园艺植物组织培养中的褐化现象及抗褐化研究进展

褐化是指植物组织培养中常见的细胞生长不良情况,已成为近年来植物组织培养的科研热点之一。文章主要针对我国国内最新研究进展,阐明了细胞褐化现状及其主要机制与产生原因,提出了抑制褐变的有效对策,以供参考。

核桃组培中抑制褐化现象初探

以薄皮核桃茎尖为试材 ,对其分化生长过程中的褐化现象进行初步研究 ,经多次试验表明 ,在抑制褐化及保证茎尖正常分化生长时期 ,主要采取二步法 :①接种于 1 2MS +活性碳 2g培养基中 ,置于 5℃冰箱中黑暗培养 7d后取出 ;②转接于DKW +6 -BA 1 0mg L +IAA 0 0 1mg L +2 0 %硫代硫酸钠 5ml L培养基中置于 2 5℃ ,无光照环境下培养 ,每隔 1 5～ 2 0d转换培养基 ,此方法抑制褐化效果为佳 。

防褐剂对枇杷叶片组织培养中褐化现象的抑制效应

选取漂白粉、Na_2S_2O_3、AgNO_3、活性炭(AC)、维生素C、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等7种防褐剂对枇杷叶片进行防褐化效果的研究。每种防褐剂都取不同的浓度进行平行试验。设置不添加任何防褐剂及暗培养做对照。结果表明,0.5mg/L的AgNO_3对叶片的防褐效果最好,可以将褐化率降低至23.3%;AC的抗褐化效果最差,褐化率将近100%;暗培养对褐化的影响没有显著效果。

几种防褐剂对马铃薯愈伤组织培养褐化现象的抑制效应

[目的]在马铃薯的组织培养过程中存在着严重的外植体褐化现象。外植体表面的酚类物质容易氧化而生成褐色醌类,严重影响愈伤组织的诱导过程,适当控制培养条件可抑制褐化。[方法]选取硫代硫酸钠(Na2S2O3)、活性炭、维生素C、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)5种抗褐剂进行防褐化效果的研究。每种抗褐剂都取不同的浓度进行平行试验。培养基为1/2 MS+0.3%琼脂+1.5%蔗糖+1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L 2,4-D,于15℃下暗培养,每周转瓶1次。最后,统计褐化率,比较不同抗褐剂的作用效果。[结果]各种抗褐剂对马铃薯的生长均有一定的抗褐效果,其中,2.0 g/L的硫代硫酸钠和8.0 mg/L柠檬酸的防褐效果最好,可以将褐化率降低到15%以下。[结论]对生长的外植体添加一定的防褐剂有助于抑制组织培养中外植体的褐化现象。

抑制核桃组培中的褐化现象初探

以薄皮核桃茎尖为试材 ,对其分化生长过程中的褐化现象进行研究。经多次试验初步表明 ,为抑制褐化及保证茎尖正常分化生长 ,先将茎尖接种于 1 /2MS +2 g活性碳的培养基中 ,置于 5℃冰箱中黑暗培养7天后取出 ,再转接于DKW +6-BA 1 .0mg/L +IAA 0 .0 1mg/L +5ml2 0 %硫代硫酸钠的培养基中 ,置于 2 5℃室内光照环境下培养 ,每隔 1 5～ 2 0天转换 1次培养基 ,能有效地抑制褐化 ,确保核桃茎尖在整个培养过程中正常分化生长。

植物组织培养中褐化现象控制方法分析

细胞若是受到损坏,会破坏细胞区隔作用,同时氧化物醌类物质和毒性酚类物质均会使组织发生褐变,使植物组织培养失败。在组织培养中,褐变情况是由外植体材料、生理状态、培养条件等因素共同决定的,对此可实施低温培养、添加抗氧化剂、勤转瓶的方式把控褐变。文章主要阐述植物组织培养中褐化现象控制方法,以供参考。

果树组织培养中褐化现象的研究进展

介绍了果树植物组织培养褐变的发生机理,发生褐变的主要果树种类,综述了近年来果树植物组织培养中参与褐变现象的酚类物质、酚氧化酶以及多种影响因素的研究进展。

植物组织培养褐化现象研究进展及防治方法

综述了近年来的植物组织培养的褐化现象,简要分析了发生机制及影响因素,总结了常用的褐化防治方法,以期能够为以后的研究提供一些理论帮助。

牡丹组织培养中褐化的发生原因与防止方法的研究

在牡丹组织培养过程中,褐化现象普遍发生,并影响着牡丹培养物的正常生长与增殖。因此通过改变培养条件、培养方式以及在培养基中添加抑褐剂的方法,对品种为青龙卧墨池的牡丹组培物褐化的防止进行了研究,结果表明:添加生长素会加剧启动培养中外植体的褐化程度,暗培养对愈伤组织抑制褐化很有效,悬浮培养未能减缓褐化却能使愈伤快速增殖。吸附剂聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和结冷胶(Phytagel)能够有效地缓解褐化。抑褐剂硫代硫酸钠(Na2S2O3)、抗坏血酸(VC)和铜试剂(DDTC)在牡丹的组培中加剧了组织培养物的褐化程度。

植物组织培养中褐化问题的研究进展

褐化是植物组织培养中一种常见的不利现象。本文重点介绍褐化现象并对其产生的机理和影响褐化的因素的研究进展作以评述,同时提出相关防止措施。

采用低pH值和适量的玉米素、ABA配合恢复褐化的水稻愈伤组织

在建立水稻体细胞悬浮培养体系的实验中,我们观察到当将胚性愈伤组织从固体培养基转入液体分化培养基进行悬浮培养并去掉2.4-D 时,随着培养时间的延长,愈伤组织往往出现褐化现象。与这种情况类似的是,当将悬浮培养的愈伤组织和成熟胚状体转入固体培养基时,也出现严重的褐化现象。这种褐化现象一般认为是不可逆的,伴随着胚性愈伤组织和成熟胚状体的褐化,胚性愈伤组织逐渐丧失分化能力,成熟胚状体则逐渐死亡。

影响芸苔属植物(Brassica)组织培养过程中外植体褐化的因素

就油菜转基因过程中外植体褐化现象发生的可能原因进行了探讨。研究表明,转导的农杆菌菌株、菌液浓度、预培养和共培养时间对外植体发生褐化无直接影响,虽存在差异,但不显著。在培养基中加入抗氧化试剂PVP(聚乙烯吡咯啉酮)和Vc(抗坏血酸),PVP比Vc对褐化的抑制作用更大。培养温度对褐化的影响是显著的,当培养温度高于30℃时,外植体的褐化程度非常严重,褐化发生率(褐化外植体数/总外植体数)为100%;而当培养温度为25～26℃时,褐化率大大降低(17.6%),褐化程度也较轻。此外,光照时间和光照强度对褐化也有影响,光照时间过长、光照强度过大都使褐化现象变得严重。

香蕉愈伤组织诱导培养中褐化抑制剂的筛选

为解决香蕉愈伤组织诱导培养过程中的外植体的褐化现象,分别用AgNO3(10,20 mg·L-1),AC(1,2,3 g·L-1),PVP(1,2 g·L-1),VitC(100,200 mg·L-1)等防褐化剂,对香蕉的愈伤组织诱导进行防褐化研究。结果表明:外植体培养10 d后,所有防褐化处理实验组的褐化率均低于对照组,说明在愈伤组织诱导的早期,不同的防褐化剂均有一定的防褐化效果;随着培养时间延长,不同的防褐化处理逐渐出现差异,在愈伤组织诱导培养40 d后,活性炭的防褐化效果最好,其中1 g·L-1活性炭的褐化率仅为20%,效果最佳。

金钱树愈伤组织的诱导及其褐化的防止

试验结果表明,采用培养基MS+NAA1mg/L+6-BA2mg/L,对金钱树的老熟叶片进行培养,35天后其愈伤组织的诱导率高达80%。在继代培养中,采用液体培养对防止愈伤组织的褐化效果最佳,在培养基中添加1g/L的活性炭,采用N6培养基而不用MS培养基,对防止愈伤组织的褐化也有较好的效果。

金丝小枣组织培养中的抗褐化研究

近几年，利用金丝小枣的主芽、不定芽、茎段、胚等进行组织培养，已经有很多成功的报道。但对金丝小枣组织培养中褐化问题的研究，还鲜见报道。金丝小枣是落叶木本植物，组织中含有较高的酚类化合物，组织培养中褐化现象严重，对诱导外植体的脱分化和再分化产生严重影响，甚至导致组培苗的褐化死亡。本文以乐陵无核金丝小枣为材料，研究了影响外植体褐化的有关因素，旨在探索控制褐化现象发生的有效途径。

蒜头果组培褐化控制技术

采用正交试验探究了影响蒜头果组培期间褐化率的几种因素,并确定了褐化率的最佳控制方案。结果表明;外植体类型对褐化率影响最为明显,其次是抗氧化剂类型和消毒方式,培养基类型的影响最弱。用半木质化的枝条作为外植体,使用0.3%氯化汞+2%次氯酸钠进行消毒处理后,将其放置到添加了聚乙烯吡咯烷酮抗氧化剂的1/2WPM培养基中,能够使蒜头果的褐化率降到最低。

马缨杜鹃组织培养中抗褐技术研究

以马缨杜鹃2 a生带芽茎段为外植体,在组织培养过程中研究了光照强度、温度、抗氧化剂、吸附剂等对褐化的影响。结果表明:暗培养的抗褐效果较光照培养好,暗培养的最佳时间为10 d。在暗培养条件下,培养基中添加1.0 g/L Ac抗褐效果最好,转接是削弱或减轻褐化现象的有效措施,把二者结合起来褐化率可以降到15.03%。低温处理、添加AgNO3和PVP不能有效地抑制褐化。