豚鼠形觉剥夺性近视视网膜早基因c-fos的动态表达

目的建立豚鼠形觉剥夺性近视(form-deprivationmyopia,FDM)动物模型,并对豚鼠形觉剥夺性近视形成及恢复过程中视网膜早基因c-fos的动态变化进行观察,研究豚鼠FDM中视网膜信号转导及抑制近视的可能分子机制。方法3周三色豚鼠40只,随机均分为4组:遮盖前组、单眼遮盖1周组、单眼遮盖2周组及去遮盖组。对各组进行视网膜检影和A超测眼轴,分别运用免疫组化和RT-PCR观察各组视网膜c-fos蛋白及mRNA的表达和变化。结果遮盖2周后,遮盖眼较对照眼呈高度相对近视(-8.8 D),视网膜c-fos表达明显下调,双眼屈光度、眼轴和视网膜c-fos的表达差异均有显著性(P<0.05);遮盖2周后,去遮盖1周,去遮盖眼较对照眼呈中度相对近视(-5.9 D),但去遮盖前后屈光度及眼轴差异无显著性(P>0.05),去遮盖眼较对照眼视网膜c-fos的表达明显上调,差异有非常显著性(P<0.01)。结论形觉剥夺能成功诱导豚鼠近视的发生及发展,并抑制视网膜c-fos的表达,而去除形觉剥夺可抑制近视的发展,并诱导视网膜c-fos的表达上调,证明c-fos的表达规律不仅反映外界视觉环境对眼的刺激,并与近视发展规律呈负相关,可能参与视网膜的信号转导和近视的抑制机制。

缺血再灌注大鼠视网膜细胞线粒体钙含量与组织型纤溶酶原激活物活性的相关性

目的观察缺血再灌注大鼠视网膜细胞线粒体钙含量与组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen acti-vator,TPA)活性的变化,探讨两者之间的相关性。方法采用提高眼压法造成视网膜缺血后,恢复眼压形成血流再灌注。实验分正常对照组和缺血1 h再灌注1 h组、缺血1 h再灌注2 h组、缺血2 h再灌注1 h组、缺血2 h再灌注2 h组四个实验组,每组各取10例测定视网膜细胞线粒体钙浓度与TPA活性的变化,并进行相关性分析。结果缺血再灌注后,大鼠视网膜细胞线粒体钙含量与TPA活性随缺血和再灌注时间的延长而升高(P<0.01),两者之间呈显著相关性(r=0.524,P<0.01)。结论缺血再灌注可引起视网膜细胞线粒体钙含量的升高,从而导致视网膜组织TPA活性的增高,引起视网膜组织结构和功能的损伤。

视网膜缺血再灌注后即早基因C-FOS、C-JUN的表达

目的观察大鼠视网膜缺血再灌注(retinalischemiareperfusion,RIR)后,凋亡即早基因cfos、cjun及白介素1β(IL1β)多肽在视网膜各层细胞中的表达变化,进一步明确凋亡即早基因和白介素1β与RIR损伤发生机制的关系。方法采用前房灌注生理盐水,形成130mmHg(17.3kPa)高眼压,诱导大鼠视网膜缺血60min,解除高眼压,建立RIR模型。缺血60min,再灌注1h、3h、6h、12h、24h后作视网膜石蜡切片,观察cfos、cjun及IL1β的免疫组化结果。结果正常对照组未见cfos、cjun及IL1β的表达,RIR后,cfos、cjun在视网膜神经节细胞层(ganglioncelllayer,GCL)和内核层(innernuclearlayer,INL)的表达为,再灌注1h少量表达,3h达到高峰,6h开始下降,12h、24h几乎趋于正常组表达。IL1β在再灌注12h、24h出现表达。而外核层(outernuclearlayer,ONL)几乎均无无阳性表达。结论cfos、cjun及IL1β参与RIR损伤的发生,RIR中视网膜节细胞层和内核层细胞存在凋亡征象。

视神经钳夹伤后凋亡相关基因Bcl-2和Bax在大鼠视网膜上的表达

目的研究视神经钳夹伤后凋亡相关基因Bcl-2和Bax在大鼠视网膜上的表达,探讨Bcl-2和Bax在视神经钳夹伤后视网膜神经元凋亡中的作用。方法将雄性LongEvans大鼠50只,随机分成实验组和对照组,每组25只大鼠。建立大鼠视神经钳夹伤模型,实验组和对照组按视神经夹伤后不同时间分为伤后1 d、3 d、5 d7、d1、4 d 5个时间点,每个时间点5只动物。处死动物后取材,制备大鼠视网膜石蜡切片,进行免疫组化SABC染色,以检测视网膜Bcl-2和Bax的表达。结果视神经钳夹伤后视网膜Bcl-2的表达下降,而Bax表达仍为不变的水平。结论视神经钳夹伤后视网膜Bcl-2表达的下降,导致了视网膜神经元的凋亡。

低氧预适应机制及视网膜低氧预适应的研究进展

低氧预适应可增强机体耐受低氧的能力,这种内源性保护现象存在于多种组织和器官。目前,对心脏和脑的低氧预适应的研究较为深入,而对视网膜低氧预适应的研究尚处于起步阶段。本研究对低氧预适应的可能机制进行综述,并介绍了国外对视网膜低氧预适应的研究现状以及低氧预适应在视网膜变性疾病中的应用前景。

正常人黄斑部视网膜神经上皮层厚度的分区测量

目的测量正常人黄斑部各分区的视网膜神经上皮层厚度(neurosensory retinal thickness,NRT)。方法应用光学相干断层成像术(optical coherence tomography,OCT3000)对60例(120眼)正常人的黄斑部进行扫描,扫描模式为快速黄斑厚度地形图(fast macular thickness map),分析模式为视网膜厚度/体积分析(retinal thickness/volume analysis),应用OCT3000自带软件分别测出9个分区和黄斑中心小凹的NRT及总黄斑体积。用SPSS11.0统计软件包分析不同年龄、眼别、性别组间上述指标有无统计学差异。结果不同年龄组间除黄斑中心小凹、上、下方外环区、总黄斑体积外(P<0.05),其余部位差异均无显著性;不同眼别间除鼻侧内环区、上、下方外环区、颞侧外环区外(P<0.05),其余部位差异均无显著性;不同性别间中央区、内环区各象限、鼻侧外环区、颞侧外环区、总黄斑体积差异有显著性(P<0.05)。结论OCT3000可用于测量黄斑部各分区的NRT,其厚度值存在年龄、眼别及性别差异。

大鼠糖尿病早期给光/撤光中心视网膜神经节细胞分层的变化

目的探讨大鼠糖尿病早期给光/撤光中心视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)分层的变化规律,以解释糖尿病早期对比敏感度下降的原因。方法采用基因枪技术标记大鼠糖尿病早期RGC,以带Z轴的Leica显微镜和CCD照相机对标记的RGC进行拍照,并获得不同物像在纵轴的深度读数,分析树突层面在内丛状层的位置。结果①糖尿病第1个月和3个月时的撤光中心RGC的树突分层位置向内核层靠近,与正常大鼠相比差异有显著性(P<0.001)。糖尿病第1个月和糖尿病第3个月时的给光中心RGC的树突分层位置与对照组相比差异均无显著性(P>0.05)。②从分布上看,撤光中心RGC的树突分层向0%方向单向移动,这种变化主要出现在B类(糖尿病第1个月时P<0.001,糖尿病第3个月时P<0.01)和C类细胞(糖尿病第3个月时P<0.001)中。给光中心RGC的树突分层比例与正常组相似,仅在糖尿病第1个月时A类细胞树突分层位置向内核层有所移位(P<0.01)。③在糖尿病第1个月和第3个月时分别发现85个和119个的异常RGC细胞。结论糖尿病第1个月和第3个月时RGC细胞树突在内丛状层的分布受到了干扰,可能导致明暗刺激在视网膜上的不平衡,引起对比敏感度的下降。

高度近视眼黄斑部不同区域神经上皮厚度的定量测定及其意义

目的研究高度近视眼黄斑部不同区域的神经上皮层厚度的变化,并分析其与屈光度之间的相关性。方法选取高度近视眼患者78例,按屈光度不同分为A(-6.0^-9.0 D)、B(-9.1^-15.0 D)、C(>-15.0 D)三组。采用Huphery-3000光学相干断层扫描(optical coherence tomogra-phy,OCT)测量黄斑部9个不同分区的视网膜神经上皮层厚度,比较它们之间的差别,并分析各区域神经上皮层厚度与屈光度之间的相关性。结果C组A2~A6区视网膜神经上皮厚度分别为(244.31±24.46)mm、(224.73±27.45)mm、(236.08±27.71)mm、(236.15±34.10)mm与(219.88±20.42)mm,与A、B组比较差别有显著性(P<0.001),其余各区组间差别不明显;A2~A6区视网膜神经上皮厚度与近视屈光度明显相关,r分别为0.387、0.462、0.315、0.403、0.326,经统计学检验发现,差异有显著性(P<0.05)。结论高度近视眼黄斑部神经上皮损害随近视屈光度不断增高而呈区域选择性萎缩变薄,OCT将为追踪观察此种损害提供理想方法。

RIZ1、CD133在浆液性卵巢癌组织中的表达及其临床意义

【目的】探讨视网膜母细胞瘤蛋白结合辞指结构基因(RIZ1)、5次跨膜蛋白(CD133)在浆液性卵巢癌组织中的表达及其临床意义。【方法】选取2018年1月至2019年6月在本院确诊的卵巢癌组织标本70例(卵巢癌组)、因子宫肌瘤手术获取的正常卵巢组织标本70例(对照组),采用免疫组化染色检测两组标本中的RIZ1蛋白、CD133蛋白表达水平,比较卵巢癌组中不同组织学分级、不同FIGO分期、有无淋巴结转移的RIZ1蛋白、CD133蛋白表达水平。【结果】卵巢癌组织中的RIZ1蛋白阳性表达率为32.86%(23/70),显著低于对照组的85.71%(60/70);CD133蛋白阳性表达率为51.43%(36/70),显著高于对照组的11.43%(8/70),其差异均具有统计学意义(P<0.05)。不同组织学分化程度的卵巢癌组织中的RIZ1蛋白阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05),但在不同FIGO分期、是否发生淋巴结转移的卵巢癌组织中比较差异无统计学意义(P>0.05);不同组织学分化程度、不同FIGO分期、是否发生淋巴结转移的卵巢癌组织中的CD133的阳性表达率比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。【结论】浆液性卵巢癌组织中RIZ1蛋白表达下调、CD133蛋白表达上调,且其均与肿瘤的发生、发展密切相关。