西南鸢尾种子萌发特性研究

为揭示西南鸢尾(Iris bulleyana)种子休眠特性,以野生西南鸢尾种子为试验材料,对种子活力、种子吸水性、萌发抑制物及光照和温度对种子萌发率的影响进行研究;采用低温层积、GA3及温水浸泡等方法,探索打破西南鸢尾种子休眠的方法。结果表明,西南鸢尾种子种皮吸水良好,92 h吸水率达125%;温度对种子萌发影响较大,30℃较适宜种子萌发;种皮醇提液明显抑制白菜(Brassica pekinensis)种子萌发。低温层积可促进种子萌发,4℃低温层积60天时,种子萌发率达63.33%。西南鸢尾种子种皮含有醇溶性萌发抑制物,是其种子产生生理休眠的主要原因之一;4℃低温层积60天可有效打破种子休眠,GA3和温水浸泡处理均不能打破休眠。

西南鸢尾花色变异实时定量PCR内参基因的筛选与验证

为筛选适用于不同花色西南鸢尾花色合成途径相关基因表达分析的内参基因,本研究根据西南鸢尾及其白花变型白花西南鸢尾花蕾组织的转录组测序数据,筛选了6个常用内参基因(ɑ-TUB、β-TUB、AQP、ACT、GAPDH、UBQ),同时以百合18S做为对照内参基因,在西南鸢尾及其白花变型白花西南鸢尾的花蕾组织中,分别通过反转录PCR(RT-PCR)初筛和RT-qPCR检测表达量,并利用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件对7个候选内参基因的稳定性进行评价。RT-PCR初筛结果显示,7个候选内参基因引物的特异性均较好,在6个样品间没有明显差异;RT-qPCR分析表明,7个候选内参基因的表达量存在一定差异,其中18S表达量最高,UBQ最低;geNorm、NormFinder和BestKeeper分析结果表明,ACT表现最稳定,最适合做为内参基因,β-TUB相对稳定性最低;以Actin为内参对西南鸢尾类黄酮/花青素和类胡萝卜素2类色素合成途径中部分相关基因的RT-qPCR分析结果与转录组测序结果相一致。本研究为鸢尾属植物花色素合成相关基因表达分析内参基因的筛选以及鸢尾属植物资源利用和花色育种研究提供了理论参考。

西南鸢尾种子萌发特性初步研究

以西南鸢尾种子为研究对象，从种皮透水性、不同光温条件下种子萌发率以及低温湿沙层积和赤霉素处理对打破种子休眠的效应等方面对西南鸢尾种子萌发特性进行了初步研究。结果表明，种皮透水性良好，在浸水2h后吸水量迅速增加，在48h后达到吸水高峰。4种恒温15、20、25、30℃和3种变温20／10、25／15、30／20℃条件下，发现种子萌发最适温度为30／20℃，同时有光条件下的种子萌发率明显高于无光条件，即西南鸢尾种子萌发具有需光性。种子在5℃湿沙层积1～6个月后，萌发率提高18.3％～48.9％。而不同浓度的赤霉素（50～600mg／L）处理24h后均没有提高种子萌发率，以上结果表明西南鸢尾具有非深度生理体眠特性。

云南香格里拉西南鸢尾地上部分化学成分分析

利用广泛靶向代谢组学方法对云南香格里拉西南鸢尾(Iris bulleyana Dykes)地上部分的化合物类型和相对含量进行了详细分析。结果表明:在西南鸢尾地上部分共检测到11大类431种化合物,其中,黄酮类化合物最多(116种),占比26.9%;脂质类、氨基酸及其衍生物、酚酸类、核苷酸及其衍生物、有机酸类、生物碱类以及木脂素和香豆素类化合物分别有58、52、40、36、34、24和20种,占比分别为13.4%、12.1%、9.3%、8.4%、7.9%、5.6%和4.6%;鞣质类和萜类化合物较少,分别只有6和2种,占比各为1.4%和0.5%;其他化合物相对较多(43种),占比10.0%。总体来看,黄酮类化合物是西南鸢尾地上部分的主要化学成分,且西南鸢尾地上部分的很多化合物具有重要的药用价值,开发利用前景广阔。值得注意的是,西南鸢尾地上部分还含有葫芦巴碱、6-脱氧荞麦碱和色胺等生物碱类成分,推测这些生物碱类成分可能是中甸牦牛(Bos grunniens Linn.)拒食营养生长期西南鸢尾的主要原因。

鸢尾属植物花器官总RNA不同提取方法的比较分析

【目的】为了探索更适合鸢尾属植物花朵总RNA的提取方法。【方法】以新鲜的鸢尾(Iris tectorum Maxim.)和冷冻的西南鸢尾(I. bulleyana Dykes)的花蕾为材料,分别采用Trizol法、Trans Zol Plant试剂盒法和EasyPure Plant RNA Kit试剂盒法等3种方法提取它们的花蕾总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性,利用超微量紫外分光系统检测RNA的纯度和浓度,比较3种不同试剂提取得到的总RNA的质量和浓度。【结果】对于冷冻的西南鸢尾花蕾组织,只有Trans Zol Plant试剂盒法可以提取出纯度好、浓度高的RNA。而对于新鲜的鸢尾花蕾,3种方法提取出的RNA均可用于后续试验,但质量和浓度有一定差异,EasyPure Plant RNA Kit试剂盒法提取出的RNA质量最好且产量较高;Trans Zol Plant试剂盒法提取出的RNA质量较好但产量最高;Trizol法提取出的RNA品质较好但产量最低。【结论】综合植物样品材料、RNA纯度和得率及费用等因素,EasyPure Plant RNAKit试剂盒法适合需要获得高质量的RNA和有新鲜的植物材料时使用;TransZol Plant试剂盒法适合在需要大量RNA但对RNA的质量要求不是很高时使用,且较适合应用于冷冻的鸢尾花朵。研究结果为鸢尾属植物的分子生物学深入研究提供一定研究基础,也为其它植物花朵总RNA的提取提供必要的参考。

西藏野生鸢尾播种繁殖技术研究

野生西南鸢尾具有特殊的生态习性和生活型。且具有保水土、调节小气候、美化绿化等多方面功能。基于野生西南鸢尾种子自然条件下较难萌发情况下,通过秋季播种,低温春化和不同浓度赤霉素处理研究对野生鸢尾种子萌芽的影响大小。试验结果表明,秋季随采随播,低温沙藏法处理和100mg/mL的赤霉素有利于提高鸢尾种子的发芽率。