蒙古黄芪愈伤组织诱导及褐化抑制

分别以蒙古黄芪(Astragalus mongholicus Bunge)的子叶、下胚轴和胚根为外植体,在附加不同浓度的生长素NAA和细胞分裂素6-BA组合的MS培养基上进行愈伤组织初代培养,并对其继代培养中出现的褐化现象进行了抑制.实验结果表明,下胚轴为最佳外植体,在各个激素组合中的诱导率均达到最高,其中在添加了0.5 mg.L-16-BA和0.15 mg.L-1NAA的培养基中诱导率可达到100%.在继代培养中,向培养基中添加0.1 mg.L-1VC时,能有效降低愈伤组织的褐化.

枇杷属植物茎尖离体培养及褐化抑制研究

【目的】建立野生枇杷成年树茎尖离体培养技术并抑制培养过程中的褐化。【方法】以华南农业大学枇杷属植物种质资源圃所收集保存的14个分类单元的野生枇杷,以及台湾枇杷ב解放钟’枇杷的杂交后代茎尖为培养试材,进行了成年树茎尖的离体培养及培养过程中褐化抑制的研究。研究了不同培养基、植物生长调节剂的配比、抑制褐化物质等对茎尖褐变程度的影响。分析了不同枇杷属植物在离体培养和褐化上差异性。【结果】不同植物生长调节剂及其浓度组合对同种或不同种枇杷的离体培养和抑制褐化作用有很大的差异性。其中,栎叶枇杷老挝变种在MS+ZT0.5 mg·L-1+IBA0.1 mg·L-1条件下获得了100%的萌动率,且无褐化;台湾枇杷ב解放钟’枇杷的杂交后代的茎尖离体培养的萌芽率都达到100%,相对其他枇杷属植物比较容易进行离体培养;而大花枇杷、香花枇杷、窄叶枇杷、细叶枇杷和小叶枇杷褐化程度较高(66.67%~100%),茎尖的萌动率很低(0~26.67%);窄叶枇杷茎尖培养的萌动是最困难的,但在培养基中添加TDZ的条件下,褐化率降至0,萌动率达到100%。试验发现MS+TDZ0.5 mg·L-1+BA1.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1的配方组合对所试验的各种野生枇杷茎尖培养都有很强的抑制褐化作用(0~33.33%),并且使茎尖上的芽在1周内就能开始萌动,生长势也最好。【结论】通过不断优化各种培养技术和条件使枇杷属植物的茎尖离体培养和抑制褐化取得了实质性的进展,为以后快速繁殖、种质资源保存甚至转基因奠定一定的技术基础。

珍稀濒危植物掌叶木愈伤组织诱导与褐化抑制研究

以掌叶木[Handeliodendron bodinieri (Lévl.) Rehd.]的叶片、茎段为外植体,在含有不同植物激素的培养基上诱导愈伤组织。结果表明,最佳诱导培养基为MS+2,4-D1.0mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L,最佳增殖培养基为3/4B5+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+VC0.1%。2,4-D与NAA联合使用利于诱导率的提高;适量的6-BA、KT利于愈伤组织质量的改善;6-BA加KT的双因子组合没有单因子的诱导效果显著;采用B5培养基代替MS培养基,且将大量元素降为3/4,外加VC0.1%,并进行暗培养,能有效抑制愈伤组织的褐化。

香蕉愈伤组织诱导培养中褐化抑制剂的筛选

为解决香蕉愈伤组织诱导培养过程中的外植体的褐化现象,分别用AgNO3(10,20 mg·L-1),AC(1,2,3 g·L-1),PVP(1,2 g·L-1),VitC(100,200 mg·L-1)等防褐化剂,对香蕉的愈伤组织诱导进行防褐化研究。结果表明:外植体培养10 d后,所有防褐化处理实验组的褐化率均低于对照组,说明在愈伤组织诱导的早期,不同的防褐化剂均有一定的防褐化效果;随着培养时间延长,不同的防褐化处理逐渐出现差异,在愈伤组织诱导培养40 d后,活性炭的防褐化效果最好,其中1 g·L-1活性炭的褐化率仅为20%,效果最佳。

蝴蝶兰组织培养褐化抑制研究

以蝴蝶兰大红袍花梗经诱导萌发生成的丛生芽为试验材料,对培养温度、活性炭、椰子汁和转接周期4个因素设置正交试验,比较不同处理对丛生芽增殖过程中抑制褐化的效果,筛选出抑制褐化的最优方法,为其工厂化生产提供理论参考。结果表明,活性炭能显著抑制褐化且对褐化的影响最大,各因素对褐化影响效应大小排序为活性炭>转接周期>温度>椰子汁;活性炭1.0 g/L、转接周期10 d、温度25℃、椰子汁浓度150 m L/L为抑制褐化的最优处理。

核桃组培中抑制褐化现象初探

以薄皮核桃茎尖为试材 ,对其分化生长过程中的褐化现象进行初步研究 ,经多次试验表明 ,在抑制褐化及保证茎尖正常分化生长时期 ,主要采取二步法 :①接种于 1 2MS +活性碳 2g培养基中 ,置于 5℃冰箱中黑暗培养 7d后取出 ;②转接于DKW +6 -BA 1 0mg L +IAA 0 0 1mg L +2 0 %硫代硫酸钠 5ml L培养基中置于 2 5℃ ,无光照环境下培养 ,每隔 1 5～ 2 0d转换培养基 ,此方法抑制褐化效果为佳 。

香果树愈伤组织诱导及抗褐化研究

以珍稀濒危植物香果树的叶片、叶柄、茎段为外植体,进行胚性愈伤组织诱导,并针对愈伤组织继代培养中褐化严重的问题进行抗褐化剂的筛选。实验结果表明,叶柄是香果树愈伤组织诱导的最适外植体,依次用75%酒精处理60 s、0.2%HgCl_(2)处理15 min灭菌效果最好,并选定了香果树愈伤组织最适诱导培养基和继代培养基。

野生软枣猕猴桃组织培养及褐变处理

以野生软枣猕猴桃嫩芽、幼嫩叶片以及茎段作为外植体,研究野生软枣猕猴桃组织培养整个过程,以建立快速高效的野生软枣猕猴桃再生体系。结果表明:最适宜的诱导叶片、茎段愈伤组织的培养基分别为MS+0.5mg/L6-BA+1.0mg/LNAA和MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA;诱导出愈伤组织在MS+0.6mg/L6-BA+0.05mg/LNAA培养基上能很好地分化不定芽苗;诱导幼芽产生丛生芽的培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA;较适宜的生根培养基为1/2MS。愈伤组织继代中发现细胞生长素NAA可以防止愈伤褐化。在愈伤组织分化中,发现将分化出的芽苗再次愈伤化,可以提高分化率。

软枣猕猴桃组织培养过程中外植体褐变的防止

以软枣猕猴桃带芽茎段为试材,对其分化过程中褐变现象进行研究。经多次试验初步表明：接种MS＋6-BA 1.0 mg·L^-1＋NAA 0.01 mg·L^-1＋聚乙烯吡咯烷酮（PVP）3%的培养基,每隔10～15 d转换1次培养基可有效控制褐变并保持植株正常生长。