西洋参茎叶皂苷对力竭运动大鼠心肌损伤的改善作用

为了研究西洋参茎叶皂苷减轻力竭运动大鼠心肌损伤的作用及机制,为西洋参茎叶皂苷的综合利用提供参考,本试验分为正常对照组、力竭运动组及西洋参茎叶皂苷低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg),除正常对照组外均需进行力竭游泳训练,4周后检测相关指标变化。结果表明,(1)与力竭运动组相比,西洋参茎叶皂苷中、高剂量组大鼠LVIDs、LVIDd极显著减少(P<0.01),低、中、高剂量组LVEF、LVFS极显著增加(P<0.01),心肌组织cTnⅠ含量及血清CTNK、LDH、ALT、α-HBDH活性均极显著降低(P<0.01);中、高剂量组LVIDs、LVIDd同低剂量组比极显著减少(P<0.01),高剂量组LVEF极显著高于低、中剂量组(P<0.01),中、高剂量组LVFS极显著高于低剂量组(P<0.01),而CTNK、α-HBDH活性极显著低于低剂量组(P<0.01),高剂量组LDH活性极显著低于低、中剂量组(P<0.01),低、中、高剂量组ALT活性比较差异均有极显著性(P<0.01)。(2)与力竭运动组相比,西洋参茎叶皂苷低、中、高剂量组大鼠心肌组织及血清MDA含量极显著降低(P<0.01),除低剂量组大鼠血清GSH-Px活性显著增加(P<0.05)外,其余各组大鼠心肌组织及血清SOD、CAT及GSH-Px活性均极显著增加(P<0.01);高剂量组心肌组织及血清MDA含量极显著低于低、中剂量组(P<0.01),SOD、CAT活性则极显著高于低、中剂量组(P<0.01),中、高剂量组GSH-Px活性极显著高于低剂量组(P<0.01)。(3)与力竭运动组相比,西洋参茎叶皂苷低剂量组大鼠心肌组织细胞凋亡率显著降低(P<0.05),中、高剂量组细胞凋亡率及各剂量组Bax、cleaved caspase-3表达极显著降低(P<0.01),而Bcl-2表达极显著增加(P<0.01);中、高剂量组细胞凋亡率、Bax及cleaved caspase-3表达均极显著少于低剂量组(P<0.01),而Bcl-2表达极显著高于低剂量组(P<0.01)。本研究显示,西洋参茎叶皂苷具有减轻力竭运动大鼠心肌损伤及改善心功能作用,且该作用与抑制氧化应激及抗心肌细胞凋亡有关。

国产与加拿大产西洋参茎叶总皂苷促智作用的比较

目的对国产和加拿大产西洋参茎叶总皂苷在促进学习记忆、保护急性脑缺血作用方面进行比较研究。方法采用小鼠一次性训练被动回避式条件反射的方法(跳台法、避暗法)和空间辨别学习记忆实验(水迷宫法)等方法进行研究。结果国产西洋参茎叶总皂苷(20 mg.kg-1)和加拿大产西洋参茎叶总皂苷(20 mg.kg-1)可显著减少东莨菪碱致记忆获得障碍小鼠在跳台实验中的错误次数,并可不同程度地延长脑缺血再灌注小鼠在跳台及避暗中的潜伏期,显著缩短水迷宫实验中小鼠找到安全台的时间,还可显著延长双侧颈总动脉结扎小鼠存活时间。结论国产西洋参茎叶总皂苷在促智作用方面表现出与加拿大产西洋参茎叶总皂苷相似的药效。

西洋参茎叶皂苷化学研究——Pseudoginsenoside—RT_5的分离与结构鉴定

本文为国内外首次报道从我国引种的西洋参茎叶中,经提取、大孔树脂吸附,除杂质后得纯度较高的总皂苷。将此总皂苷又以硅胶柱层析,经洗脱、分离,最后分得纯单一化合物。按常规测定物理常数、水解反应;又通过一维~1H、^(13)C 核磁共振谱,二维^(13)C—~1H 远程异核化学位移、^(13)C—~1H 异核化学位移、~1H—~1H 同核化学位移等相关谱,以及质谱的测定,最后确定以奥科提罗醇(0cotillol)为配基的拟人参皂苷—RT_5(pseudoginsenoside—RT_5)的分子结构。

西洋参茎叶总皂苷通过抑制内质网应激相关细胞凋亡减轻大鼠急性心肌梗死后心室重构

目的:研究西洋参茎叶总皂苷(Panax quinquefolium saponin,PQS)对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心室重构的作用及其机制。方法:健康雄性SD大鼠90只,随机分为假手术(sham)组、AMI组、牛磺酸(300 mg.kg-1.d-1)组及PQS(50、100和200 mg.kg-1.d-1)组(n=15)。结扎大鼠左冠状动脉前降支复制AMI模型。术后第2天开始,各用药组用饮用水10 mL.kg-1.d-1溶解药物灌胃,sham组及AMI组予等量饮用水灌胃。术后4周,超声心动图检测左室结构及功能变化;TTC染色法测定心肌梗死范围;比色法测定非梗死区心肌组织羟脯氨酸含量;TUNEL法检测非梗死区心肌细胞凋亡率,Western blotting检测内质网应激分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、钙网蛋白(CRT)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:与AMI组比较,PQS低、中、高剂量组左室收缩末期内径分别降低17.2%、20.3%和38.8%,左室舒张末期内径分别降低8.9%、9.0%和17.2%,左室收缩末期容积分别降低31.4%、38.5%和66.9%左室舒张末期容积分别降低18.2%、18.8%和34.2%,射血分数分别升高44.9%、60.1%和118.0%,左室短轴缩短率分别升高55.4%、71.0%和148.0%,梗死范围分别降低4.6%、39.5%和55.8%(均P<0.05);非梗死区心肌组织羟脯氨酸含量分别降低34.5%、35.9%和48.7%(P<0.01)。与AMI组比较,PQS 200 mg.kg-1.d-1组心肌细胞凋亡率降低27.3%(P<0.05),GRP78和CRT蛋白表达分别降低79.9%和80.8%(P<0.01),CHOP和Bax分别降低42.5%和53.1%(P<0.01),Bcl-2表达升高1.1倍(P<0.01);上述保护作用的程度与内质网应激抑制剂牛磺酸相近(P>0.05)。Spearman相关分析发现CHOP蛋白表达与心肌细胞凋亡率显著正相关(r=0.797,P<0.01)。结论:PQS剂量依赖性减轻大鼠心肌梗死后心室重构,其机制与抑制CHOP介导的内质网应激凋亡通路有关。

西洋参茎叶总皂苷对急性心肌梗死大鼠心肌VEGF、bFGF表达及血管新生的影响

目的观察西洋参茎叶总皂苷(Panax quinquefolius Saponin,PQS)对急性心肌梗死(AMI)大鼠缺血心肌血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达及梗死区血管新生的作用。方法选雄性Wistar大鼠,成功制作AMI大鼠模型50只,随机分为PQS大、中、小剂量组,倍他乐克组及模型组,同时建立假手术组及正常组,每组10只。药物治疗组分别给予PQS水溶液54mg/(kg.d),27mg/(kg.d),13.5mg/(kg.d)及倍他乐克水溶液4.5mg/(kg.d)每天1次灌胃,其他3组给予等量蒸馏水每天1次灌胃,连续用药14天。术后第15天处死大鼠,每组选取6只心脏标本,应用免疫组化法,光镜下观察大鼠心肌细胞VEGF、bFGF及Ⅷ因子表达情况;应用图像分析系统定量分析VEGF及bFGF阳性反应强度,计算平均微血管密度(MMVD)。结果PQS大、中剂量组心肌细胞VEGF表达较模型组明显增强(P<0.05);PQS大、中、小剂量组心肌细胞bFGF表达比模型组明显增强(P<0.05);PQS大、中剂量组MMVD明显高于模型组(P<0.05)。结论PQS可增强急性心肌梗死大鼠心肌细胞VEGF、bFGF的表达,促进梗死及缺血区血管新生,发挥保护心肌的缺血性损伤作用。

西洋参茎叶总皂苷通过抑制过度内质网应激减轻大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的:观察西洋参茎叶总皂苷(PQS)对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞的保护作用,并从内质网应激(ERS)的角度探讨其分子机制。方法:建立心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型,以台盼蓝染色法、乳酸脱氢酶活性以及流式细胞术检测细胞损伤及凋亡情况;以RT-PCR和Western blotting方法,检测ERS标志分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、钙网蛋白(CRT)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、caspase-12及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:和H/R组心肌细胞相比,PQS+H/R组:(1)细胞凋亡率降低4.19%(P<0.05),存活率升高21.2%(P<0.05),LDH活性降低66.58%(P<0.05);(2)Bcl-2 mRNA和蛋白表达分别升高30.9%和48.0%(P<0.05),Bax mRNA和蛋白表达分别降低39.7%和48.4%(P<0.05);(3)GRP78 mRNA和蛋白表达分别降低61.6%和37.7%(P<0.05),CRT mRNA和蛋白表达分别降低35.7%和52.2%(P<0.05);CHOP mRNA和蛋白表达分别降低57.0%和51.7%(P<0.05);剪切后的caspase-12蛋白表达降低34.9%(P<0.05)。结论:PQS可减轻H/R诱导的心肌细胞损伤,其机制是降低H/R诱导的GRP78、CRT mRNA和蛋白表达,抑制CHOP、caspase-12等内质网凋亡通路激活,从而抑制过度ERS介导的细胞凋亡。

西洋参茎叶总皂苷对胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖转运、GLUT-4转位和CAP基因表达的影响

目的观察西洋参茎叶总皂苷(PQS)对脂肪细胞胰岛素抵抗状态下葡萄糖转运、葡萄糖转运子-4(GLUT-4)转位和c-cb1结合蛋白(CAP)基因表达的影响。方法将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,用游离脂肪酸(FFA)制备脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)模型,液闪仪测定3H标记的葡萄糖的摄取率,免疫荧光法检测GLUT-4转位,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测培养细胞中CAPmRNA的表达。结果模型组胰岛素刺激下的葡萄糖转运率明显低于正常对照组(P<0.01);与模型组相比,二甲双胍组、PQS大/中剂量组葡萄糖转运率明显增加(P<0.01、P<0.01、P<0.05),但PQS小剂量组作用不明显。正常对照组在胰岛素刺激前,GLUT-4大部分位于胞质内,胰岛素刺激30min后,胞质内的分布较刺激前明显减少,胞膜周围的分布相对增加;而模型组在胰岛素刺激前后,GLUT-4在细胞内的分布无变化;但在二甲双胍组和PQS3个剂量组的结果显示,胰岛素刺激后,胞质内GLUT-4分布减少,胞膜周围的分布相对增加。模型组CAPmRNA水平较正常组明显下降(P<0.05);与模型组相比,二甲双胍和PQS大、中剂量组CAPmRNA水平明显上升(P<0.01),PQS小剂量未见明显效果。结论PQS可改善脂肪细胞IR,这可能与其促进脂肪细胞CAP基因转录、GLUT-4转位和葡萄糖转运有关。

西洋参茎叶总皂苷对脂肪细胞糖脂代谢及胰岛素抵抗信号转导的影响

目的观察西洋参茎叶总皂苷(panax quinquefolius saponin,PQS)对脂肪细胞糖脂代谢及胰岛素抵抗信号转导的影响。方法将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,用游离脂肪酸(FFA)制备脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)模型,再加入相应药物作用,最后用葡萄糖氧化酶法检测药物作用后脂肪细胞培养液中葡萄糖消耗量,用比色法检测药物对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的脂解作用的影响,用Western-blot法检测胰岛素刺激后信号蛋白磷酸化水平。结果模型组葡萄糖消耗量(mmol/L)为5.250±2.671,显著低于对照组14.133±1.305(P<0.01);与模型组相比,二甲双胍组(1 mmol/L及PQS大、中、小剂量组(0.08、0.04、0.02 mg/mL)葡萄糖消耗量均显著增加(P<0.01),分别为11.807±1.358、10.784±2.373、10.217±1.237、9.984±2.006,且随着PQS用药剂量的增加,葡萄糖消耗量也逐渐增加。TNF-α组培养液中FFA浓度(nmol/μg)(2.479±0.597)显著高于对照组(1.320±0.538)(P<0.01);与TNF-α组相比,二甲双胍及PQS大、中、小剂量组培养液中FFA浓度均显著降低(P<0.01),分别为1.210±0.566、1.105±0.631、1.108±0.260、1.201±0.593,且随着PQS用药剂量的加大,其抗脂解作用逐渐增强。模型组胰岛素受体β亚单位、IRS-1酪氨酸磷酸化水平及PKB的Ser473磷酸化水平均较对照组减低;与模型组比较,PQS小剂量组信号蛋白磷酸化水平无明显变化,但PQS中、大剂量和二甲双胍组信号蛋白磷酸化水平均有不同程度增高的趋势。结论PQS能够促进脂肪细胞利用葡萄糖、抑制TNF-α的促脂解作用,从而调节糖脂代谢。PQS调节糖脂代谢的作用可能与其促进脂肪细胞胰岛素信号转导、改善胰岛素抵抗有关。

西洋参茎叶皂苷对糖尿病大鼠氧化损伤和血管内皮功能的影响

目的研究西洋参茎叶皂苷(Panax quinquefolium saponins,PQS)对实验性糖尿病大鼠氧化损伤及其对血管内皮功能的保护作用。方法♂Wistar大鼠适应性饲养3 d后,随机抽取56只作为正常对照组,其余均采用链脲佐菌素(STZ,30 mg·kg^(-1))诱导糖尿病大鼠模型。糖尿病大鼠随机分为模型组、PQS组(100 mg·kg^(-1))和Vitamin E组(100μmol·kg^(-1)),正常组注射等量柠檬酸盐缓冲液,各组按方案给药4、8、16周后,检测大鼠血糖和血清、心、肾组织中LPO含量及SOD的活性,并记录各组大鼠胸主动脉离体血管环内皮依赖性舒张反应情况。结果与模型组比较,随着PQS给药时间的延长,PQS组大鼠的血糖及血清、心、肾组织中的LPO含量明显下降,血清、心、肾组织中SOD活性明显升高(P<0.05,P<0.01),并且随着PQS给药时间的延长,PQS组大鼠胸主动脉内皮依赖性舒张反应逐渐趋近正常值。结论PQS能通过提高机体抗氧化功能来改善糖尿病大鼠血管内皮依赖性舒张功能,从而干预糖尿病血管并发症的发生和发展。

RP-HPLC法测定西洋参茎叶中6种人参皂苷的含量

报道了西洋参茎叶中 6种人参皂苷的反相高效液相色谱 (RP -HPLC)测定法 ,用十八烷基硅烷键合相柱 ,UV 2 0 3nm检测 ,流动相为 :A :2 0 %乙腈 ,B :80 %乙腈 ,梯度洗脱 10 0 %A在 5 0min内换到 70 %A。比较了样品的纯化方法及西洋参茎叶中 6种单体人参皂苷含量的测定 ,与其相邻峰达到基线分离 ,且线性良好 ,r =0 9994～ 0 9999。平均加样回收率为 :Rg199 2 % ,Re 99 7% ,Rb198 8% ,Rc 98 1% ,Rd 99 0 % ,Rb2 99 6 %。

西洋参茎叶总皂苷对心肌缺血的保护作用

犬冠脉结扎及大鼠注射垂体后叶素造成的心肌缺血模型试验表明 ,西洋参茎叶总皂苷 (PNS)十二指肠给药能明显减小冠脉结扎犬心肌缺血程度和范围 ,缩小心肌梗死面积 ,降低血清中游离脂肪酸 (FFA)和丙二醛 (MDA)的含量 ;同时还可降低急性心肌缺血大鼠血清中乳酸脱氢酶 (LDH)、磷酸肌酸激酶 (CK )、谷草转氨酶 (AST) ,保护超氧化物歧化酶 (SOD)的活性。

西洋参茎叶三醇组皂苷对缺血再灌注损伤心肌的保护作用

目的 探讨西洋参茎叶三醇组皂苷 (PQTS)对缺血再灌注损伤心肌的保护作用及机制。方法 采用大鼠离体心脏Langendorff灌流模型 ,观察PQTS对缺血再灌注心肌组织中SOD活性、LPO水平及再灌注性心律失常的影响。结果 PQTS(30、1 0 0、30 0 μg/ml)可以不同程度地降低心肌组织中LPO含量、提高心肌SOD活性水平 ,并抑制再灌注性心律失常的发生。

西洋参茎叶20s-原人参二醇组皂苷对实验性脑缺血大鼠血小板功能及血液流变学的影响

目的:观察西洋参茎叶20s-原人参二醇组皂苷(PQDS)对实验性脑缺血大鼠血小板功能及血液流变学的影响。方法:大鼠结扎双侧颈总动脉伴低血压建立急性不完全性脑缺血模型,腹腔注射PQDS(12.5、25、50 mg/kg),设苦碟子注射液阳性对照组(25 mg/kg),给药3 d后,测定血小板黏附和聚集功能、全血黏度、血浆纤维蛋白原浓度、血沉、红细胞压积、红细胞聚集指数及红细胞刚性指数。结果:PQDS预防性给药能明显抑制实验性脑缺血大鼠的血小板黏附和聚集功能,降低全血黏度、血浆纤维蛋白原浓度、血沉、红细胞压积、红细胞聚集指数及红细胞刚性指数。结论:PQDS预防给药,对实验性脑缺血大鼠血小板功能及血液流变学的异常变化有明显改善作用。

西洋参茎叶化学成分及生物利用度的研究

应用多种色谱技术进行分离纯化,从西洋参茎叶中分离得到10个化合物,经理化性质和光谱数据分析鉴定分别为:拟人参皂苷RT4(1)、拟人参皂苷RT5(2)、24(R)-Ocotillol苷元(3)、20(S)-人参皂苷Rh1(4)、20(S)-人参皂苷Rg1(5)、20(S)-人参皂苷Rg2(6)、20(S)-人参皂苷Rh2(7)、20(R)-人参皂苷Rh2(8)、20(S)-人参皂苷Rg3(9)、拟人参皂苷F11(10)。化合物1和3为首次从西洋参茎叶中分离得到。首次建立和认证了20(S)-人参皂苷Rg3肌内注射的生物利用度的测定方法,采用本文方法测定犬肌注20(S)-人参皂苷Rg3的生物利用度为96.7%,为20(S)-人参皂苷Rg3的新药开发提供了临床前药代动力学依据。

西洋参茎叶总皂甙对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能作用的研究

目的:观察西洋参茎叶总皂甙对活化的小鼠腹腔巨噬细胞代谢和分泌一氧化氮(NO)、白细胞介素1(IL-1)活性的影响。方法:将不同浓度的西洋参茎叶总皂甙加入体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中,以NO试剂盒检测培养上清液中NO的含量,以溴化四唑蓝(MTT)比色法检测巨噬细胞代谢能力及产生IL-1的活性。结果:西洋参茎叶总皂甙可明显促进小鼠腹腔巨噬细胞代谢和产生NO,且NO的产生呈剂量依赖关系,对IL-1的活性无明显影响。结论:西洋参茎叶总皂甙可增强小鼠腹腔巨噬细胞活性,可能是西洋参茎叶总皂甙调节机体免疫功能的重要途径。

西洋参茎叶总皂苷对载脂蛋白E基因敲除小鼠血脂及脂质代谢相关基因周脂素和CD36表达的影响

目的观察西洋参茎叶总皂苷对载脂蛋白E基因敲除小鼠斑块成分及脂质代谢相关基因周脂素和清道夫受体CD36表达的影响,探讨西洋参茎叶总皂苷稳定动脉粥样硬化斑块的作用及可能机制。方法33只6-8周龄小鼠载脂蛋白E基因敲除小鼠予高脂饮食喂养13周后,待其形成成熟的动脉粥样硬化斑块后,随机分为3组：模型组、西洋参茎叶总皂苷组、辛伐他汀组（阳性对照组）,每组11只。继续高脂喂养,并按体重比折算给予小鼠临床推荐剂量的相应药物治疗13周,处死动物,检测血脂,取心脏和主动脉,每只小鼠均取主动脉根部的4个切面,分别行HE染色和Movat染色,观察并计算各组小鼠主动脉粥样斑块内脂质核心大小,脂质成分与胶原成分比值。实时荧光定量PCR法检测主动脉内周脂素和CD36 mRNA的表达。结果给药13周后,与模型组比较西洋参茎叶总皂苷组小鼠主动脉斑块内脂质核心面积以及脂质成分与胶原成分比值明显减小（P〈0.01）,血清高密度脂蛋白显著升高（P〈0.01）。而主动脉内周脂素和CD36 mRNA的表达与模型组比较均显著降低（P〈0.05）。结论在临床推荐剂量上,西洋参茎叶总皂苷可通过改善载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉斑块内部成分,尤其是减少斑块内脂质含量来起到稳定动脉硬化斑块的作用,其机制可能与抑制脂质代谢相关基因周脂素和清道夫受体CD36 mRNA的表达有关。

西洋参茎叶总皂苷对冠心病血糖异常患者胰岛素敏感性的影响

目的观察西洋参茎叶总皂苷(panax quinquefolius saponin,PQS)对冠心病血糖异常患者血糖、血脂及胰岛素敏感性的影响。方法选择冠心病心绞痛并血糖异常患者84例,即:空腹血糖损害(IFG)或糖耐量异常(IGT)或2型糖尿病(T2DM),随机分为PQS组(43例)和常规西药治疗组(简称常规组,41例)。PQS组在西药常规治疗的同时加口服PQS,连续用药治疗4周,用药前后检测患者空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL- C)。计算胰岛素敏感指数(ISI)、稳态模型的胰岛素抵抗指数(Homa-IR)和β细胞功能(Homa-β)。结果两组治疗后FPG均较治疗前显著下降(P<0.01),PQS组FPG下降(25.80±12.72)%,降低程度较常规组[(20.89±12.17)%]稍高,但无统计学意义。组内比较,两组治疗前后FINS、ISI、Homa-IR差异无统计学意义。治疗组治疗后Homa-β值为4.19±0.79,较治疗前(3.48±0.76)有显著增加(P<0.01),并显著高于常规组治疗后(3.82±0.77)的水平,差异有统计学意义(P<0.05);而常规组治疗前后Homa-β值无显著变化,且治疗前两组Homa-β水平比较差异无统计学意义。PQS组治疗后TC、LDL-C水平均较治疗前显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),且治疗后TC水平为(1.17±0.54)mmol/L,显著低于常规组(1.42±0.49) mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在常规西药治疗的基础上加用PQS,有进一步降低冠心病血糖异常患者血糖的作用趋势,显著降低冠心病血糖异常患者血TC、LDL-C水平,并可能改善冠心病血糖异常患者β细胞功能。但两组患者的胰岛素敏感性均无明显变化。

西洋参茎叶总皂苷通过抑制过度内质网应激减轻大鼠心肌缺血／再灌注损伤

目的:观察西洋参茎叶总皂苷(PQS)对大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的保护作用,并从内质网应激(ERS)的角度探讨其可能的分子机制。方法:采用SD大鼠心肌I/R模型,随机分为正常对照组、模型组与药物预处理组,检测血流动力学及血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)含量,以氯化三苯基四氮唑(TTC)和伊文思蓝双染法检测心梗面积,采用HE染色和TUNEL法分别评估心肌病理损伤和心肌细胞凋亡程度,Western blotting法检测心肌组织凋亡调节因子以及内质网应激相关蛋白的表达。结果:与I/R组相比,PQS+I/R组平均动脉压降低32.0%(P<0.05),左室±dp/dtmax分别升高64.0%和35.0%(P<0.05),血清cTnT含量降低53.3%(P<0.05),坏死面积/缺血面积(AN/AAR)百分比降低65.5%(P<0.05),心肌细胞凋亡率降低54.9%(P<0.05);心肌组织病理损伤程度减轻;抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高110.0%(P<0.05),促凋亡蛋白Bax表达降低47.8%(P<0.05),钙网蛋白(CRT)表达降低43.4%(P<0.05),C/EBP同源蛋白(CHOP)和剪切后的caspase-12蛋白表达分别降低38.6%和23.7%(P<0.05)。结论:PQS可显著减轻大鼠心肌I/R损伤,其机制与降低I/R诱导的CRT过表达,抑制CHOP、caspase-12等内质网凋亡通路激活,从而抑制过度ERS介导的细胞凋亡有关。

西洋参茎叶总皂苷对缺血/再灌注大鼠心肌线粒体膜电位及细胞凋亡的影响

目的:研究西洋参茎叶总皂苷(PQS)对大鼠缺血/再灌注(I/R)损伤后心肌细胞凋亡的影响,并从线粒体膜电位(ΔΨm)及线粒体凋亡通路探讨其可能的机制。方法:健康雄性SD大鼠90只,随机分为假手术(sham)组、模型(I/R)组、PQS(200 mg·kg-1·d-1,灌胃6周)+I/R组、环孢霉素A(CsA;10 mg·kg-1,再灌前10 min腹腔注射)组、CsA+I/R组和PQS+CsA+I/R组,各组n=15。除sham组和CsA组大鼠开胸后冠状动脉左前降支(LAD)下穿线不结扎外,其余各组大鼠常规麻醉后,结扎LAD 30 min,再灌注120 min复制I/R模型。生化分析仪测血清乳酸脱氢酶(LDH)含量,氯化三苯基四氮唑(TTC)和伊文思蓝双染法测心梗面积,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况,Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白的表达。采用JC-1作为荧光探针,用激光共聚焦显微镜和荧光酶标仪测定ΔΨm水平。结果:与sham组比较,I/R组血清LDH活性、心梗面积和心肌细胞凋亡率均显著升高(P<0.05);与I/R组相比,PQS+I/R组、CsA+I/R组和PQS+CsA+I/R组血清LDH活性、心梗面积和心肌细胞凋亡率均显著降低(P<0.05)。Western blotting结果显示,与sham组相比,I/R组心肌Bcl-2蛋白表达量降低,Bax、胞浆cytochrome C和cleaved caspase-3升高(均P<0.05);与I/R组相比,PQS+I/R组、CsA+I/R组和PQS+CsA+I/R组心肌Bcl-2蛋白表达量升高,Bax、胞浆cytochrome C及心肌cleaved caspase-3蛋白表达量均降低(P<0.05)。激光共聚焦显微镜观察结果示,I/R组线粒体JC-1染色后红色荧光强度减弱,荧光酶标仪测相对荧光单位(RFU)较sham组降低(P<0.05);PQS+I/R组、CsA+I/R组和PQS+CsA+I/R组RFU均较I/R组升高(P<0.05)。结论:PQS显著降低大鼠I/R后心肌细胞损伤,减少细胞凋亡,其机制与维持再灌注期ΔΨm稳定、抑制线粒体凋亡通路的激活有关。