针刺对肥胖大鼠下丘脑视上核的作用

目的 :探讨针刺减肥的作用机理。方法 :采用神经电生理和生化技术观察针刺治疗前后肥胖大鼠的变化。结果 :肥胖大鼠体重、Lee s指数、体脂、空腹血糖 (FBS)、空腹胰岛素 (FINS)和下丘脑视上核 (SON)神经细胞自发放电频率均明显高于正常大鼠 ,而胰岛素敏感性指数 (IAI)水平明显低于正常大鼠。相关分析显示 ,SON神经细胞自发放电频率与肥胖指标、FBS、FINS水平呈正相关 ,而与IAI水平呈负相关。针刺治疗后肥胖大鼠肥胖指标、FBS、FINS和SON神经细胞自发放电频率均明显回降 ,而IAI水平明显回升。结论 :生物机体SON神经功能亢奋可能是产生肥胖重要因素之一。针刺对肥胖机体下丘脑SON神经功能的良性调整作用可能是针刺减肥中枢作用机制之一。

蓝斑在刺激视上核镇痛中的作用

应用核团微量注射、放射免疫测定（ＲＩＡ）和高压液相（ＨＰＬＣ）观察了刺激视上核（ＳＯＮ）对蓝斑（ＬＣ）灌流液中催产素（ＯＴ）、精氨酸加压素（ＡＶＰ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）的含量的变化以及蓝斑注射ＯＴ和ＡＶＰ的拮抗剂对痛阈（ＰＴ）的影响。结果表明：刺激ＳＯＮ后３０到９０ｍｉｎ，ＬＣ灌流液中ＯＴ的含量，３０ｍｉｎＡＶＰ的含量，６０ｍｉｎ５－ＨＴ的含量明显增加，而ＮＥ的含量在３０和６０ｍｉｎ时明显降低。注射ＡＶＰ的Ｖ１拮抗剂到ＬＣ对注射Ｌ－谷氨酸到ＳＯＮ引起的镇痛作用无影响，Ｖ２拮抗剂可部分抑制和ＯＴ拮抗剂可翻转刺激ＳＯＮ引起的镇痛作用。以上结果提示刺激ＳＯＮ引起的镇痛作用可能是由于ＳＯＮ释放的ＯＴ通过作用于ＬＣ内的ＯＴ和Ｖ２受体使ＬＣ内的５－ＨＴ增加和ＮＥ降低而产生的。

大鼠视上核、室旁核肠三叶因子表达与实验性胃溃疡的关系

目的探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间肠三叶因子(ITF)在下丘脑视上核(SON)、室旁核(PVN)的表达及其与实验性胃溃疡愈合的关系。方法以免疫组织化学染色、酶联免疫吸附实验分别检测溃疡组(42只)和正常组(6只)大鼠下丘脑和血清及ITF的表达及含量变化,RT-PCR检测ITFmRNA的转录情况。结果 ITF免疫反应阳性物质主要位于视上核和室旁核大细胞部。溃疡1d视上核和室旁核ITF积分吸光度略增高,2d、4d和6d逐渐升高,6d达高峰(P<0.01),10～23d均维持在较高水平(P<0.05)。血清ITF的变化与免疫组织化学法结果相似;溃疡组ITF/3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)吸光度比值在溃疡2～23d均高于正常组(P<0.01,或P<0.05)。结论胃溃疡自愈期间可能通过下丘脑和血清ITF的高表达参与溃疡愈合的调节。

大鼠下丘脑离体脑薄片视上核神经元的全细胞记录

在大鼠下丘脑薄片标本上对52例视上核神经元进行了全细胞膜片箝记录。膜被动及主动电生理参数测量如下：静息电位，59±8mV；输入阻抗，535±129MΩ；时间常数，32±9ms；动作电位幅度，99±11mV；超射值，37±13mV（n＝39）。大多数神经元在接受去极化刺激时出现明显的慢后超极化电位或电流。我们发现，在电压箱状态下几乎所有的视上核神经元均接受兴奋性和／或抑制性突触传λ（n=13）。药理学实验表明，兴奋性突触后电流是由non－NMDA亚型谷氨酸受体介导，而抑制性突触后电流由GABAA受体介导。

大鼠下丘脑视交叉上核及视上核内加压素神经元心理应激后的变化

为探讨心理因素对下丘脑精酸加压素(AVP)神经元的影响,采用心理应激动物模型,以免疫组织化学及微机图像分析等方法,检测大鼠下丘脑的视交叉上核(SCN)及视上核(SON)等AVP阳性细胞的总面积,将闪光间期长短不均加电刺激组(A组)和光、电刺激与A组相同但闪光间期衡定组(B组)及仅给同量闪光的对照组(C组)的AVP阳性物互相比较.结果,在SCN,A组>B组>C组的;在SON,则B组>A组>C组的.观测正中隆起(ME)外带的阳性纤维,A组的呈色深且面积大,B组和C组的呈色均较浅且面积小.此外,不论A组或B组,同一组的SCN及SON内AVP阳性物总面积的变化皆呈现负相关的增长关系,其相关系数(r)分别为-0.8024和-0.7679,t检验表明,其相关性有显著意义,据此,著者认为:SON及SCN的AVP神经元都与心理应激反应有关,但变化方向有所不同,其意义有待研究.

自发性高血压大鼠下丘脑视上核一氧化氮合酶与加压素的共表达

目的:观察自发性高血压大鼠(SHR)与正常大鼠下丘脑视上核(SON)内一氧化氮合酶(NOS)与加压素(AVP)在神经元内的分布和共存。方法:运用NADPH-d组织化学方法,结合ABC免疫组织化学技术。结果SON内NOS阳性神经元与AVP免疫阳性神经元的分布与形态基本类似,并高度共存:SHR组NOS-AVP双标记阳性神经元约占阳性标记神经元总数的62.7％,主要分布于SON的腹侧部;正常SD对照组NOS-AVP双标记阳性神经元约占阳性标记神经元总数的72.3％。结论:实验结果提示一氧化氮(NO)与AVP在下丘脑的血压神经内分泌调节活动中起着重要的介导作用,以及对高血压的发生发展也可能有影响。

低渗刺激后大鼠视上核内星形胶质细胞和神经元的可塑性改变及其相互关系

为观察低渗刺激后大鼠视上核(SON)内星形胶质细胞和神经元的可塑性反应及其两者在反应时间和空间上的相互关系,我们采用大鼠尾静脉注射5.5 ml/kg低渗盐水(0.83%葡萄糖+0.3%NaCl)制作模型,应用抗Fos、抗胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)单标记,以及抗Fos/抗GFAP双标记、抗Fos/抗血管加压素(VP)/抗GFAP三标记的免疫组化方法.结果发现:在SON中GFAP阳性星形胶质细胞数量在刺激后15 min增加,其胞体肥大,突起伸长变粗,45 min达高峰.Fos阳性星形胶质细胞胞核呈蓝黑色小点,刺激后15～45 min达高峰,90 min明显减少;Fos阳性神经元胞核较大,刺激后15 min未见表达,45 min少量表达,90 min表达增加.该结果表明低渗刺激后,SON内星形胶质细胞的Fos表达早于神经元,三重标记显示星形胶质细胞与神经元关系密切,提示S0N内星形胶质细胞可能在低渗刺激的调节中发挥一定作用.

睡眠剥夺应激对幼鼠海马和视上核中谷氨酸受体及转运体表达的影响

目的:观察睡眠剥夺对大鼠幼鼠视上核和海马组织谷氨酸受体NMDAR2及其转运体GLAST的影响,为防治因睡眠剥夺引起中枢功能的损害以及可能对学习、记忆产生的影响提供理论依据。方法:采用免疫组织化学的方法,观察与应激反应相关的视上核以及和学习、记忆密切相关的NMDAR2和GLAST表达的变化情况。通过灰度分析和荧光半定量分析的方法对实验结果进行处理。结果:视上核和海马均显示,在睡眠剥夺第3 d,NMDAR2和GLAST开始增加;睡眠剥夺第5 d,增加更为明显;睡眠剥夺的第7 d,增加的程度有所降低;睡眠剥夺第14 d,视上核NMDAR2和GLAST表达程度与正常对照组比较无明显差异。结论:睡眠剥夺对幼鼠视上核和海马的NMDAR2和GLAST的表达程度在一定的时间内有较为明显的影响。7 d后随着睡眠剥夺时间的延长,这种影响趋于消失,这可能与中枢神经系统自身调节和自我保护有关。

脊髓横断后下丘脑室旁核和视上核Fos表达的观察

目的:观察不同节段脊髓横断后引起下丘脑室旁核(PVN)、视上核(SON)Fos表达,以初步探讨急性脊髓损伤引起脑内心血管调节核团反应的机制。方法:脊髓C4、T4、T12横断术后3h,用免疫组织化学方法观察PVN、SON内Fos表达。结果:PVN内Fos阳性神经元数目在C4组最高,T4组次之,T12组最低;SON内,各组间Fos阳性神经元数目差异无显著性。结论:急性脊髓损伤可引起PVN、SON神经元产生特异性反应,但两者发生反应的机制不同。

力竭运动对大鼠室旁核和视上核神经元一氧化氮合酶表达的影响

目的:研究下丘脑室旁核(PVN)和视上核(SON)中神经元型一氧化氮合酶(nNOS)与运动性疲劳的关系。方法:雄性成年大鼠32只随机分为对照组、运动后即刻组、运动后0.5h组和运动后4h组。实验组强迫游泳致力竭制成运动性疲劳模型,用ABC免疫组织化学方法观测室旁核和视上核nNOS表达状况,并进行半定量分析和统计学处理。结果:运动后即刻,室旁核和视上核nNOS的表达均明显低于对照组(P<0.001;P<0.05);运动后0.5h,nNOS的表达均比对照组低(P<0.001);运动后4h,室旁核nNOS的表达与对照组无显著差异,而视上核nNOS的表达与对照组相比仍明显降低(P<0.05)。结论:运动性疲劳使大鼠下丘脑室旁核和视上核nNOS的表达降低,提示室旁核和视上核nNOS与中枢运动性疲劳的形成密切相关,它们可能在机体对运动性疲劳的反应中起调节作用。

刺激视上核对大鼠痛阈及电针镇痛的影响

以钾离子透入引起的大鼠甩尾反应为痛指标,观察了电和化学刺激视上核(SON)对大鼠痛(?)(PT)和电针(EA)镇痛的影响。电刺激SON后,PT明显高于假刺激组(P<0.05～0.001),电刺激SON后电针足三里,镇痛效应明显提高,并有明显的量效关系。电刺激SON的近旁部位(0.5～1 mm)对PT及电针镇痛无明显影响。SON内注射L-谷氨酸(L-Glu)后痛(?)和电针镇痛效应都明显高于对照组,也有明显的量效关系。侧脑室注射纳络酮(Naloxone,NX)对SON内注射L-Glu的镇痛效应无明显影响,但可部分减弱电针镇痛效应。上述结果提示,下丘脑视上核在痛觉调制和电针镇痛过程中发挥重要作用,这种作用可能主要是由非阿片肽类物质介导的。

一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠视上核及室旁核的分布

目的：探讨自发性高血压大鼠视上核及室旁核内一氧化氮合酶阳性神经元的改变。方法：用ＮＡＤＰＨ－ｄｉ－ａｐｈｏｒａｓｅ组织化学方法，观察和比较了一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠和正常对照大鼠视上核和室旁核的分布。光镜下观察下丘脑视上校及室旁核的一氧化氮合酶阳性细胞形态、分布并进行计数。用图像分析仪测其灰度值。结果：视上核内一氧化氮合酶阳性细胞在高血压组明显少于对照组（Ｐ＜０．０１）。而室旁核内阳性细胞数则无明显差异。视上核及室旁核内的一氧化氮合酶阳性细胞灰度值在高血压组均明显高于对照组。提示这两上核内一氧化氮合酶含量的改变可能与高血压的形成、发展有关。

安氟醚和异氟醚对大鼠脑薄片视上核神经元自发电活动的影响

目的 :了解吸入麻醉药安氟醚 (Enf)和异氟醚 (Iso)对大鼠下丘脑视上核 (SO)神经元电生理的影响。方法 :应用膜片钳技术 ,观察Enf和Iso对大鼠下丘脑薄片SO神经元自发电活动的影响。结果 :Enf(3 0 % )对SO神经元自发电活动有明显的兴奋作用 ,Iso(2 2 % )对SO神经元自发电活动的兴奋作用与Enf基本相同。用正常人工脑脊液(ACSF)冲洗 5分钟放电频率可恢复至给药前水平。结论 :Enf和Iso对下丘脑SO电活动有可逆性的兴奋作用 ,表明SO是Enf和Iso在中枢的重要作用部位。

烫伤对大鼠视上核精氨酸加压素阳性细胞的影响

本研究应用免疫组织化学和计算机图像分析技术,定量研究了烫伤对大鼠视上核精氨酸加压素(AVP)阳性细胞分泌的影响。实验结果表明:大鼠烫伤后视上核AVP阳性反应物体积减小,尤以烫伤后即刻最为显著(P<0.01);而视上垂体束纤维串珠样结构却略有增加。说明大鼠烫伤时,从下丘脑视上核AVP阳性细胞胞体向垂体后叶运送AVP的量增加。本研究从形态学角度提示了AVP参与大鼠烫伤后应激反应的过程。

高渗刺激后大鼠视上核星形胶质细胞和神经元的反应及其相互关系的光、电镜研究

目的探讨大鼠尾静脉注射高渗盐水(9%NaCl,5.5ml/kg)后,视上核(SON)内星形胶质细胞和神经元的可塑性反应及相互间的关系。方法用免疫组织化学和免疫电镜技术,观察刺激后15,45,90,180和360minSON内缝隙连接蛋白43(Cx43)和蛋白32(Cx32)的变化及超微结构。结果光镜下观察到Cx43阳性星形胶质细胞在15min出现,45min达到高峰;Cx32阳性神经元90min达到高峰。电镜下在SON内,观察到下列四种超微结构:(1)突触样结构(synapselikestructure),位于神经元的轴突末梢与Cx43阳性的星形胶质细胞突起之间;(2)三成分的突触复合体(tripartitesynapticstructure),由突触前膜、突触后膜和靠近此突触的星形胶质细胞突起共同组成;(3)同源性缝隙连接(gapjunction,GJ),位于星形胶质细胞突起之间,两侧均为Cx43;(4)“异源性缝隙连接样结构”(heterotypicgapjunctions,HGJ),是由Cx32阳性神经元和Cx43阳性星形胶质细胞突起组成的一种超微结构。结论高渗刺激后,SON内Cx43阳性星形胶质细胞和Cx32阳性神经元明显增加,前者出现和高峰的时间早于神经元;两者之间的HGJ数量明显增加,其他结构的数量变化不明显,因此两者可能是通过HGJ进行快速的信息交流。

LPS对大鼠下丘脑视上核nNOS和c-fos表达的影响

为探讨下丘脑视上核(SON)在神经免疫调节中的作用,本实验应用免疫组化技术观察了腹腔注射脂多糖(LPS)后大鼠下丘脑视上核nNOS和c-fos表达的变化。结果表明:LPS可使大鼠视上核内nNOS和c-fos阳性细胞的OD值显著增高,且视上核内部分神经元可同时表达nNOS和c-fos。结果提示,视上核可能为免疫调节的高级整合中枢之一,可能通过NO和／或c-fos途径调节免疫功能。

中国树鼩下丘脑视上核和室旁核内加压素能和催产素能神经元的形态计量学分析

采用免疫组织化学ＰＡＰ／ＤＡＮ－镍加强技术和形态计量法研究了中国树鼩下丘脑加压素（ＶＰ）能和催产素（ＯＴ）能视上核主部（ＳＯＮｐ）、视上核交叉后部（ＳＯＮｒ）和室旁核（ＰＶＮ）的平均矢轴长度，ＳＯＮｐ，ＳＯＮｒ和ＰＶＮ内ＶＰ能和ＯＴ能神经元胞体截面积的平均值；ＳＯＮｐ，ＳＯＮｒ和ＰＶＮ的ＶＰ能和ＯＴ能神经元总数；各校团的各个系列节段内ＶＰ能和ＯＴ能神经元的比较计数。发现，ＳＯＮｐ前１／３部分ＯＴ能神经元明显多于ＶＰ能的，而后２／３部分则相反；ＳＯＮｒ前２／３部分ＶＰ能神经元明显多于ＯＴ能的，而后１／３部分两者差别不明显；ＰＶＮ前２／３部分ＯＴ能神经元明显多于ＶＰ能的，而后１／３部分则相反。本文就中国树下丘脑ＳＯＮ和ＰＶＮ内ＶＰ能和ＯＴ能神经元的形态计量学资料与大鼠的进行了比较。

大鼠下丘脑薄片视上核神经元的细胞内生物电记录

从成年Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠用振动切片机制备含有视上核的下丘脑冠状薄片（５００μｍ厚），并对视上核神经元（ｎ＝１７）进行常规细胞内生物电记录。测得静息电位－６０±８ｍＶ，膜输入电阻１７３±５８ＭΩ，时间常数１０．２±３．９ｍｓ，动作电位幅度６５±１２ｍＶ，阈电位－４４±７ｍＶ，由Ｉ─Ｖ曲线测得斜率电阻１５８±６２ＭΩ，大部分细胞还显示内向整流特性。在静息电位状态下，５７％细胞保持静息，４３％有自发锋电位发放。细胞的锋电位发放模式７８％为时相型，２２％为持续型。外源性去甲肾上腺素（ｎ＝７）或谷氨酸钠（ｎ＝５）可引起伴有膜电阻减小的去极化反应，并可导致锋电位的串发放。

异丙酚和硫喷妥钠麻醉对大鼠脑薄片视上核神经元自发电活动的影响

目的 :研究静脉麻醉药硫喷妥钠 (SP)和异丙酚 (Pro)对新生鼠下丘脑视上核 (SO)神经元自发电活动的影响 ,为进一步探讨全身麻醉作用机理打下基础。方法 :应用膜片钳技术 ,观察SP和Pro对SO神经元自发放电活动的变化。结果 :实验发现SP 2 5 μmol/L或Pro 2 0 μmol/L均明显抑制SO神经元的自发放电频率 ,用正常人工脑脊液(ACSF)冲洗 5分钟后其放电频率可恢复至给药前水平。结论 :SP或Pro对下丘脑SO神经元自发电活动均有可逆性的抑制效应 。

束缚应激对大鼠下丘脑室旁核、视上核一氧化氮合酶活性的影响

目前已知下丘脑是应激反应的关键性调节中枢，下丘脑内一氧化氮是否参与应激反应尚未见报道。本文运用ＮＡＤＰＨ－ｄ酶组化技术和计算机图象分析方法，对束缚应激大鼠下丘脑室旁核（ＰＶＮ）和视上核（ＳＯＮ）一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经元的相对切面面积和平均灰度进行了分析。结果显示，大鼠在急性束缚应激４小时后，其下丘脑ＰＶＮ和ＳＯＮ内的ＮＯＳ阳性神经元的平均灰度值与正常大鼠比较均明显降低（Ｐ＜０．００１）；ＳＯＮ的ＮＯＳ阳性神经元的相对切面面积明显大于正常大鼠（Ｐ＜０．００１），但ＰＶＮ的ＮＯＳ阳性神经元的相对切面面积未见明显改变（Ｐ＞０．０５）。