西红花提取物中可溶性糖类成分的研究

有关西红花中可溶性糖类的定量分析，尚未见报道。本文对西红花提取物中糖类成分进行了鉴定和含量测定。经鉴别其成分为龙胆二糖和葡萄糖，并测定了5批样品可溶性糖的含量。

从自噬和焦亡角度探究西红花提取物对缺血性脑卒中大鼠神经损伤的保护作用

目的探究西红花提取物调控自噬和焦亡发挥缺血性脑卒中大鼠神经损伤的保护机制。方法采用大鼠中脑动脉闭塞(middle cerebral artery acclusion,MCAO)模型,第1组:MCAO大鼠随机分为假手术组、模型组、西红花提取物低、中、高剂量组(3、6、12 mg·kg^(-1))、依达拉奉组(10 mg·kg^(-1))。造模7 d后进行神经功能缺陷评分,并采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积。Western blot检测脑组织自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62以及焦亡相关蛋白NLRP3、cleaved-caspase-1、IL^(-1)β、IL^(-1)8表达。第2组MCAO大鼠随机分为:假手术组、模型组、西红花提取物高剂量(12 mg·kg^(-1))、西红花提取物高剂量+自噬抑制剂三甲基腺嘌呤组(3-MA,200 mmol·L^(-1),2μL)、自噬抑制剂三甲基腺嘌呤组(3-MA)。MCAO大鼠腹腔注射西红花提取物(12 mg·kg^(-1)),每日1次,持续7 d,并采用大鼠侧脑室注射自噬抑制剂3-MA进行干预。Zea-Longa法评估神经功能损伤,并采用TTC染色检测脑梗死体积;Western blot和免疫荧光检测自噬水平以及焦亡相关蛋白NLRP3、cleaved-caspase-1、IL^(-1)β、IL^(-1)8表达。第3组MCAO大鼠随机分为:假手术组、模型组、西红花提取物高剂量(12 mg·kg^(-1))、caspase-1抑制剂Z-YVAD组(8μg·kg^(-1),2μL)、西红花提取物高剂量+Z-YVAD组。Western blot和免疫荧光检测脑组织cleaved-caspase-1及神经元LC3阳性表达率。结果与假手术组相比,模型组大鼠神经功能评分增加,脑梗死体积增大,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、NLRP3、cleaved-aspase-1、IL^(-1)β、IL^(-1)8表达升高(P<0.01),p62表达降低(P<0.01)。与模型组相比,各剂量西红花提取物组大鼠神经功能评分和脑梗死体积均明显降低(P<0.05,P<0.01),中、高剂量西红花提取物组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,p62和焦亡相关蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组和西红提取物组相比,大鼠侧脑室注射3-MA能够抑制自噬水平,诱导细胞焦亡相关蛋白表达,增大脑梗死体积,加重脑神经功能损伤。MCAO大鼠脑组织高表达cleaved-caspase-1能够被caspase-1抑制剂Z-YVAD阻断,但对神经元LC3阳性表达率无显著性影响(P>0.05)。结论西红花提取物能够改善MCAO大鼠神经损伤,机制与促进细胞自噬、抑制NLRP3炎症小体诱发的细胞焦亡相关。

西红花甙精制工艺研究

对西红花提取物的精制品进行了分析，定性分析采用薄层色谱法，以西红花甙-1、甙-2为对照品，乙酸乙酯-甲醇-水（100：16.5：13.5）为展开剂，展开：定量分析则以西红花甙-1为基准物，采用分光光度法于432nm处进行测定。结果表明精制后的西红花甙含量明显高于精制前的含量，甚至是其一倍。