人胃癌裸鼠移植模型的建立及其生物学特性

人胃癌裸鼠移植模型的建立及其生物学特性甘润良，李一琴，胡萍玲，曾庆彪，欧阳贵衡阳医学院肿瘤研究所（衡阳市４２１００１）自从１９６９年Ｒｙｇａａｒｄ等首次成功地将人类结肠癌移植于裸小鼠后，多种人类肿瘤已在裸鼠体内移植成功，从而开辟了利用动物研究人癌的前...

血管瘤裸鼠移植模型生物学特性的动态观察

目的建立能客观、真实地反映人血管瘤的临床发展过程的稳定的血管瘤裸鼠移植模型,动态观察其生物学特性的变化。方法以裸小鼠为载体,选取1例2月龄婴儿增生期毛细血管瘤,将瘤体组织转种于裸小鼠皮下,动态观察瘤体生长情况及组织学变化,检测不同时期移植血管瘤糖皮质激素受体、血管内皮细胞生长因子、Ki67的表达。结果血管瘤组织移植后3～4周内,瘤体基本上无明显变化,40d后,大多数瘤体开始生长,60d左右达到最大,90d时可见部分瘤体颜色变浅,质地较前变硬,90～120d时部分瘤体仅有少许残留组织。糖皮质激素受体、血管内皮细胞生长因子、Ki67在增生期移植血管瘤中高表达,而在退化期移植血管瘤中表达极弱。糖皮质激素受体与Ki67、血管内皮细胞生长因子的表达正相关,Ki67与血管内皮细胞生长因子表达正相关。结论将人体血管瘤皮下部分移植于裸鼠所建立的人血管瘤动物模型,能较真实地反映人血管瘤的发展过程,是研究血管瘤的较理想的平台。糖皮质激素受体、血管内皮细胞生长因子与移植血管瘤的演变过程有着密切的关系。

大肠癌裸鼠移植模型研究进展

大肠癌是消化道常见肿瘤，恶性程度高，严重威胁人类健康。要深入研究大肠癌的生物学特性、癌变机制、肿瘤诊断、抗癌药物筛选以及新型治疗策略，建立稳定、可靠和重复性好的动物模型是十分必要的。本文就人大肠癌裸鼠移植模型的构建方式、主要适用范围及其优缺点综述如下。

人宫颈鳞状细胞癌裸鼠移植模型的建立及分析

目的:采用裸鼠腹部皮下移植感染高危型HPV人宫颈鳞癌组织的方法,建立宫颈癌动物模型,研究其在裸鼠体内的成瘤性,并探讨其生物学特性。方法:取中分化及高分化人宫颈鳞状细胞癌癌组织两块分别接种于裸鼠腹部皮下,以建立人宫颈癌裸鼠模型,比较两组荷瘤鼠成瘤率、一般特性和移植瘤生长情况,85天后处死裸鼠,切除肿块做病理切片;PCR(聚合酶链式反应)检测肿瘤组织、外周血和肝等脏器HPV DNA表达情况。结果:接种后两组小鼠分别于第42天及第49天在接种部位可见结节,第80天后肿瘤块平均体积分别为(38.0±5.1)mm3、(30.2±4.6)mm3,肿瘤移植成功率分别为80%及60%,移植瘤生长以局部浸润为主,未见转移瘤。组织学检查所有移植瘤与种植前肿瘤组织病理检查结果一致,HPV DNA呈阳性,且为高危型人乳头瘤病毒HPV16、18型阳性,亦与原宫颈癌病人HPV16、HPV18感染一致;外周血与肝等脏器HPV DNA呈阴性。结论:裸鼠人宫颈癌组织模型成瘤率较高,且分化程度越低其成瘤率越高,操作简便,成本低,且保留了HPV感染生物学特性,为探索宫颈癌的发病机制和临床治疗提供了重要的科研工具。

人胃癌SGC7901/VCR裸鼠移植瘤模型的建立及耐药性检测

目的建立人胃癌SGC7901/VCR裸鼠移植瘤模型,并检测其多药耐药性,为进行肿瘤多药耐药逆转剂的筛选和体内实验研究奠定基础。方法采用皮下接种法建立裸鼠移植瘤模型;观察裸鼠生长状况;移植瘤生长情况;进行瘤重及瘤体积比较;移植瘤P-gp耐药蛋白表达;原代培养细胞,检测移植瘤模型多药耐药性。结果人胃癌SGC7901/VCR裸鼠移植瘤组织病理学检查为低分化腺癌,移植瘤组织原代细胞培养后,P-gp表达强阳性+++,具有多药耐药性,模型建立成功。结论成功建立了人胃癌SGC7901/VCR裸鼠多药耐药移植瘤模型,为胃癌耐药研究提供了较理想的动物模型。

吉西他滨联合奥沙利铂对人胆管癌裸鼠移植瘤模型的药效实验研究

目的观察吉西他滨联合奥沙利铂对荷人胆管癌裸鼠移植瘤的治疗效果。方法培养人胆管癌裸鼠移植瘤模型,将49只荷人胆管癌裸鼠分成7组,每组7只,分别为空白对照组,奥沙利铂(A)组,吉西他滨(B)组,A+B组,2A+B组,A+2B组和2A+2B组,于分组当天腹腔注射奥沙利铂,第2天注射吉西他滨。给药剂量:奥沙利铂1.125mg/kg,吉西他滨50mg/kg,生理盐水0.3mL/只。第24天处死裸鼠后测量肿瘤标志物,进行移植瘤病理及流式细胞仪分析。治疗期间每周2次测量肿瘤直径,计算相对肿瘤增殖率。结果荷人胆管癌裸鼠移植瘤成瘤率100%。A、B组第24天相对肿瘤增殖率分别为39.78%和45.73%;2A+2B组相对肿瘤增殖率最低,为32.05%。治疗组与空白对照组相比,肿瘤标志物、病理分析及MTT分析均有显著差异。结论吉西他滨、奥沙利铂对荷人胆管癌裸鼠移植瘤有抑制作用,两药联合有助于提高疗效。

肺癌A549耐药裸鼠移植瘤模型的建立

目的探讨肺癌A549耐药裸鼠移植瘤模型的建立方法,为克服肿瘤多药耐药新药的筛选提供体内研究的模型。为进行肿瘤的体内相关研究和抗癌药物的筛选提供实验基础。方法使用顺铂诱导肺癌A549细胞,以建立其多药耐药细胞株A549/DDP;MTT细胞毒实验检测细胞对顺铂的敏感性;皮下接种法建立裸鼠移植瘤模型;绘制移植瘤生长曲线,观察其增值特性。结果经过8个月的诱导建立了肺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP;MTT细胞毒实验结果显示与A549细胞比较,A549/DDP细胞对顺铂约耐药8倍,并且A549/DDP耐药细胞建立的裸鼠移植瘤仍然保持对顺铂的耐药性;生长曲线结果显示A549/DDP细胞裸鼠移植瘤的增殖速度与A549细胞之间没有显著性差异。结论成功建立了肺癌A549/DDP耐药细胞裸鼠移植瘤模型,可为肺癌耐药的研究提供较理想的动物模型。

组织块移植法建立人肺癌裸鼠移植瘤模型

肺癌对人类的健康构成了严重的威胁,人肺癌裸鼠移植瘤模型的建立对于肺癌的研究是一项重要的工具.建立肺癌移植瘤模型的方法主要有细胞培养移植法、组织块移植法和匀浆液移植法.组织块移植法建立的模型能最大限度地模拟人体内环境,是一种理想的模型.就组织块移植法建模的操作方法及当前研究进展作一综述.

人红白血病多药耐药细胞裸鼠移植瘤模型建立的初步研究

目的:建立耐药特性稳定的裸鼠移植瘤动物模型,为进行体内肿瘤耐药机制研究和逆转药物的筛选提供实验模型。方法:体外培养白血病细胞系k562/A02及k562细胞,建立裸鼠的皮下肿瘤,K562/A02耐药细胞接种于裸鼠右背侧皮下,而亲本K562细胞接种裸鼠左背侧皮下,接种细胞数分别为1×106、5×106、1×107、5×107细胞/只,观察肿瘤成瘤情况及生长特性,并比较体内耐药模型与体外细胞株耐药倍数的变化,同时利用免疫组织化学染色对裸鼠K562/A02移植瘤多药耐药蛋白Pgp进行鉴定。结果:1)K562裸鼠移植瘤的成瘤率为78.13%,K562/A02裸鼠移植瘤的成瘤率为81.25%,大约于第5-10天成瘤,两种肿瘤生长速度无明显差别;2)裸鼠K562/A02移植瘤肿瘤细胞和体外培养原代细胞对阿霉素的IC50分别为169.38ug/m l和181.69ug/m l,而K562移植瘤和体外k562细胞的IC50分别为3.47ug/m l和3.61ug/m l,耐药倍数无明显差异;3)K562/A02裸鼠移植瘤肿瘤细胞Pgp表达稳定。结论:以K562/A02细胞建立的裸鼠移植瘤模型,仍保持近似体外的耐药活性,为耐药机制和逆转研究提供了良好的体内模型。

肝原位移植瘤裸鼠模型的建立及活体荧光成像检测

目的建立能够通过活体荧光成像系统实时监测肿瘤进展的肝原位移植瘤裸鼠模型。方法重组质粒pcDNA3.1-Luc转染细胞构建稳定表达荧光素酶的PLC/PRF/5肝癌细胞株,将该细胞注入裸鼠肝脏实质内,应用活体成像技术动态监测肿瘤进展情况,解剖荧光信号阳性裸鼠观察肿瘤组织生长情况。免疫荧光检测肿瘤组织中HBsAg表达。结果对裸鼠肝原位移植瘤应用活体荧光系统成像,在肿瘤细胞注射部位检测到荧光信号,解剖动物后可在肝脏组织中观察到异质细胞团块。免疫荧光证实移植瘤中有HBsAg表达。结论肝脏原位移植瘤裸鼠模型建立成功,为抗肝癌药物的研发提供了工具。

普萘洛尔对胶质母细胞裸鼠移植瘤模型的干预作用

目的探讨普萘洛尔对胶质母细胞瘤的干预效果。方法应用U251细胞系建立裸鼠移植瘤模型,待平均瘤体增长至约100 mm 3体积时,将移植瘤模型裸鼠随机分为对照组和实验组,对照组给予安慰剂、实验组给予普萘洛尔灌胃,观察裸鼠体重及肿瘤生长情况,第13天处死小鼠,采集肿瘤组织行VEGFA、HIF1A免疫组化检测。结果两组肿瘤体积及VEGFA蛋白表达无统计学意义(P>0.05),HIF1A蛋白表达有统计学意义(χ^(2)=4.70,P=0.03)。结论普萘洛尔可抑制U251细胞系裸鼠移植瘤模型肿瘤的HIF1A蛋白表达,对肿瘤体积及VEGFA蛋白表达无明显影响。

莪术醇与奥沙利铂联合肿瘤内注射对裸鼠胃癌移植瘤生长、瘤细胞增殖的影响及其机制

目的观察莪术醇与奥沙利铂联合肿瘤内注射对裸鼠胃癌移植瘤生长、瘤细胞增殖的影响,并探讨其机制。方法 20只裸鼠,建立胃癌移植瘤模型,将其随机分为对照组、莪术醇组、奥沙利铂组、联合组各5只,对照组肿瘤内注射生理盐水(0.05 m L/10 g),莪术醇组肿瘤内注射莪术醇(100 mg/kg),奥沙利铂组肿瘤内注射奥沙利铂(30 mg/kg),联合组肿瘤内注射莪术醇(100 mg/kg)与奥沙利铂(30 mg/kg),每4 d 1次,共4次。观察各组肿瘤生长情况,MTT法测算各组肿瘤组织中的瘤细胞存活率,荧光定量PCR检测各组肿瘤组织Bcl-2、Caspase-3 mRNA,免疫组化法检测各组肿瘤组织Bcl-2、Caspase-3蛋白。结果与对照组相比,联合组、莪术醇组、奥沙利铂组肿瘤体积小、重量低、瘤细胞存活率低、Caspase-3表达高、Bcl-2表达低,且联合组变化更明显(P均<0.05)。结论莪术醇联合奥沙利铂肿瘤内注射可抑制裸鼠胃癌移植瘤生长并抑制瘤细胞增殖,这可能与上调Caspase-3、下调Bcl-2表达有关。

SLP-2 siRNA对裸鼠胃癌移植瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨SLP-2siRNA对裸鼠胃癌移植瘤细胞增殖及凋亡的影响.方法:设计合成化学修饰的SLP-2siRNA,将胃癌细胞SGC-7901接种于裸鼠皮下建立裸鼠胃癌移植瘤模型,随机分为转染SLP-2siRNA组、阴性对照组和空白对照组,于肿瘤局部分别多点多次注射化学修饰SLP-2siRNA、阴性对照siRNA及生理盐水.检测3组移植瘤细胞增殖及凋亡状况,RT-PCR及免疫组织化学技术检测移植瘤细胞内SLP-2mRNA及蛋白的表达.结果:与两对照组相比,注射化学修饰的SLP-2siRNA后,裸鼠胃癌移植瘤细胞生长速度减慢、移植瘤体积减小(P=0.009,P=0.003).抑制瘤率分别为26.74%和30.15%,细胞凋亡无明显变化(P>0.05),肿瘤细胞内SLP-2mRNA及蛋白的表达量降低.结论:SLP-2siRNA可抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长,但对细胞凋亡无影响,提示SLP-2基因参与促进胃癌细胞增殖.

白细胞介素24对裸鼠人宫颈癌Hela细胞移植瘤抑制作用的探讨

目的:探讨基因重组质粒pDC316-hIL-24对裸鼠人宫颈癌模型的肿瘤生长及凋亡的作用。方法:于5周龄裸鼠腋窝外侧皮下注射1×107个/mL Hela细胞悬液100μL,将15只构建成功的人宫颈癌Hela细胞裸鼠模型随机分为3组,分别于瘤体内注射转染试剂Lipofectamine 2000与基因重组质粒pDC316-hIL-24(A组)、空质粒pDC316(B组)以及磷酸盐缓冲液(C组),比较干预后各组移植瘤的体积及抑瘤率。应用RT-PCR法测定移植瘤中hIL-24的表达,HE染色观察各组肿瘤组织形态学变化,免疫组化方法研究肿瘤细胞凋亡情况。结果:①IL-24基因成功转染入肿瘤细胞并在其中成功表达,至实验结束时,B组和C组移植瘤体积大于A组(F=63.395,P<0.05);A组的平均抑瘤率高于B组(t=130.920,P<0.01)。②病理学观察见A组宫颈癌细胞有局灶性坏死,细胞变大,胞质疏松,核深染,可见核固缩、核溶解、核碎裂,染色质成团状。③免疫组化结果显示,A组BCL-2蛋白表达低于其他2组(F=6.164,P<0.05),而其同源蛋白BAX表达高于其他2组(F=58.426,P<0.05)。结论:基因重组质粒pDC316-hIL-24对宫颈癌裸鼠模型肿瘤生长具有明显的抑制作用,其可能通过激活细胞凋亡通路而诱导肿瘤细胞凋亡。

人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型的建立和改进

目的:建立人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型。方法:用人胃癌细胞SGC-7901悬液接种于裸鼠皮下,形成稳定传代的皮下移植瘤。将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆肌层,观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化等生物学特性。结果:肿瘤组织块保留了人胃腺癌的组织学特点,人胃癌裸鼠原位移植模型成瘤率为100%(20/20),肝脏转移率为45%(9/20)。结论:人胃癌裸鼠原位移植瘤模型的生物学行学与人胃癌自然生长和转移过程相似,为研究人胃癌转移机制提供了理想的模型。

一株人卵巢小细胞癌裸小鼠移植瘤模型的建立

人卵巢小细胞癌移植于BALB/c裸小鼠,已传12代,移植瘤经染色体分析和DNA印迹分析,人Alu顺序均为人体细胞成分。光镜下大、小二类细胞形态结构基本稳定,并与原代细胞相似。移植瘤内尚见中等大小的细胞,对三类细胞的关系有待进一步研究。

miR-21对食管癌移植瘤模型的作用研究

目的探讨微小RNA-21(miR-21)对食管癌移植瘤模型肿瘤的作用。方法建立裸鼠食管癌移植瘤模型,分别用miR-21(miR-21组)、miR-21抑制剂(miR-21抑制剂组)和生理盐水进行治疗;应用免疫组化技术检测肿瘤组织中增殖细胞核抗原(Ki-67)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase-3)、锌脂蛋白转录因子(Snail)蛋白的表达。结果成功建立食管癌裸鼠移植瘤模型,miR-21组和miR-21抑制剂组肿瘤大小差异有统计学意义(P<0.05),miR-21组Ki-67阳性表达率[(86.28±14.3)%]和Snail阳性表达率[(88.76±12.35)%]明显高于生理盐水组[(46.72±15.68)%和(72.35±8.36)%]及miR-21抑制剂组[(19.34±10.23)%和(35.26±10.28)%];而miR-21组和生理盐水组的Caspase-3阳性率[(35.27±16.12)%和(45.62±23.32)%]明显低于miR-21抑制剂组[(76.45±18.32)%]。结论 miR-21与食管癌生长和转移相关,抑制miR-21可抑制移植瘤生长和转移,并且通过影响Ki-67、Caspase-3和Snail的表达发挥作用。提示miR-21可作为食管癌临床治疗候选靶基因。

胃癌单克隆抗体在裸鼠移植瘤中的免疫定位和显像

本文采用Ｉｏｄｏｇｅｎ法将鼠抗人胃癌单克隆抗体ＲＳＦ９（ＩｇＭ）予以１３１Ｉ标记，研究ＲＳＦ９在荷人胃癌裸鼠中的定位和显像能力。结果表明，ＲＳＦ９在体内能特异性地与肿瘤组织结合，Ｔ／ＮＴ比值随时间延长逐渐升高，９６ｈＴ／ＮＴ比值均大于２．５，瘤／血比值为２．６９，肿瘤定位指数达５．１８，ＳＰＥＣＴ得到清晰的肿瘤图像。ＲＳＦ９具有良好的体内导向定位能力。ＩｇＭ型单抗也可用于肿瘤显像。

白细胞介素24和替尼泊苷联合抑制裸鼠人胶质瘤模型肿瘤生长的机制研究

目的观察白细胞介素24(IL-24)与替尼泊苷(VM-26)对裸鼠人胶质瘤模型肿瘤生长的抑制作用是否相互协同增效。方法先建立人胶质瘤动物模型,随机分组,瘤内注射Ad5F35-IL-24,腹腔注射VM-26,观察肿瘤生长情况;再用Western blot分析IL-24蛋白表达情况。接着用免疫组织化学染色检测各组肿瘤组织的血管密度(MVD)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。结果 Ad5F35-IL-24感染胶质瘤组织后IL-24蛋白高表达,Ad5F35-IL-24+VM-26组的胶质瘤的生长受到抑制最明显,Ad5F35-IL-24+VM-26组的微血管生成明显减少(P<0.05),且其VEGF和bFGF表达也明显减少(P<0.05)。结论 IL-24和VM-26对裸鼠人胶质瘤模型肿瘤生长的抑制作用相互协同增效,其机制可能与IL-24诱导胶质瘤组织中VEGF和bFGF表达的减少,抑制胶质瘤微血管生成有关。