饲喂过瘤胃褪黑素对荷斯坦奶牛乳中褪黑素与其合成前体和代谢产物含量、褪黑素合成酶活性及生产性能的影响

本试验旨在探究过瘤胃褪黑素(RPMT)对荷斯坦奶牛乳中褪黑素(MT)与其合成前体和代谢产物含量、MT合成酶活性及生产性能的影响。选取1~4胎次、泌乳天数在200 d以内的健康荷斯坦奶牛32头,随机分为4组,分别为对照组与试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,每组8头。对照组饲喂正常全混合日粮(TMR),试验组在对照组饲粮的基础上分别添加140、160、180 mg/(头·d)RPMT,于每天14:00进行口腔投喂。试验期32 d,其中第0天为饲喂前1 d,第1~28天为饲喂期,第29~31天为停饲后3 d。试验组与对照组每日挤奶3次,分别在06:00、13:00和21:00。生产性能测定体系检测的乳样采样时间分别为第0、14、29天,MT含量及其他指标检测的乳样采样时间分别为第0、3、7、14、21、28、29、31天。结果表明:1)试验Ⅰ组06:00的乳脂率显著高于对照组与试验Ⅲ组(P<0.05),试验Ⅱ、Ⅲ组13:00的乳脂率显著高于对照组(P<0.05);试验Ⅱ、Ⅲ组13:00和21:00的乳糖率均显著高于对照组(P<0.05);同时,试验Ⅱ、Ⅲ组06:00和21:00的乳中体细胞数(SCC)均显著低于试验Ⅰ组(P<0.05),13:00的SCC显著低于对照组(P<0.05)。在06:00时,时间对乳糖率具有极显著影响(P<0.01),在13:00时,时间对乳脂率具有显著影响(P<0.05),组别与时间对乳糖率具有显著交互效应(P<0.05)。在21:00时,时间对上述指标均无显著影响(P>0.05),组别与时间也无显著交互效应(P>0.05)。2)试验Ⅲ组06:00、13:00和21:00的产奶量均极显著高于对照组与试验Ⅰ、Ⅱ组(06:00除外),但时间对产奶量无显著影响(P>0.05),组别与时间也无显著交互效应(P>0.05)。3)各试验组06:00、13:00和21:00的乳中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性均极显著高于对照组(P<0.01),而试验Ⅲ组仅在21:00的乳中吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)活性显著高于对照组(P<0.05)和极显著高于试验Ⅰ组(P<0.01)。在06:00、13:00时,时间对乳中GSH-Px、SOD活性均具有极显著影响(P<0.01);在21:00时,时间对乳中GSH-Px、SOD及IDO活性均具有极显著影响(P<0.01),组别与时间对乳中IDO活性也具有极显著交互效应(P<0.01)。4)各组间06:00、13:00的乳中MT、6-羟基-褪黑素(6-OH-MT)含量及5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(SNAT)、咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT)及N-乙酰基-5-羟色胺-甲基转移酶(ASMT)活性均无显著差异(P>0.05),而试验组21:00的乳中MT、5-羟色胺(5-HT)、6-OH-MT含量及SNAT、COMT及ASMT活性均极显著高于对照组(P<0.01)。在06:00时,时间对乳中6-OH-MT含量具有极显著影响(P<0.01),在06:00与13:00时,时间对乳中SNAT活性具有显著影响(P<0.05);在21:00时,时间对乳中MT、5-HT、6-OH-MT含量和SNAT、COMT、ASMT活性均具有极显著影响(P<0.01),组别与时间对乳中MT、5-HT含量具有极显著交互效应(P<0.01),对乳中6-OH-MT含量及SNAT、COMT、ASMT活性均具有显著交互效应(P<0.05)。结果提示,给荷斯坦奶牛饲喂RPMT能够提升乳中乳脂率、乳糖率,同时RPMT饲喂量越大时,产奶量越高,SCC越低;给荷斯坦奶牛提供外源RPMT能够提高泌乳期奶牛抗氧化能力,增加乳中MT合成,同时乳中MT合成前体物5-HT与代谢产物6-OH-MT及MT合成酶活性会随着MT含量而变化,即MT合成与代谢具有同步性。

褪黑素合成酶基因转化烟草及转化植株抗氧化系统变化

通过根癌农杆菌(含植物表达载体YXu55)介导的转化技术,将褪黑素生物合成酶-芳烷基胺N-乙酰转移酶(Arylalkylamine N-acetyltransferase,AANAT)与羟基吲哚O-甲基转移酶(Hydroxyindole O-methyltransferase,HIOMT)基因导入到烟草(秦烟95)中。对所获得的庆大霉素抗性烟草株系进行Southern blotting和RT-PCR分子生物学检测,结果表明,AANAT-HIOMT基因已成功地整合到烟草基因组中,并且可以在mRNA水平上进行转录。用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定转化株系的褪黑素含量表明,转AANAT-HIOMT基因烟草株系的褪黑素含量均明显高于pZP122(不含AANAT和HIOMT基因的空白质粒)转基因株系和未转基因的对照植株,证明AANAT-HIOMT基因在转基因植株中的表达增强了褪黑素的合成能力。对不同株系抗氧化系统的部分指标进行了测定,并与其亲本对照植株比较,发现AANAT-HIOMT基因在转基因植物中的表达引起超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性增加,谷胱甘肽(GSH)浓度以及总抗氧化能力升高,且没有引起膜脂质过氧化物丙二醛(MDA)的变化,说明转基因烟草抗氧化潜能得到提高。

不同光照时长对鸡睾丸褪黑素受体及合成酶表达的影响

旨在研究不同光照时长对鸡睾丸组织中褪黑素受体及合成酶表达规律的影响。选用20周龄体质量相近的AA(爱拔益加)种公鸡共120只,随机分为3组,分别使用8.0,11.5和16.0h光照处理,饲喂4周,饲喂结束后颈动脉放血致死,采取睾丸。采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测鸡睾丸组织中褪黑素受体及合成酶mRNA和蛋白表达量。结果表明,鸡睾丸组织中褪黑素受体MEL-1A、MEL-1B和MEL-1C,褪黑素合成酶AANAT的mR-NA及蛋白表达量随光照时长增加而显著降低(P<0.01);但合成酶ASMT表达量无显著变化(P>0.05)。综上,褪黑素受体MEL-1A、MEL-1B和MEL-1C及合成酶AANAT的表达与光照时长呈负相关。