番茄褐色皱纹果病毒(tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)严重威胁番茄等茄科园艺作物的生产安全。本研究根据其外壳蛋白(coat protein,CP)基因及其同属病毒的差异序列,设计了特异性重组酶介导等温核酸扩增技术(recombinase-aided ...番茄褐色皱纹果病毒(tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)严重威胁番茄等茄科园艺作物的生产安全。本研究根据其外壳蛋白(coat protein,CP)基因及其同属病毒的差异序列,设计了特异性重组酶介导等温核酸扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)引物,并基于CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了靶向RT-RAA扩增产物的CRISPR RNA(crRNA)。通过优化获得了检测信号最强的反应体系,其中报告基因FQ终浓度为600nmol/L、Cas12a和crRNA终浓度分别为200nmol/L和1000nmol/L,最终总反应时间仅为30 min。该方法可特异性检测ToBRFV,对携带ToBRFV的番茄样品RNA检测灵敏度为RT-PCR和RT-qPCR的10000和100倍,检测限为3.46fg/μL。阳性样品验证结果显示,本研究建立的RT-RAA-CRISPR/Cas12a检测技术可以在不同来源的辣椒、番茄侵染的植物叶片、果实及种子中检测到ToBRFV,表明该技术可用于番茄褐色皱纹果病毒的快速、灵敏的可视化检测。展开更多
番茄褐色皱果病毒Tomato brown rugose fruit virus(ToBRFV)主要为害番茄、辣椒等农作物,自2014年被首次发现后,扩展迅速,广泛传播,已扩散至全世界53个国家,经济和生态损失不断加大,辽宁省被该病毒入侵的可能性不断提高,有必要对该病毒...番茄褐色皱果病毒Tomato brown rugose fruit virus(ToBRFV)主要为害番茄、辣椒等农作物,自2014年被首次发现后,扩展迅速,广泛传播,已扩散至全世界53个国家,经济和生态损失不断加大,辽宁省被该病毒入侵的可能性不断提高,有必要对该病毒传入辽宁省的风险进行分析。文中按照有害生物风险分析程序开展安全性评估,采取多指标的评价方法,对番茄褐色皱果病毒的入侵风险进行定性和定量分析,确定番茄褐色皱果病毒入侵辽宁省的风险等级。番茄褐色皱果病毒是对辽宁省的番茄、辣椒种植和制种产业具有潜在威胁的有害生物,其综合风险值(R)为2.71,属于极高风险的有害生物,建议相关部门采取针对性防控措施,严防其传入辽宁省。展开更多
番茄褐色皱果病毒Tomato brown rugose fruit virus(ToBRFV)作为新发现的植物病毒,主要为害番茄、辣椒等农作物,2014年第1次发现以来,扩展迅速,在全世界已经广泛传播并扩散。本文的主要内容包括番茄褐色皱果病毒在全世界的发生、扩散和...番茄褐色皱果病毒Tomato brown rugose fruit virus(ToBRFV)作为新发现的植物病毒,主要为害番茄、辣椒等农作物,2014年第1次发现以来,扩展迅速,在全世界已经广泛传播并扩散。本文的主要内容包括番茄褐色皱果病毒在全世界的发生、扩散和危害情况,主要种子贸易国家为防止该有害生物传播所采取的检疫措施,探讨防治和脱毒处理的建议,希望有利于控制番茄褐色皱果病毒随进出口种子传播,保护我国生态安全。展开更多
文摘番茄褐色皱纹果病毒(tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)严重威胁番茄等茄科园艺作物的生产安全。本研究根据其外壳蛋白(coat protein,CP)基因及其同属病毒的差异序列,设计了特异性重组酶介导等温核酸扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)引物,并基于CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了靶向RT-RAA扩增产物的CRISPR RNA(crRNA)。通过优化获得了检测信号最强的反应体系,其中报告基因FQ终浓度为600nmol/L、Cas12a和crRNA终浓度分别为200nmol/L和1000nmol/L,最终总反应时间仅为30 min。该方法可特异性检测ToBRFV,对携带ToBRFV的番茄样品RNA检测灵敏度为RT-PCR和RT-qPCR的10000和100倍,检测限为3.46fg/μL。阳性样品验证结果显示,本研究建立的RT-RAA-CRISPR/Cas12a检测技术可以在不同来源的辣椒、番茄侵染的植物叶片、果实及种子中检测到ToBRFV,表明该技术可用于番茄褐色皱纹果病毒的快速、灵敏的可视化检测。
文摘番茄褐色皱果病毒Tomato brown rugose fruit virus(ToBRFV)主要为害番茄、辣椒等农作物,自2014年被首次发现后,扩展迅速,广泛传播,已扩散至全世界53个国家,经济和生态损失不断加大,辽宁省被该病毒入侵的可能性不断提高,有必要对该病毒传入辽宁省的风险进行分析。文中按照有害生物风险分析程序开展安全性评估,采取多指标的评价方法,对番茄褐色皱果病毒的入侵风险进行定性和定量分析,确定番茄褐色皱果病毒入侵辽宁省的风险等级。番茄褐色皱果病毒是对辽宁省的番茄、辣椒种植和制种产业具有潜在威胁的有害生物,其综合风险值(R)为2.71,属于极高风险的有害生物,建议相关部门采取针对性防控措施,严防其传入辽宁省。
文摘番茄褐色皱果病毒Tomato brown rugose fruit virus(ToBRFV)作为新发现的植物病毒,主要为害番茄、辣椒等农作物,2014年第1次发现以来,扩展迅速,在全世界已经广泛传播并扩散。本文的主要内容包括番茄褐色皱果病毒在全世界的发生、扩散和危害情况,主要种子贸易国家为防止该有害生物传播所采取的检疫措施,探讨防治和脱毒处理的建议,希望有利于控制番茄褐色皱果病毒随进出口种子传播,保护我国生态安全。