经钴—60γ射线辐照灭菌的裂解全血用于制造多杀性巴氏杆菌苗的试验

目前有多种兽医生物制品在培养基中添加健康动物的裂解血球全血,以提高菌数和抗原质量。但采集的血液因污染细菌报废的多达30%以上。为了简化工艺手续,减少不必要的经济损失,我们在已报道(中国兽药杂志1988年4期)用钻—60辐照灭菌试验的基础上,生产多杀性巴氏杆菌苗添加了经钴—60辐照血的初步试验。一、试验材料1。

流式细胞术分析小鼠外周血免疫细胞全血裂解试剂比较研究

本研究探讨流式细胞术外周血样本制备中红细胞裂解液的作用。用流式细胞术检测进口的商品化红细胞裂解液OptiLyse C(Beckman Coulter),FACS Lysing Solution(BD Pharmingen)以及自制裂解液RBC Lysis Buffer裂解小鼠外周血红细胞后免疫细胞的表达情况并进行了对比分析。结果表明,用3种裂解液制备样本中CD3e+、CD3e+CD4+、CD3e+CD8a+、CD3e-CD19+、CD3e-NK1.1+和Gr-1+细胞的百分比均无明显差异(p>0.05);而OptiLyse C裂解液更适于Gr-1+细胞测定,不适于Foxp3+Tregs细胞测定;FACS Lysing Solution和自制RBC LysisBuffer适于Foxp3+Tregs细胞测定。结论:应用自制RBC Lysis Buffer裂解液,按标准化操作程序制备流式样本,能够达到进口的商品化裂解液OptiLyse C的效果,它不仅能满足实验要求,又可降低试剂成本,可推广应用。

流式细胞仪全血红细胞裂解液研究

目的研制流式细胞仪全血红细胞裂解液,并与进口试剂比对效果,以期大大降低试剂的成本,使其在中国广泛应用。方法采用流式细胞术,分别用进口试剂和自制试剂制备全血样品,比较两种试剂对30例健康体检者白细胞分群的影响、淋巴细胞亚群比例的影响、淋巴细胞亚群的平均荧光强度的影响。结果自制试剂制备的样品中淋巴细胞、单核细胞和粒细胞的分布与进口试剂一致;自制试剂制备的样品,T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞(CD19+/CD3-)、辅助/诱导T淋巴细胞(CD3+CD4+CD8-)、抑制/细胞毒T淋巴细胞(CD3+CD4-CD8+)、NK细胞(CD16+56+/CD3-)的百分率与进口试剂无明显差异(P>0.05);自制试剂制备的样品,T淋巴细胞、B淋巴细胞、辅助/诱导T淋巴细胞和抑制/细胞毒T淋巴细胞的平均荧光强度与进口试剂无明显差异(P>0.05),但NK细胞的平均荧光强度弱于进口试剂(P<0.05)。结论与进口试剂比对的结果表明,自制试剂对白细胞的分群、淋巴细胞亚群的百分率、淋巴细胞表面分子CD3、CD4、CD8、CD19的表达量,均达到了进口试剂的效果,而成本大大降低。

裂解血球全血与健康动物血清在牛多杀性巴士杆菌病灭活疫苗生产中使用效果对比试验

兽用生物制品制造及检验规程中规定:牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗在通气培养过程中,需添加0.1%裂解血球全血。本试验通过在合成培养基中添加裂解血球全血与健康动物血清培养对比,发现在牛多杀性巴士杆菌病灭活疫苗生产中添加一定量健康动物血清,其生长菌数、效力检验、安全检验均与添加0.1%裂解血球全血生产检验指标相一致,且有降低污染率、降低生产成本的效果,值得生产中推广使用。

外周血不同制备法对检测两种性病患者淋巴细胞免疫表型的影响

目的:探讨流式细胞术中的裂解全血法和分离淋巴细胞法对检测尖锐湿疣(CA)和复发性生殖器疱疹(RGH)患者外周血淋巴细胞免疫表型实验结果的影响。方法:采用单色、双色和三色荧光抗体染色技术经流式细胞仪分别检测20例RGH、CA患者的裂解全血及10例RGH、CA患者的分离淋巴细胞中的CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD40抗原、CD40L抗原、T细胞αβ链(Tαβ)和T细胞γδ链(Tγδ)染色阳性细胞百分率。结果:裂解全血法和分离淋巴细胞法分析淋巴细胞免疫表型结果,除CD40L(P=0.89)没有显著性差异以外,其余均有显著性差异(分别为CD3+T:P<0.01,CD4+T:P<0.05,CD8+T:P<0.05,CD40:P<0.05,Tαβ:P<0.001,Tγδ:P<0.05)。结论:CA和RGH患者外周血不同制备方法影响淋巴细胞免疫表型结果分析,裂解全血法优于分离淋巴细胞法。

榛鸡的烟曲霉菌病

曲霉菌病是多种禽类易感的常见病,幼禽多患,常呈急性暴发,成禽多为散发。发病情况本所试验场共有××只榛鸡和100多只雉鸡,两个笼舍由铁丝网相隔,圈舍通风良好。自1987年8月10日至20日连续刮风和梅雨致使地面潮湿,鸡群中出现食欲减少及呼吸道症状,并每天死亡1～2只(30～50日龄),前后共死亡9只,发病率为15.8％,死亡率为90％。同时雏雉鸡群中也发病死亡。