纳秒脉冲处理A375细胞裸鼠皮下移植瘤的疗效评估

ns脉冲电场可以诱发肿瘤细胞的结构和功能发生一系列变化,使其在临床肿瘤治疗中展现出巨大的应用前景。目前,受限于检测评估手段,相关动物实验研究尚不充分。将ns脉冲(电场强度20kV/cm、脉宽200ns、重复频率5Hz、2 000个脉冲)作用于A375裸鼠皮下移植瘤,采用荧光活体成像方法定量研究ns脉冲的抑瘤效果,同时用相机随访观察局部疤痕的转归情况。与对照组荧光增加相比,处理组荧光强度逐渐减弱(检验水准P<0.05),且在第2次处理后14d荧光完全消失;随着时间的推移,治疗区域局部疤痕逐渐变浅,并在第2次处理后22d完全消失。实验结果表明,ns脉冲可以实现局部肿瘤组织的完全切除,且能实现皮肤疤痕的有效转归。

脂质体-c-erbB-2反义寡核苷酸转染对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤形成的抑制作用研究

目的 探讨经脂质体—硫代磷酸化修饰的c erbB 2反义寡脱氧核苷酸 (ASODN )作用后的卵巢上皮癌细胞株SKOV3 在裸鼠皮下的成瘤能力。方法 利用脂质体将经硫代磷酸化修饰的寡核苷酸导入SKOV3 细胞内 ,然后将这种被转染的细胞接种于裸鼠皮下 ,观察肿瘤体积的变化 ,并计算抑瘤率。结果 经脂质体 c erbB 2ASODN作用后的卵巢上皮癌细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低 ,最大抑瘤率达 4 0 .0 %(P <0 .0 5 )。首次出现目检可见肿瘤的平均时间延长为 9.6天 (P <0 .0 5 )。结论 c erbB 2癌基因的反义调控能降低卵巢上皮癌细胞的成瘤能力 ,抑制肿瘤生长 ,在卵巢上皮癌的基因治疗中有一定价值。

曲妥珠单抗联合紫杉醇诱导过表达HER-2的乳腺癌裸鼠皮下移植瘤乳腺癌细胞凋亡的作用机制和效果研究

目的探讨曲妥珠单抗联合紫杉醇诱导过表达表皮生长因子受体-2(HER-2)的乳腺癌细胞凋亡的作用机制和治疗效果。方法通过建立HER2过表达乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,并将其分为对照组、曲妥珠单抗组、紫杉醇组和曲妥珠单抗联合紫杉醇组,分别给予相对应的药物治疗21 d。统计分析各组裸鼠的肿瘤体积、瘤重和抑瘤率,并使用Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡率。使用免疫组化检测Ki-67、微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)。结果曲妥珠单抗联合紫杉醇组的肿瘤体积增长最慢,在21 d时的体积远远小于其它各组(P<0.05);曲妥珠单抗联合紫杉醇组的瘤重最小,抑瘤率远远高于其它组(P<0.05);D组裸鼠的细胞凋亡率均高于A、B、C组,且差异有统计学意义(P<0.05);D组裸鼠的Ki-67、MVD密度及VEGF水平均显著低于其他各组(P<0.05)。结论曲妥珠单抗联合紫杉醇诱导过表达HER-2的乳腺癌细胞凋亡效果显著,可以有效抑制HER2过表达乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长及血管生成,值得临床推广应用。

脂质体-c-erbB-2反义寡核苷酸对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用

目的 探讨c erbB 2反义寡脱氧核苷酸 (ASODN )对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法 将 15只裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型 ,然后随机分成 3组予以不同条件处理 :对照组 (腹腔注射转染液和脂质体 ) ,正义治疗组 (腹腔注射脂质体 c erbB 2 -SODN ) ,反义治疗组 (腹腔注射脂质体 c erbB 2 -ASODN )。治疗期间定期观测裸鼠体重和肿瘤体积 ,计算抑瘤率及肿瘤缩小率。利用RT -PCR技术比较治疗后各组肿瘤组织中c erbB 2基因水平。结果 反义治疗组与正义治疗组的抑瘤率分别为 71.2 %和 7.6% ,反义治疗组肿瘤缩小率为 2 2 .7% ,与正义治疗组相比较有显著性差异。各组裸鼠体重变化无明显差异。RT -PCR结果显示反义治疗组c erbB 2表达水平降低约 61.0 %。结论 脂质体 c erbB 2 -ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤有一定的治疗作用 ,可能成为日后卵巢癌基因治疗的重要途径。

H-ras干扰性RNA对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤CD44V6表达的影响

目的应用重组质粒pshRNA/H-ras转染卵巢癌SKOV3荷瘤裸鼠,观察Ras信号传导通路中信号分子的变化。方法选用裸鼠20只建立卵巢癌裸鼠皮下成瘤模型,分别设立对照组和实验组,应用陡脉冲电转重组质粒pshRNA/H-ras于瘤体中,于治疗后21天处死裸鼠并取瘤体组织固定,免疫组织化学SP法检测CD44V6的表达。结果对照组细胞膜、浆中见变异型细胞黏附分子44(CD44V6)的阳性表达,而转染pshRNA/H-ras实验组CD44V6的表达显著下降,差异有统计学意义(P＜0．05)。结论H-ras的小干扰性RNA可下调与肿瘤转移相关基因的表达,对阻止肿瘤侵袭转移具有较好的研究价值。

WT1反义寡核苷酸对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤形成的抑制作用

目的:观察WT1反义寡核苷酸作用后的人卵巢癌细胞株SKOV3在裸鼠皮下的成瘤能力。方法:应用反义寡核苷酸(ASODN)技术,将WT1反义寡核苷酸转染到SKOV3细胞中,然后将这种被转染的细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤体积的变化,并计算抑瘤率。结果:脂质体介导的WT1反义寡核苷酸作用后的卵巢上皮癌细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低,首次出现目检可见肿瘤的平均时间延长,抑瘤率明显增加。结论:WT1反义寡核苷酸能降低卵巢癌SKOV3细胞的成瘤能力,抑制肿瘤生长,在上皮性卵巢癌的基因治疗中有一定价值。

氧化砷抑制结肠癌裸鼠皮下移植瘤生长及作用机制的研究

目的 研究氧化砷 (As2 O3 )对人结肠癌SW4 80细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其作用机制。方法 建立BALB/C nu/nu裸鼠SW4 80结肠癌皮下移植瘤模型 ,以不同浓度As2 O3 行腹腔内注射治疗 ,与 5 氟脲嘧啶 (5 FU)治疗进行对比 ,观察移植瘤的瘤重及瘤重抑制率 ,TUNEL法检测移植瘤SW4 80细胞凋亡率 ,免疫组织化学法检测bcl 2 ,Fas基因表达水平的变化。结果 5 FU、低剂量As2 O3 及高剂量As2 O3 均能明显抑制裸鼠皮下肿瘤的生长 ,抑瘤率分别为 4 1.5 1%、5 3.2 1%和 5 8.0 2 % ,As2 O3 对移植瘤的生长抑制作用明显强于 5 FU ,两者比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。两种浓度As2 O3 组SW4 80细胞凋亡率明显高于 5 FU。移植瘤组织中bcl 2蛋白阳性细胞数明显减少 ,Fas蛋白阳性细胞数明显增加。结论 As2 O3 对结肠癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用 ,可诱导移植瘤SW4 80细胞凋亡 ,其作用的分子机制可能是下调bcl 2基因表达 ,上调Fas基因表达。

PKCαsiRNA转染对人胃癌裸鼠皮下移植瘤形成的抑制作用研究

目的:探讨PKCαsiRNA作用后的胃癌细胞株BGC823在裸鼠皮下的成瘤能力。方法:利用脂质体将PKCαsiRNA导入BGC823细胞内,然后将这种被转染的细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤体积的变化,并计算抑瘤率。结果:经脂质体PKCαsiRNA作用后的胃癌细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低,最大抑瘤率达40.0%(P<0.05)。首次出现目检可见肿瘤的平均时间延长为9.6天(P<0.05)。结论:PKCαsiRNA能降低胃癌细胞的成瘤能力,抑制肿瘤生长,在胃癌的基因治疗中有一定价值。

脂质体-c-raf-1反义寡核苷酸转染对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤形成的作用

目的 探讨经脂质体一硫代磷酸化修饰的c raf 1反义寡脱氧核苷酸(ASODN)作用后的卵巢上皮癌细胞株SKOV3在裸鼠皮下的成瘤能力。方法 利用脂质体将经硫代磷酸化修饰的寡核苷酸导入SKOV3细胞,然后将这种被转染的细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤体积的变化,并计算抑瘤率。结果 经脂质体c raf 1 ASODN作用后的卵巢上皮癌细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低,最大抑瘤率达35.3%(P<0.05)。首次出现肉眼可见肿瘤的平均时间延长为8.8天(P <0.05)。结论 c raf 1 癌基因的反义调控能降低卵巢上皮癌细胞的成瘤能力,抑制肿瘤生长,在卵巢上皮癌的基因治疗中有一定作用。

脂质体-c-raf-1反义寡核苷酸治疗人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤

目的 :探讨c-raf- 1反义寡脱氧核苷酸 (ASODN)对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法 :将 15只裸鼠建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型 ,然后随机分成 3组予以不同条件处理 :对照组 (腹腔注射转染液和脂质体 ) ,正义治疗组 (腹腔注射脂质体 -c -raf- 1-SODN) ,反义治疗组 (腹腔注射脂质体 -c -raf- 1-ASODN)。治疗期间定期观测裸鼠体重并测量肿瘤体积 ,计算抑瘤率及肿瘤缩小率。结果 :反义治疗组与正义治疗组的抑瘤率分别为 6 8.1%和 6 .8% ,反义治疗组肿瘤缩小率为 16 .7% ,与正义治疗组相比较有明显的差别。各组裸鼠体重变化无明显差别。结论 :脂质体 -c -raf - 1-ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤有一定的治疗价值 。

丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的生长及弗里德白血病病毒综合因子1表达的影响

近年来子宫内膜癌发病率逐年增高，发病趋于年轻化，严重影响着女性健康。激素治疗因其低毒、安全、有效等特点，得到了越来越多的临床工作者的青睐，更给早期需保留生育功能患者及晚期雌孕激素受体阳性或者复发转移的内膜癌患者带来福音。目前已有体外实验证实促性腺激素释放激素类似物（GnRH-a）可直接抑制人子宫内膜癌细胞株HEC-1-A生长，且随剂量增大抑制作用加强，但GnRH-a抑制肿瘤生长的作用机制尚不明确，而且GnRH-a的体内有效浓度存在争议。本次实验通过建立动物模型来研究不同剂量GnRH-a 对肿瘤生长以及对弗里德白血病病毒综合因子（FLi-1）表达的作用，为GnRH-a在妇科肿瘤的临床治疗上提供理论和实验依据。

人参皂甙Rg3对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤血管生成拟态的研究

目的本实验通过建立胰腺癌SW-1990细胞株皮下移植瘤模型,探讨人参皂甙Rg3对胰腺癌皮下移植瘤血管生成拟态的影响。方法首先建立人胰腺癌细胞裸鼠模型,后给予不同药物浓度的人参皂甙Rg3(0、5、10、20mg/kg)处理裸鼠,观察人参皂甙Rg3对裸鼠移植瘤生长的影响,免疫组化-PAS双染观察人参皂甙Rg3对裸鼠胰腺癌皮下移植瘤血管生成拟态和血管内皮因子CD31的影响,并用荧光定量PCR和Western blot法分别检测MMP-2、MMP-9在mRNA和蛋白水平的表达。结果人参皂甙Rg3能够抑制胰腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长,其中20mg/kg人参皂甙Rg3组最明显;Western blot法和荧光定量PCR示用药组与空白组比较,MMP-2、MMP-9在蛋白和mRNA水平的表达下降,且差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化-PAS双染后发现血管拟生(+)和CD31(+)数量均较空白组减少。结论通过体内实验笔者证实人参皂甙Rg3能够通过降低MMP-2、MMP-9的表达来抑制胰腺癌血管生成拟态的形成。

pSERPINB3-PE38KDEL毒素质粒对人舌鳞状细胞癌裸鼠皮下移植瘤的靶向抑制

目的:验证SERPINB3鳞癌特异性启动子调控下的PE38KDEL毒素表达质粒对人舌鳞状细胞癌裸鼠皮下移植瘤的靶向抑制作用。方法:通过构建人舌鳞状细胞癌裸鼠皮下移植瘤模型,经过质粒体内转染,对小鼠进行体重、肿瘤体积变化的测量以及HE、TUNEL、Ki-67免疫组化检测。结果:在不损伤正常组织的情况下,pSERPINB3-PE38KDEL毒素质粒对舌鳞癌具有靶向抑制作用。结论:通过SERPINB3鳞癌特异性启动子调控下的PE38KDEL毒素表达质粒对人舌鳞状细胞癌裸鼠皮下移植瘤的具有靶向治疗的可能性,为建立肿瘤特异性基因调控自杀基因成为靶向毒素体系提供了实验依据。

黄芪多糖对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤Wnt基因转导通路的影响

目的观察黄芪多糖对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤Wnt基因转导通路中相关因子β-连环蛋白(β-catenin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响。方法将30只SPF级雌性裸小鼠(BALB/c)随机分为对照组、模型组、黄芪多糖组,每组10只。模型组和黄芪多糖组均经右侧肩胛背部皮下注射人子宫内膜癌细胞系Ishikawa肿瘤细胞悬液制作人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型。造模4周后,黄芪多糖组给予黄芪多糖肌肉注射,对照组、模型组注射等量生理盐水,均连续14 d。实验结束后处死各组小鼠,摘取瘤体,计算抑瘤率;采用免疫组化法检测子宫内膜癌组织中β-catenin、E-cadherin蛋白表达情况,RT-PCR法检测β-catenin、E-cadherin mRNA表达情况。结果黄芪多糖组瘤体积、瘤质量均明显低于模型组(P均<0.05),抑瘤率明显高于模型组(P<0.05);模型组β-catenin蛋白和β-catenin mRNA表达水平均明显高于正常组(P均<0.05),黄芪多糖组均明显低于模型组(P均<0.05);模型组Ecadherin蛋白和E-cadherin mRNA表达水平均明显低于对照组(P均<0.05),黄芪多糖组均明显高于模型组(P均<0.05)。结论黄芪多糖可促进E-cadherin蛋白和基因表达,抑制β-catenin蛋白和基因表达,通过调控Wnt基因转导通路而发挥抗肿瘤作用。

大黄素对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤抑癌基因去甲基化作用

目的通过建立胰腺癌Panc1细胞株皮下移植瘤模型,探讨大黄素对胰腺癌皮下移植瘤抑癌基因p16、RASSF1A、ppENK启动子区CpG岛的去甲基化作用的影响。方法首先建立人胰腺癌细胞裸鼠模型,后给予不同药物浓度的大黄素(0、30、50、70mg/kg)处理裸鼠,观察大黄素对裸鼠移植瘤生长的影响,采用MSP、RT-PCR以及Western blot法分别检测不同组别移植瘤的3个抑癌基因甲基化状态以及mRNA、蛋白的改变。结果大黄素能够抑制胰腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长,随着大黄素浓度的升高,其对胰腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制率逐渐升高,特别50、70mg/kg浓度组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。MSP结果显示大黄素可使裸鼠移植瘤组织的甲基化条带减弱,非甲基化条带增强,同时可以使经RT-PCR和Western blot法结果证实的低表达或无表达的mRNA和蛋白表达增强或者重新表达,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过体内实验笔者证实大黄素可以对胰腺癌裸鼠移植瘤抑癌基因p16、RASSF1A、ppENK发挥不同程度的去甲基化作用,使因启动子区甲基化而失表达的抑癌基因重新表达,大黄素抑制胰腺癌裸鼠移植瘤生长可能和其具有对抑癌基因去甲基化作用有关。

三氧化二砷联合5-FU治疗大肠癌裸鼠皮下移植瘤的初步研究

目的 观察联合应用三氧化二砷和5-FU治疗大肠癌裸鼠皮下移植瘤的疗效。方法 建立裸鼠皮下人大肠癌移植瘤模型，应用三氧化二砷和5-FU治疗后，观察肿瘤生长曲线，计算抑瘤率，并用HE染色观察有无器官毒副作用。结果 实验表明治疗组肿瘤生长明显抑制，三氧化二砷组抑瘤率为55．5％，而联合治疗组抑瘤率为76．0％(P<0．05)，HE染色未观察到各器官病理改变。结论 联合应用三氧化二砷和5-FU能提高三氧化二砷治疗大肠癌的疗效，且没有明显的毒副作用。

去甲基化Runx3基因对荷人胃癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

Runx3基因作为转化生长因子（TGF-β）信号传导通路中的一个重要因素参与对上皮细胞的负向调控。在众多的肿瘤中均发现了染色体1p36的异常，而其中Runx3甲基化对胃癌的发生发展的影响越来越受到广泛关注。为进一步明确Runx3基因甲基化在胃癌发生、发展中的作用，本研究运用5-aza-2’-deoxycytidine药物处理胃癌细胞株达到去甲基化效果并接种于BALB／c裸鼠观察成瘤率和肿瘤体积，从而深入探讨Runx3基因在胃癌中的表达情况及其临床意义。

经沉默免疫负调控基因技术处理的树突状细胞联同细胞毒性T淋巴细胞抑制人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的研究

我们2014年1至2014年5月进行经沉默免疫负调控基因（iAPA）技术处理的树突状细胞（DC）联同细胞毒性T淋巴细胞（iAPA-DC/CTL）抑制人肝癌裸鼠皮下移植瘤的实验研究,现报道如下.

重组人血管内皮抑制素对人胃癌细胞SGC-7901裸鼠皮下移植瘤淋巴管生成与淋巴转移的抑制作用

肿瘤淋巴管生成在淋巴转移过程中起重要作用。重组人血管内皮生长抑制素（Endostar，恩度）在临床上用来抑制肿瘤血管生成，其抑制肿瘤淋巴管生成的研究报道尚少。我们通过建立人胃癌裸鼠移植瘤模型，观察Endostar对肿瘤淋巴管生成和淋巴转移的影响。