黄芪多糖对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤Wnt基因转导通路的影响

目的观察黄芪多糖对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤Wnt基因转导通路中相关因子β-连环蛋白(β-catenin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响。方法将30只SPF级雌性裸小鼠(BALB/c)随机分为对照组、模型组、黄芪多糖组,每组10只。模型组和黄芪多糖组均经右侧肩胛背部皮下注射人子宫内膜癌细胞系Ishikawa肿瘤细胞悬液制作人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型。造模4周后,黄芪多糖组给予黄芪多糖肌肉注射,对照组、模型组注射等量生理盐水,均连续14 d。实验结束后处死各组小鼠,摘取瘤体,计算抑瘤率;采用免疫组化法检测子宫内膜癌组织中β-catenin、E-cadherin蛋白表达情况,RT-PCR法检测β-catenin、E-cadherin mRNA表达情况。结果黄芪多糖组瘤体积、瘤质量均明显低于模型组(P均<0.05),抑瘤率明显高于模型组(P<0.05);模型组β-catenin蛋白和β-catenin mRNA表达水平均明显高于正常组(P均<0.05),黄芪多糖组均明显低于模型组(P均<0.05);模型组Ecadherin蛋白和E-cadherin mRNA表达水平均明显低于对照组(P均<0.05),黄芪多糖组均明显高于模型组(P均<0.05)。结论黄芪多糖可促进E-cadherin蛋白和基因表达,抑制β-catenin蛋白和基因表达,通过调控Wnt基因转导通路而发挥抗肿瘤作用。

转染BRMS1基因对人类胰腺癌细胞在裸鼠体内肿瘤转移能力影响的研究

目的建立人类胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,研究BRMS1基因对人类胰腺癌细胞在裸鼠体内肿瘤转移能力的影响,寻找胰腺癌基因治疗的有效模式。方法利用脂质体转染技术将构建的p EGFP-C1-BRMS1重组载体、p EGFP-C1空载体稳定转染入人类胰腺癌细胞株PANC-1中,接种三组(转染组、空载体组、未转染组)细胞于裸鼠背部皮下,5周后处死裸鼠,取肿瘤、淋巴结及肺组织进行组织病理学检查。结果将p EGFP-C1-BRMS1重组载体、p EGFP-C1空载体转染入人类胰腺癌细胞株PANC-1,并建立了人类胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,三组裸鼠肿瘤大小无明显差异,但转染组裸鼠淋巴结转移率明显低于空载体组和未转染组。结论 BRMS1基因不影响人类胰腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤的生长,但可以抑制人类胰腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤的局部淋巴转移。

构建慢病毒介导缺氧诱导因子HIF-1α在宫颈癌细胞中的表达及其对裸鼠移植瘤的作用

目的 探讨使用慢病毒载体介导的HIF-1α对裸鼠宫颈癌移植瘤生长、增殖和转移的影响,并寻找宫颈癌新的基因治疗靶点。方法 采用慢病毒介导技术,分别在SiHa和C33a细胞中提高C33a细胞的HIF-1α表达,同时敲减SiHa细胞的HIF-1α表达。通过qRT-PCR和Western blot技术验证慢病毒转染后HIF-1α表达的效率,并构建裸鼠移植瘤模型。从而验证HIF-1α表达改变对裸鼠体内肿瘤形成、增殖速度、肿瘤体积和肿瘤重量的影响及HIF-1α表达改变对肿瘤发展过程的影响。结果 敲减和过表达HIF-1α的SiHa和C33a细胞分别注射于裸鼠左侧腋窝皮下,1周后形成肿瘤,4周后测量移植瘤体积。干扰HIF-1α的裸鼠移植瘤体积较对照组较小,两者差异具有统计学意义(P<0.05),即干扰HIF-1α对裸鼠瘤体的生长具有抑制作用;而HIF-1α过表达后,裸鼠移植瘤体积较对照组较大,两者差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-1α的表达改变与宫颈癌细胞的增殖和恶化存在一定相关性,HIF-1α表达的改变可以调控肿瘤增殖过程。