差异均有显著统计学意义(P<0.01)。结论 ESWT联合袁氏生脉成骨片治疗早期ONFH比单一ESWT疗效更显著,联合治疗能加速骨细胞生成,降低股骨头塌陷风险,促进ONFH的愈合,达到改善髋关节功能的作用。

股骨头髓芯减压植骨腓骨支撑联合自体外周血干细胞移植治疗股骨头坏死初步研究

目的:观察股骨头髓芯减压植骨腓骨支撑联合自体外周血干细胞移植治疗股骨头坏死的临床疗效。方法:对8例患者行股骨头髓芯减压植骨支撑联合自体外周血干细胞移植治疗。结果:术后1年,影像学结果示股骨头内坏死区域密度均匀增加,股骨头未发生塌陷,髋关节间隙无变窄,髋臼及股骨头周缘无骨质增生,异体腓骨头固定稳定。经重组人粒细胞刺激因子动员后,患者外周血白细胞总数、单核细胞数均较动员前明显升高(P<0.05,P<0.01);单个核细胞比率动员前后变化不大(P>0.05)。经COM.TEC采集干细胞后,白细胞数目、单个核细胞数目均较采集前明显下降(P<0.05,P<0.01);单个核细胞比率采集前后变化不大(P>0.05)。随访1年,患者(并发髋关节感染患者1例除外)Harris评分较术前明显提高(P<0.01)。结论:股骨头髓芯减压植骨支撑联合自体外周血干细胞移植治疗股骨头缺血性坏死可取得良好的近期疗效。