菌落PCR产物直接测序方法的建立及在水稻基因测序中的应用

建立了以菌落PCR产物作为DNA测序模板进行快速测序的技术方法。研究结果表明,采用菌落PCR技术,以载体插入位点两端序列互补的通用引物(如M13正反向引物)为引物,在控制菌落PCR反应条件的情况下,不仅可用于筛选和鉴定阳性克隆,而且菌落PCR产物还可作为DNA测序模板,结果准确可靠。与常规质粒测序方法比较,该法快速、简便,但对具有PolyT、PolyA过多的序列进行测序时,该法测序效率较低。