新生小牛视杆细胞体外发育过程中细胞形态及视色素分子分布的极性特征

目的明确新生小牛视网膜视杆细胞体外发育过程中细胞形态及视色素分子分布的变化规律。方法分离培养新生小牛视网膜神经细胞,培养10、20、30和40d的神经元用于免疫细胞化学染色,采用rho4D2抗体标记视网膜视杆细胞,观察不同培养时期的阳性细胞的形态特征及视色素分子分布的特点。用图像分析系统定量测量阳性细胞的免疫反应强度。结果rho4D2阳性细胞呈现两种形态,一种为无突起的小圆形细胞,另一种为带有顶端突起的细胞。体外培养10d时,视色素弥漫地分布于整个细胞膜及顶端突起;培养20d时视色素逐渐向顶端突起或细胞的一端集中;到培养30、40d时,视色素聚集于顶端突起或细胞的一端,呈现极性分布特征。定量分析显示,体外培养20d的阳性细胞,免疫反应强度较培养10d时明显增强,培养20、30、40d的阳性细胞的免疫反应强度没有明显差异。结论体外培养30、40d的视杆细胞具备细胞结构及视色素分子分布的极性特征,并有高水平的蛋白质表达能力,是发育成熟的神经元。