解脂耶氏酵母脂肪酶Lip2与疏水蛋白SC3融合表达及催化性质

为研究疏水蛋白融合表达对脂肪酶的催化性质影响,分别构建分泌表达解脂耶氏酵母脂肪酶Lip2,带His标签Lip2及Lip2与疏水蛋白SC3融合蛋白的重组质粒PKL、PKHL和PKHLS并分别转化到毕赤酵母GS115菌株中,通过筛选,获得表达活性较高的工程菌株(KL、KHL、KHLS)。对3株重组菌株的培养与重组蛋白催化性质研究表明蛋白相对分子质量为36 k Da、36 k Da、46 k Da,发酵液对底物对硝基苯酚辛酸酯(p-NPC)水解酶活分别达到5.35、4.69、2.4 U/m L。最适温度均是45℃,最适p H均是7.5,另外KHLS菌株的酶活力受表面活性剂的影响比KL和KHL小。