基于西洋参总皂苷调控TGF-β1/Smad信号通路对压力性尿失禁大鼠模型盆底功能恢复的影响

目的探究基于西洋参总皂苷调控TGF-β1/Smad信号通路对压力性尿失禁大鼠模型盆底功能恢复的影响。方法选取65只SPF级SD大鼠,将建模完成的45只大鼠,随机分作模型组、西洋参总皂苷低、高剂量组各15只,剩余的15只未做任何处理的大鼠作对照组。低剂量西洋参总皂苷组及高剂量西洋参总皂苷组的大鼠分别依据50、100 mg/kg的用量进行灌服西洋参总皂苷,对照组、模型组实施同等量的生理盐水(15 mL)予以灌服。比较各组大鼠病理组织学、盆底功能相关指标、尿动力学有关指标、膀胱中内压有关指标、盆底肌肉表面电信号以及TGF-β1/Smad信号通路蛋白相对表达量。结果与对照组对比,模型组、西洋参总皂苷低、高剂量组的大鼠尿道旋转角度、膀胱颈的活动度、残余尿量、排尿量、Smad2、Smad3表达升高,阴道静息压、收缩压、LPP、MBC、ALPP、排尿效率、Ⅰ类及Ⅱ类盆底肌纤维电位、TGF-β1、Smad7水平下降(P<0.05);与模型组相比,西洋参总皂苷低、高剂量组大鼠的阴道静息压、收缩压、LPP、MBC、ALPP、排尿效率、Ⅰ类及Ⅱ类盆底肌纤维电位、TGF-β1、Smad7表达上升,尿道旋转角度、膀胱颈活动度、残余尿量、排尿量、Smad2、Smad3水平减少(P<0.05)。结论西洋参总皂苷可有效改善压力性尿失禁模型大鼠的盆底功能,其作用机制可能与TGF-β1/Smad信号通路有关。

12种西洋参中总皂苷及人参皂苷Rb_1的测定比较

目的:建立西洋参中人参皂苷Rb1含量测定的现代分析方法,并对12种西洋参中的总皂苷及人参皂苷Rb1进行测定,以观察不同产地对其含量变化的影响.方法:人参总皂苷含量测定采用比色法,人参皂苷Rb1含量测定采用高效液相色谱法.结果:人参皂苷Rb1含量在62～1 230μg·ml-1之间呈良好线性,平均回收率为99.2%(RSD=1.69%).12种西洋参中,有10种西洋参所含人参总皂苷均大于4%,人参皂苷Rb1含量大于1%.结论:该法操作简便,快速,重现性好,结果准确,可作为西洋参质量控制方法.

超高效液相色谱法测定西洋参中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1的含量

目的:建立超高效液相色谱(UPLC)法测定西洋参中主要人参皂苷成分含量的方法。方法:采用AcquityBEHC18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱;以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;流速:0.5 ml/min;检测波长203 nm;柱温:25℃;进样体积2μl;采集频率:20 Hz。利用Acquity Waters system进行含量测定。结果:西洋参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1在8分钟内得到完全分离并进行了含量测定。结论:UPLC法在不影响分离效果的情况下大大提高了人参皂苷Rg1、Re、Rb1分析速度,同时减少了溶剂消耗。该研究表明UPLC法可作为传统HPLC法的一种更为方便、可行的替代方法。

西洋参冠瘿组织培养条件对其人参皂苷Rb_1含量的影响

考察了不同理化因子对西洋参冠瘿组织生长及其主要活性成分人参皂苷（ginsenosides）Rb1的影响,采用HPLC法测定了Rb1的含量。结果表明:在考察的6种培养基中,White培养基最适合人参皂苷Rb1累积（0.755％）;培养25d时Rb1累积含量最高（0.732％）;接种量为6g FW/flask最有利于Rb1合成（0.618％）;培养基pH值在5.6时Rb1累积量最高（0.692％）;肌醇的浓度为0.05g/L时,能明显促进Rb1附合成（1.881％）。

超高速液相测定西洋参中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1的含量研究

目的:建立测定西洋参中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1含量的超高速液相色谱法。方法:采用Waters Acquity UPLC BEHC_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)柱分离,以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2ml·min^(-1),柱温为35℃,在203 nm处检测。结果:人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1在测定范围内有良好的线性关系,其平均回收率为97.36%～99.23%,RSD为1.16%～1.39%(n=6)。结论:本法操作简便,准确度高,重复性好,可作为西洋参质量控制方法之一。

西洋参中人参皂苷Rg_1人参皂苷Re和人参皂苷Rb_1的含量测定

目的用快速分离液相色谱法分离测定西洋参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量。方法采用ZOBAX SB-C18柱(4.6 mm×50 mm,1.8μm),流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸(B),梯度洗脱(0～25min5,%A→20%A;～35min,20%A→40%A);流速:2.0 mL.min-1,测定波长:203 nm,柱温:35℃。结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.12～2.49,0.61～12.15,1.42～28.48μg,相关系数分别为0.999 8,0.999 6,0.999 9;平均加样回收率(n=6)分别为97.8%,98.1%,98.3%;RSD分别为1.0%0,.8%,0.4%。结论该方法具有快速、准确、重复性好等特点,适合于西洋参的含量测定。

从西洋参中提取分离纯化人参皂苷R_(b1)和人参皂苷R_e的研究

用大孔吸附树脂从西洋参提取物中富集西洋参总皂苷,再利用丙酮沉淀及重结晶方法获得高纯度的人参皂苷Rb1和Re。可以得到含量大于95%的人参皂苷Rb1(收率2.6%)和92%的人参皂苷Re(收率0.5%),以及纯度为98.5%的人参皂苷Rb1(收率2.0%)和97.8%的人参皂苷Re(收率0.25%)。该方法简便、实用,适用于工业大生产,为进一步开发成新药奠定了基础。

胶束电动毛细管色谱法测定西洋参中人参皂苷Rb_1,Re的含量

目的 :建立西洋参中人参皂苷Re ,Rb1的胶束电动毛细管色谱测定方法 ,考察影响分离的各因素 ,确定最佳色谱条件。方法 :测定缓冲液为含 2 0mmol·L-1硼酸、2 0mmol·L-1硼砂、6 0mmol·L-1胆酸钠和 2 0 %乙腈的混合溶液。电压 2 0kV ,柱温 2 5℃ ,检测波长 2 0 3nm ,压力进样 5s。结果 :线性范围Re为 0 .38～ 1.6 5mmol·L-1,Rb1为 0 .4 2～ 1.76mmol·L-1。加样回收率Re为 97.2 % ,RSD =1.6 % ;Rb1为 97.7% ,RSD =1.9% (n =5 )。结论 :该方法具有样品前处理简单 ,重现性好 ,所得色谱图信息丰富等特点。

HPLC法测定进口西洋参中人参皂苷Rb1、Re、Rg1的含量

目的 :修订进口西洋参质量标准。方法 :采用HPLC法 ,用C1 8柱为固定相 ,以乙腈 水 (30∶70 )和乙腈 0 0 5 %磷酸溶液(99∶4 0 0 )为流动相 ,柱温 4 0℃ ,检测波长 2 0 3nm。分别测定人参皂苷Rb1、Re和Rg1的含量。结果 :人参皂苷Rb1在 1 6 4 7～8 2 35 μg(r=0 9995 )、人参皂苷Rg1在 0 16 5 3～ 1 983μg(r=0 9998)、人参皂苷Re在 1 12 6～ 9 0 0 8μg(r =0 9999)范围内呈良好线性关系。加样回收率人参皂苷Rb1为 10 0 2 % (RSD为 3 2 6 % ) ,人参皂苷Rg1为 97 6 1% (RSD为 1 2 3% ) ,人参皂苷Re为10 0 4 % (RSD为 1 2 1% )。结论 :该含量测定方法简便准确 ,重复性好 。

西洋参微粉加工与人参皂苷Rb_1含量的相关性研究

目的 :比较不同粒度西洋参超微粉粉体中人参皂苷Rb1 含量来确定粉碎工艺。方法 :用HPLC法测定西洋参微粉中人参皂苷Rb1 含量。结果 :常温、低温粉碎的西洋参微粉中人参皂苷Rb1 含量均随粉碎粒度变细而增高 ,低温粉碎的西洋参微粉中人参皂苷Rb1 含量明显高于常温粉碎的西洋参微粉。结论

不同提取方法对西洋参中人参皂苷Rb_1含量的影响

为了考察不同提取方法对西洋参中人参皂苷Rb1含量的影响。用HPLC法,对不同的提取方法得到的样品进行含量测定。结果表明:4种提取方法人参皂苷Rb1含量分别为1.36%、0.87%、1.42%、1.43%。经过实验确定,以乙醚脱脂甲醇超声提取,提取率高、杂质较少、重现性好,是最理想的提取方法。

西洋参组织培养及愈伤组织中人参皂苷Rg1和Rb1含量分析

用西洋参(Panax quinquefolium L.)根作为外植体进行愈伤组织诱导,通过不同的培养基和激素配比实验,发现2.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA适合西洋参愈伤组织的诱导,愈伤组织在MS+2.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA培养基上生长较快,而在NB+2.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA培养基上细胞培养物中人参皂苷Rg1和Rb1含量较高,分别占干重的1.40%和0.24%.

HPLC法测定不同产地西洋参中人参皂苷Rb1、Re、Rg1的含量

目的采用高效液相色谱法测定不同产地西洋参中人参皂苷Rb1、Re、Rg1的含量,对比云南丽江西洋参与其他产地西洋参中人参皂苷Rb1、Re、Rg1的含量差异。方法 C18柱为色谱柱,流动相采用乙腈-0.1%磷酸溶液为缓冲液,梯度洗脱,流速为1.1m L/min,检测波长为203nm,柱温为40℃。精密吸取溶液各10μL注入高效液相色谱仪中测定。结果人参皂苷Rb1、Re、Rg1在测定范围内有良好的线性关系,它的平均回收率分别为99.70、101.19、100.27%,RSD分别为2.3、2.1、1.7%。结论该方法准确可靠、便于操作且重现性好,应用性强。不同产地西洋参的化学成分大致相同,但各含量间却存在显著差异,其中吉林靖宇和云南丽江的三种单体皂苷总含量相对较高。

长芦人参、西洋参中总皂苷及单体皂苷Re,Rg_1,Rb_1的含量测定

目的 通过测定比较普通人参、西洋参和长芦人参、西洋参的总皂苷及单体皂苷Re、Rg1、Rb1的含量,以阐明长芦人参、西洋参主要成分含量的品质特点.方法 采用比色法测定总皂苷含量;采用高效液相色谱法测定人参单体皂苷Re、Rg1、Rb1的含量.结果 比色法测定的线性范围为15.0～75.0μg,相关系数r=0.9929;平均回收率为100.09％,RSD为0.86％（n=6）.单体皂苷Re、Rg1、Rb1与生长年份成正相关.结论 长芦人参、西洋参的总皂苷含量高于普通人参、西洋参,单体皂苷含量随着年份的增长而增加.

大豆多肽对西洋参生物生长量与人参皂苷Rb_1含量的影响

研究大豆多肽对西洋参(Panax quinquefoliusL.)生物生长量和人参皂苷Rb1含量的影响。将大豆多肽2号粉和3号粉分别配制成高、中、低3种浓度的水溶液,以叶面喷洒与根部灌注的方式,对生长3年的西洋参进行实验;同时观察生物生长量和人参皂苷Rb1的变化并总结规律。大豆多肽2号粉4mg/ml浓度根部灌注对西洋参生物生长量与人参皂苷Rb1增加作用最明显。研究结果为提高西洋参产量与质量提供理论依据,在西洋参的栽培种植中起到了实践指导作用。

液相色谱-质谱联用同时测定西洋参制剂中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1及抗疲劳类非法添加含量

目的 建立同时测定西洋参制剂中人参皂苷Rg1、Re、Rb1及抗疲劳类非法添加含量的液相色谱-质谱联用方法.方法采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（3.0mm×150mm,3.5μm）,流动相A为含0.1%乙酸的20mmol·L-1乙酸铵溶液,流动相B为甲醇∶乙腈（3：2）的混合溶液,采用线性梯度洗脱;流速为200μL·min-1,柱温35℃.质谱条件采用电喷雾离子化（ESI）方式,正负离子模式,以多级反应监控（MRM）模式对西地那非、伐地那非、他达拉非、人参皂苷Rg1、Re和Rb1进行含量测定.结果 西地那非、伐地那非、他达拉非、人参皂苷Rg1、Re和Rb1分别在2.99～59.85,0.43～8.60,3.32～66.42,3.16～63.29,2.63～52.68,4.15～82.93μg·mL-1浓度范围内与峰面积呈良好线性关系.西洋参制剂中西地那非、伐地那非、他达拉非、人参皂苷Rg1、Re和Rb1的平均加样回收率均介于92.9%～103.3%之间.结论 本法简单、快速、灵敏、准确,可用于西洋参制剂中西地那非、伐地那非、他达拉非、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和Rb1含量测定,为该药的质量控制提供依据.

RP-HPLC法测定威斯康辛州产西洋参中人参皂苷Rg1、Rb1的含量

[目的]采用RP-HPLC法测定威斯康辛州不同生长环境及生长年限的西洋参中人参皂苷Rg1、Rb1的含量.[方法]采用Hypersil BDS-C18色谱柱,流动相A为0.1%磷酸溶液,B为乙腈,B相梯度程序：0～5min,20～25%;5～20min,25～35%.流速1.0ml·min-1,检测波长：203nm,柱温：40℃.[结果]人参皂苷Rg1：Y＝440432.60X＋60487.68,r＝0.9999,线性范围：1.50～9.00μg.人参皂苷Rb1：Y＝413142.90X＋30725.32,r＝0.9999,线性范围：1.25～7.50μg.平均回收率分别为101.13%,97.99%.[结论]野生品较栽培品含量高,新品较旧品含量高.方法简便,结果准确,重现性好,可用于西洋参的含量测定.

高效液相色谱法测定西洋参萃取物及许氏保肝奶蓟草胶囊中人参皂苷Rb_1的含量

目的 :测定西洋参萃取物及许氏保肝奶蓟草胶囊中人参皂苷 Rb1 的含量。方法 :采用高效液相色谱 ( HPL C)法 ,检测波长为 2 0 3nm,流动相为乙腈 -水 ( 30∶ 70 ) ,样品提取方法按照《中国药典》( 2 0 0 0版 部 ) [1 ]。结果 :西洋参萃取物中人参皂苷 Rb1 含量为 19.74%,RSD为 0 .98%;三个批号许氏保肝奶蓟草胶囊中人参皂苷 Rb1 含量为 0 .487%,0 .473%,0 .474%;方法平均回收率为 96 .2 2 %,RSD为 1.0 8%。结论 :方法稳定 ,重现性好 ,可作为许氏保肝奶蓟草胶囊质控方法。

西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性的影响

目的考察西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性的影响。方法将大鼠随机分为空白对照组(空白组)、西洋参总皂苷低剂量组[低剂量组,50 mg/(kg·d)]、西洋参总皂苷中剂量组[中剂量组,100 mg/(kg·d)]、西洋参总皂苷高剂量组[高剂量组,200 mg/(kg·d)]和β-萘黄酮阳性药对照组[阳性药组,80 mg/(kg·d)],预处理11 d后,观察大鼠肝微粒体CYP1A2酶活性、CYP1A2 mRNA表达和CYP1A2酶蛋白表达情况,研究CYP1A2特异性探针底物非那西丁在预处理大鼠体内的药动学变化。结果预处理后,大鼠肝微粒体CYP1A2活性、mRNA和蛋白表达随西洋参总皂苷剂量升高有增加趋势,非那西丁在预处理大鼠体内代谢速率加快。结论西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性有一定诱导作用。

西洋参总皂苷通过调控TGF-β1/CTGF通路对压力性尿失禁大鼠尿道损伤及排尿功能的改善作用研究

目的:基于转化生长因子-β1(TGF-β1)/结缔组织生长因子(CTGF)通路,分析西洋参总皂苷对压力性尿失禁(SUI)大鼠尿道损伤及排尿功能影响,探讨可能作用机制。方法:70只SPF级雌性未育SD大鼠中随机选取60只依据模拟产伤并联合双侧卵巢切除法建立SUI模型,将造模成功的56只SUI大鼠随机分为模型组、西洋参总皂苷低剂量组(50 mg/kg)、西洋参总皂苷高剂量组(100 mg/kg)和阳性药物组(盐酸米多君,20 mg/kg),每组各14只,其余10只未造模大鼠为对照组。连续干预6周后,比较大鼠尿动力学指标膀胱最大容积(MBC)、漏尿点压力(LPP)、腹压漏尿点压(ALPP)及膀胱内压相关指标排尿量、残余尿量、排尿效率;采用HE染色观察大鼠尿道组织病理学变化;检测大鼠尿道组织中TGF-β1、CTGF、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、胶原蛋白Ⅲ(CollagenⅢ)mRNA和蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组排尿量、残余尿量升高,MBC、LPP、ALPP、排尿效率、尿道组织TGF-β1、CTGF、CollagenⅠ、CollagenⅢmRNA和蛋白水平降低(P <0.05);与模型组比较,西洋参总皂苷低、高剂量组与阳性药物组MBC、LPP、ALPP、排尿效率、尿道组织TGF-β1、CTGF、CollagenⅠ、CollagenⅢmRNA和蛋白水平升高,排尿量、残余尿量降低(P <0.05);与西洋参总皂苷低剂量组比较,西洋参总皂苷高剂量组与阳性药物组MBC、LPP、ALPP、排尿效率、尿道组织TGF-β1、CTGF、CollagenⅠ、CollagenⅢmRNA和蛋白水平升高,排尿量、残余尿量降低(P <0.05);与西洋参总皂苷高剂量组比较,阳性药物组MBC、LPP、ALPP、排尿效率、尿道组织TGF-β1、CTGF、CollagenⅠ、CollagenⅢmRNA和蛋白水平升高,排尿量、残余尿量降低(P <0.05)。HE结果显示,西洋参总皂苷各剂量组与阳性药物组大鼠尿道组织病理变化均较模型组得以显著改善。结论:西洋参总皂苷能有效抑制SUI大鼠尿道损伤,改善排尿功能,可能通过调控TGF-β1/CTGF通路相关分子表达发挥作用。