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重组脂肪酶X12-5的大规模发酵及其酶学性质研究
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作者 王凤 唐湘华 +4 位作者 李俊俊 许波 杨云娟 谢振荣 黄遵锡 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期139-142,共4页
实验室保藏的一株产脂肪酶基因工程菌X12-5,经过摇瓶发酵,测得酶活力为65U/mL。为进一步提高酶活力,应用于工业生产,将其进行上罐(180L)发酵。大规模发酵后,酶活高达220000U/g,实现了脂肪酶的高效表达。对其酶学性质研究表明,最适温度... 实验室保藏的一株产脂肪酶基因工程菌X12-5,经过摇瓶发酵,测得酶活力为65U/mL。为进一步提高酶活力,应用于工业生产,将其进行上罐(180L)发酵。大规模发酵后,酶活高达220000U/g,实现了脂肪酶的高效表达。对其酶学性质研究表明,最适温度和pH分别为45℃和7.0;pH在4.0~7.0,温度在50℃以下酶活相对稳定;Mg2+、Mn2+、Ca2+对酶活有明显促进作用。由该脂肪酶的酶学性质初步判断其在制革工业上具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 脂肪酶 基因工程菌 规模发酵 酶学性质
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菌株Sr18杀线虫代谢物的规模发酵及杀线效果研究
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作者 王亚萍 王修清 +2 位作者 孙建华 冯欣 孟庆恒 《中国酿造》 CAS 北大核心 2017年第4期54-57,共4页
实验以菌株Sr18(Syncephalastrum racemosum)为发酵对象,以杀线虫活性为考察指标,在5 L、30 L发酵研究基础上,进行了200 L和5 t发酵罐水平上的规模发酵实验。结果显示,200 L罐发酵工艺参数为接种量4%,发酵温度26℃,罐压0.05~0.12 MPa,... 实验以菌株Sr18(Syncephalastrum racemosum)为发酵对象,以杀线虫活性为考察指标,在5 L、30 L发酵研究基础上,进行了200 L和5 t发酵罐水平上的规模发酵实验。结果显示,200 L罐发酵工艺参数为接种量4%,发酵温度26℃,罐压0.05~0.12 MPa,空气流量4~9 m^3/h,转速120~198 r/min,发酵周期48 h;5 t罐发酵参数为接种量4%,发酵温度26℃,罐压0.03 MPa,空气流量65~80 m^3/h,转速80~90 r/min,发酵周期40 h。在此发酵条件下,200 L和5 t罐的1倍稀释发酵液的杀线虫活性均可达到100%,表明实验所设定的发酵参数适用、可控。 展开更多
关键词 菌株Sr18 杀线虫代谢产物 规模发酵 杀线虫活性
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质粒DNA实验室规模化制备工艺 被引量:1
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作者 贲培玲 陈容前 +1 位作者 孙淼 施向阳 《山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报》 CAS 2023年第3期202-208,共7页
目的 探索实验室规模生产质粒DNA(plasmid DNA,pDNA)的制备工艺。方法 选用质粒pEGFP-N1E. coli Stbl3菌株,用最陡爬坡试验(plackett-burman,PB)筛选出影响质粒产量最显著因素,响应面法优化重组菌高产发酵条件。采用碱裂解,浓缩质粒,通... 目的 探索实验室规模生产质粒DNA(plasmid DNA,pDNA)的制备工艺。方法 选用质粒pEGFP-N1E. coli Stbl3菌株,用最陡爬坡试验(plackett-burman,PB)筛选出影响质粒产量最显著因素,响应面法优化重组菌高产发酵条件。采用碱裂解,浓缩质粒,通过凝胶、亲和、离子等层析分离纯化pDNA,并对所纯化的pDNA进行质量评价。结果 用PB试验和响应面试验设计筛选出的关键因素是:酵母提取物20 g/L,甘油6 g/L,接种物浓度吸光度(optical density,OD)=0.014。在最佳条件下进行3次平行发酵,生物量OD 600达28.07±2.01,质粒产量(21.34±1.31)mg/L。pDNA纯度(A260 nm/A280 nm)为1.91±0.02。内毒素含量小于0.005 EU/g DNA;几乎检测不到蛋白质及细菌基因组DNA残留,达到相关质量标准。结论 本研究采用的制备工艺可生产出高质量的p DNA。 展开更多
关键词 质粒DNA 响应面 实验室规模发酵 纯化 质量评价
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重组人源白介素-1β发酵条件的优化及其产品的纯化
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作者 董文宁 刘成琴 《齐鲁药事》 2007年第9期560-562,共3页
目的初步建立重组人源IL-1β巴斯德毕赤酵母的培养体系;进一步优化大规模培养重组人源IL-1β巴斯德毕赤酵母的条件;探讨大规模纯化重组人源IL-1β巴斯德毕赤酵母表达产物的条件;鉴定酵母表达产物及纯化样品。方法在菌体湿重达190g.L-1... 目的初步建立重组人源IL-1β巴斯德毕赤酵母的培养体系;进一步优化大规模培养重组人源IL-1β巴斯德毕赤酵母的条件;探讨大规模纯化重组人源IL-1β巴斯德毕赤酵母表达产物的条件;鉴定酵母表达产物及纯化样品。方法在菌体湿重达190g.L-1左右时开始甲醇诱导表达;选用了SP Sepharose XL阳离子交换层析和反相疏水柱层析进行纯化。结果在pH4.5的含0.5%蛋白胨的FM21培养基中发酵时,放罐时间在30h较为适宜;经过纯化蛋白纯度即可达95%以上。结论最终经过鉴定,表达和纯化的样品就是我们想要得到的IL-1β。 展开更多
关键词 白介素-1β毕赤酵母表达 规模发酵 纯化
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玛纳斯产区五个白色品种葡萄酒的香气分析 被引量:13
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作者 胡丽 卢浩成 +3 位作者 胡娟 成池芳 李树德 王军 《中外葡萄与葡萄酒》 北大核心 2021年第5期1-7,共7页
2019年对玛纳斯产区5个白色品种‘霞多丽’‘琼瑶浆’‘小白玫瑰’‘绿维特利纳’和‘二号白香’进行小规模发酵试验,利用气相色谱-质谱联用技术检测所酿葡萄酒的香气物质。结果表明,‘小白玫瑰’葡萄酒的香气物质种类最丰富(87种),花... 2019年对玛纳斯产区5个白色品种‘霞多丽’‘琼瑶浆’‘小白玫瑰’‘绿维特利纳’和‘二号白香’进行小规模发酵试验,利用气相色谱-质谱联用技术检测所酿葡萄酒的香气物质。结果表明,‘小白玫瑰’葡萄酒的香气物质种类最丰富(87种),花香和焦糖香浓郁,植物味和化学味较轻,脂肪味较重,香气轮廓整体表现最佳;‘二号白香’和‘霞多丽’葡萄酒的风格相似,果香浓郁,但化学味也较重;‘琼瑶浆’和‘绿维特利纳’葡萄酒的香气物质种类丰富,花香浓郁,植物味、脂肪味和化学味较轻,但香气轮廓整体表现欠佳。综上所述,除‘霞多丽’外,‘小白玫瑰’和‘二号白香’同样适于玛纳斯产区风土下干白葡萄酒的酿造。 展开更多
关键词 玛纳斯 白葡萄品种 规模发酵 干白葡萄酒 香气物质
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Research on the Effect of Microbial Fermentation Feeds on Slaughter Performance and Meat Quality in Pig with Large-scale Feeding 被引量:9
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作者 林标声 罗建 +1 位作者 李益明 杨小燕 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2016年第10期2329-2331,2382,共4页
In this paper, Duroc-lanndrae-Yorkshire crossbred piggy of born at 75 days of age, bouncing with health and similar body weight were randomly divided into experimental group (136 pigs) and control group (136 pigs)... In this paper, Duroc-lanndrae-Yorkshire crossbred piggy of born at 75 days of age, bouncing with health and similar body weight were randomly divided into experimental group (136 pigs) and control group (136 pigs). Pigs in control group were fed with conventional diets, and 4% microbial fermentation feeds were added to the basal diet of experimental group to research on the effect of performance and meat quality of pig breeding. The results indicated that after feeding 106 d, compared to control group, the slaughter performance, meat quality and content of fatty acid and amino acid of experimental group were all better, its slaughter rate increased 1.53%, the carcass weight increased 2.75% and the backfat thickness decreased 0.02 cm. In addition, the pork meat in test group hadn't antibiotic and heavy metal residues, while it had higher color score, lower pH45min and pH24h value, better tenderness and rate of cooked meat and higher content of fatty acids, polyunsaturated fatty acids and amino acids. Microbial fermentation feed using in test group can significantly improved the flavor and aroma of pork, and eating this pork conducive more to human health. Thus, the application of microbial fermenta- tion feed can provide a more safe, healthy and nutritious flavor pork for human beings. 展开更多
关键词 Microbial fermentation feeds Large-scale feeding Slaughter performance Meat quality
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不同搅拌策略对破伤风梭状芽孢杆菌发酵生产破伤风毒素的影响
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作者 郑喆 张建飞 +6 位作者 丁苗 李振忠 王忠 陈文韬 付晶 冯鹏 陈作江 《微生物学免疫学进展》 CAS 2023年第4期35-41,共7页
目的考察不同搅拌策略对破伤风梭状芽孢杆菌(Clostridium tetani,C.tetani)大规模发酵生产破伤风毒素的影响,建立稳定的C.tetani发酵工艺。方法在1500 L发酵罐中,采用不同搅拌策略发酵C.tetani。发酵过程中测定发酵液菌体浓度和毒素絮... 目的考察不同搅拌策略对破伤风梭状芽孢杆菌(Clostridium tetani,C.tetani)大规模发酵生产破伤风毒素的影响,建立稳定的C.tetani发酵工艺。方法在1500 L发酵罐中,采用不同搅拌策略发酵C.tetani。发酵过程中测定发酵液菌体浓度和毒素絮状单位(flocculation unit,Lf),并应用实时荧光定量PCR测定tent基因和tetR基因的表达量;发酵液经深层过滤、超滤、两步盐析等工艺纯化后得到精制毒素,测定精制毒素的絮状单位、体积和蛋白氮含量,并计算其产量、纯度和收率。结果不同搅拌策略对C.tetani的生长、产毒、tent基因和tetR基因的表达量以及精制毒素的产量、纯度和收率均有显著影响(P均<0.05);Stir-3组批培养结束时的平均产毒量为(110±10)Lf/mL,精制毒素的平均产量为(88±9)Lf/mL培养基,均高于其他试验组(P均<0.05);Stir-3组精制毒素的平均收率和纯度分别为79.8%±3.0%和(2798±83)Lf/mg PN,高于Stir-1和Stir-4组(P均<0.05),但与Stir-2组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论C.tetani大规模发酵时,可以采取两阶段搅拌控制策略(前12 h不搅拌,12 h后连续搅拌)以提高破伤风毒素的产量和纯度,不同搅拌策略可通过影响tent基因和tetR基因的表达量进而影响C.tetani的产毒量。 展开更多
关键词 破伤风梭状芽孢杆菌 规模发酵 破伤风毒素 tent基因 tetR基因
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贝莱斯芽孢杆菌B6强化驱油机制分析及在高矿化度油藏中的应用
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作者 陈显轲 孙培耀 +4 位作者 蔡勇 张淼峰 张伟 杨博 马安周 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1948-1959,共12页
【目的】筛选油藏内源功能微生物并探究其驱油机理,现场试验以确定油藏内源微生物提高原油采收技术应用的工艺和技术可行性。【方法】采集英东油田样品,利用原油平板筛选驱油功能菌,评价其环境适应性并优化培养条件,通过乳化性能、降黏... 【目的】筛选油藏内源功能微生物并探究其驱油机理,现场试验以确定油藏内源微生物提高原油采收技术应用的工艺和技术可行性。【方法】采集英东油田样品,利用原油平板筛选驱油功能菌,评价其环境适应性并优化培养条件,通过乳化性能、降黏防蜡和烃转化能力等评估其驱油性能并探索其潜在机制,并在油田现场进行微生物强化驱油试验。【结果】从油水样品中分离到的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)B6,其乳化活性指数(emulsifying activity index,EI24)值为100.00%,降黏率为97.20%,防蜡率为86.90%,表明菌株B6具有良好的乳化降黏性能,具有提高原油采收的潜力,并且能够减少原油中的重质组分而增加轻质烃类,改善原油物性,提升原油品质。进一步在英东油田、跃进油田和花土沟油田进行微生物单井吞吐和清防蜡作业,共进行62井次现场试验,累计增油1460.36 t,平均延长洗井周期47 d,经济效益为342.50万元,投入产出比为1:4。【结论】通过室内研究和现场试验,证实内源微生物Bacillus velezensis B6具有显著提高原油采收和油井清防蜡的效果,应用潜力巨大。 展开更多
关键词 微生物吞吐采油 乳化降黏 规模发酵 微生物清防蜡
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灵芝液态深层发酵产物中10种不饱和脂肪酸类化合物的鉴定 被引量:4
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作者 朱晓璐 张劲松 +5 位作者 周帅 韩伟 唐庆九 王金艳 冯娜 冯杰 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1800-1810,共11页
通过规模化液态深层发酵获得灵芝发酵产物,采用多种硅胶色谱柱层析及重结晶的方式,从中分离得到10个化合物。通过核磁、质谱等波谱分析,鉴定出这些化合物均属于含羟基或酮基的不饱和脂肪酸类化合物,分别为(9S,10R,11E,13R)-9,10,13-trih... 通过规模化液态深层发酵获得灵芝发酵产物,采用多种硅胶色谱柱层析及重结晶的方式,从中分离得到10个化合物。通过核磁、质谱等波谱分析,鉴定出这些化合物均属于含羟基或酮基的不饱和脂肪酸类化合物,分别为(9S,10R,11E,13R)-9,10,13-trihydroxyoctadec-11-enoicacid(1)和(9S,10R,11E,13S)-9,10,13-trihydroxyoctadec-11-enoicacid(2)的混合物、12S^(*),13S^(*)-dihydroxy-9-oxo-10(E)-octadecenoicacid(3)、9R^(*),10R^(*)-dihydroxy-13-oxo-11(E)-octadecenoicacid(4)、12S^(*),13R^(*)-dihydroxy-9-oxo-10(E)-octadecenoicacid(5)、9S^(*),10R^(*)-dihydroxy-13-oxo-11(E)-octadecenoicacid(6)、10(S)-hydroxy-8(Z)-octadecenoic acid(7)、12-oxooctadeca-8,10-dienoic acid(8)、9,12-dihydroxy-10-eicosenoic acid(9)和9-oxooctadeca-10,12-dienoicacid(10)。这些化合物均为首次从灵芝发酵产物中获得,且具有不同程度的体外抗肿瘤活性。其中,化合物8和化合物10对L1210细胞增殖抑制的IC_(50)值分别为13.00μmol/L和16.88μmol/L,对K562细胞增殖亦有良好的抑制效果,是具有抗肿瘤潜力的天然产物。 展开更多
关键词 灵芝 规模化深层发酵 结构鉴定 体外抗肿瘤活性
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