腺病毒介导的人CD40配体基因抑制裸鼠卵巢癌生长的实验研究

[目的]探讨重组腺病毒人CD40配体基因(Ad-hCD40L)对卵巢癌的治疗作用。[方法]建立卵巢癌裸鼠动物模型,检测腺病毒介导的人CD40配体基因对肿瘤生长的抑制作用。[结果]瘤内注射Ad-hCD40L明显抑制裸鼠卵巢癌生长,Tunel法检测和HE染色肿瘤组织石腊切片观察调亡细胞明显增多,并可见大量肿瘤细胞坏死。[结论]腺病毒介导的人CD40配体基因抑制裸鼠肿瘤生长,增强诱导肿瘤细胞调亡,为卵巢癌的基因治疗提供了新的途径。

DC-CTL免疫细胞对卵巢上皮癌细胞的靶向性治疗研究

目的探讨经树突状细胞(DC)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫细胞靶向性的抑制卵巢上皮癌细胞的机制,为临床上DC-CTL治疗卵巢癌提供理论基础。方法无胸腺BALB/C/nu/nu裸小鼠48只,分为4组,每组12只,裸鼠人卵巢癌SKOV3移植瘤模型成功后用未经DC诱导的CTL免疫细胞和经DC诱导的CTL免疫细胞进行治疗,比较各组裸鼠移植瘤体积和重量、抑瘤率、移植瘤miRNAlet-7表达和HMGA2蛋白表达的差异。结果 DC-CTL组和CTL组裸鼠的移植瘤体积和移植瘤重量低于模型对照组(F值分别为8.175、6.823,均P<0.05),DC-CTL组裸鼠的移植瘤体积和移植瘤重量低于CTL组,且差异具有统计学意义(t=13.244,P<0.05);DC-CTL组裸鼠的抑瘤率(69.57±10.81)%高于CTL组(42.35±8.15)%,且差异具有统计学意义(t=6.965,P<0.05);DC-CTL组和CTL组裸鼠的移植瘤miRNAlet-7表达均高于模型对照组(F=7.528,P<0.05),DC-CTL组裸鼠的移植瘤miRNAlet-7表达(1.69±0.40)高于CTL组(1.17±0.39),且差异具有统计学意义(t=2.964,P<0.05);DC-CTL组和CTL组裸鼠的HM GA2蛋白表达的ISH评分均低于模型对照组(F=6.419,P<0.05),DC-CTL组裸鼠的HM GA2蛋白表达的ISH评分(15.31±1.72)低于CTL组(17.18±1.86),且差异具有统计学意义(t=3.143,P<0.05)。结论经DC诱导的CTL免疫细胞能够明显抑制裸鼠卵巢癌移植瘤的生长,其机制可能为促进let-7表达和抑制HMGA2蛋白表达有关。

乳源免疫调节肽抗人卵巢癌的实验研究

目的:通过荷人卵巢癌裸鼠模型,研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)的抑癌作用。方法:建立荷人卵巢癌裸鼠模型,皮下接种肿瘤细胞后,分别用0.9%氯化钠液(NS组),低剂量PGPIPN(2.5×10-4mg/L)(PGPIPN1组),高剂量PGPIPN(5.0×10-4mg/L)(PGPIPN2组),0.2ml隔日腹腔注射;氟尿嘧啶(5-Fu)(30mg/kg·d)(5-Fu组)通过腹腔注射。种植5周后处死裸鼠,测量荷人卵巢癌裸鼠的体重、瘤重、脾重,计算抑瘤率、脾指数,观察PGPIPN对卵巢癌肿瘤的抑制作用,并通过HE染色、DNA凝胶电泳分析技术观察PGPIPN对卵巢癌细胞及其DNA的影响。结果:荷人卵巢癌裸鼠经PGPIPN治疗后出现肿瘤体积缩小,PGPIPN2组抗瘤效果优于PGPIPN1组,同时还能改善荷人卵巢癌裸鼠的体质,提高荷人卵巢癌裸鼠的生存质量,增强SKOV3裸鼠免疫功能。组织病理学检查发现:PG-PIPN1组可见小片状瘤细胞发生凋亡,PGPIPN2组可见瘤细胞大片发生凋亡。PGPIPN组的瘤组织中提取的DNA进行琼脂糖电泳均出现特征性DNA梯形电泳条带。结论:PGPIPN有明显的抑瘤效应,可诱导人卵巢癌细胞发生凋亡。这为卵巢癌的治疗提供了新方法。

羊栖菜多糖对卵巢上皮癌裸鼠移植瘤TGF-β/Smad通路及癌细胞凋亡的影响

目的:探究羊栖菜多糖(SFPS)对卵巢上皮癌裸鼠移植瘤转化生长因子-β/Smad(TGF-β/Smad)通路及癌细胞凋亡的影响。方法:体外培养人卵巢上皮癌OVCAR3细胞,建立卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为模型组(M组)、SFPS低[SFPS-L,10 mg/(kg·d)]、中[SFPS-M,20 mg/(kg·d)]、高[SFPS-H,40 mg/(kg·d)]剂量组,每组10只,干预21 d。观察给药期间各组裸鼠瘤生长情况;给药结束后,原位末端标记法(TUNEL)检测移植瘤中癌细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测移植瘤组织中TGF-β(TGF-β)、Smad mRNA表达水平,免疫印迹(Western Blot)法检测移植瘤组织中Bax、Bcl-2、TGF-β1、Smad 4蛋白表达量。结果:随治疗时间延长,M组、SFPS-L组、SFPS-M组、SFPS-H组裸鼠移植瘤体积显著增加(P<0.05);与M组比较,治疗后第3、7、14、21 d SFPS-L组、SFPS-M组、SFPS-H组裸鼠移植瘤体积均依次降低(P<0.05)。治疗结束后,与M组比较,SFPS-L组、SFPS-M组、SFPS-H组裸鼠抑瘤率、癌细胞凋亡率、移植瘤组织Bax蛋白表达量及TGF-β1、Smad 4 mRNA和蛋白表达量依次增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达量依次降低(P<0.05)。结论:SFPS可促进卵巢上皮癌移植瘤中癌细胞凋亡,可能与促进TGF-β/Smad通路激活,上调Bax蛋白、下调Bcl-2蛋白表达有关。