番泻苷B通过Wnt/β-catenin通路抑制视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞增殖、凋亡和侵袭

目的探究番泻苷B对视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞增殖、凋亡、侵袭及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法通过采用不同剂量(0、5、10、20μmol/L)番泻苷B处理HXO-Rb44细胞,将细胞随机分为4组:Control组,番泻苷B 5、10、20μmol/L组。MTT法检测细胞活力;克隆形成实验检测克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Transwell检测侵袭细胞数;细胞成球实验检测细胞成球直径和细胞成球数目;蛋白质印迹检测cleaved caspase-3、caspase-3、MMP-2、MMP-9、SOX2、OCT4、CD44、Wnt1、β-catenin蛋白表达。结果与Control组比较,番泻苷B 10、20μmol/L组细胞活力、克隆形成率显著降低(P<0.05),细胞凋亡率和cleaved caspase-3/caspase-3表达显著升高(P<0.05),侵袭细胞数和MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞成球直径、细胞成球数目和SOX2、OCT4、CD44蛋白表达显著降低(P<0.05),Wnt1、β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论番泻苷B可抑制视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞增殖、侵袭和干细胞样特性,诱导细胞凋亡,抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化。

基于倾向性评分逆概率加权法的视网膜母细胞瘤疗效评价及其预后影响因素分析

目的评估手术、化疗及手术联合化疗3种治疗方式对视网膜母细胞瘤(RB)的疗效,分析RB患者的预后影响因素。方法选取2000年1月1日-2019年12月31日美国监测、流行病学和最终结果(SEER)数据库登记的RB患者1188例临床资料进行回顾性分析。采用倾向性评分逆概率加权法(IPTW)对接受手术、化疗或手术联合化疗治疗的3组患者基线特征进行平衡。采用Log-rank检验比较3组患者的生存概率,采用Cox回归模型分析RB患者预后影响因素。结果共纳入RB1188例,其中手术组426例,化疗组200例,手术联合化疗组562例。经IPTW加权后,患者的年龄、性别、种族等基线资料均达到平衡(P>0.05)。Log-rank检验结果显示,加权前后3组生存曲线比较差异均有统计学意义(P<0.05);加权后,手术组患者生存情况明显优于化疗组和手术联合化疗组(P<0.05),化疗组与手术联合化疗组比较差异无统计学意义(P>0.05)。加权后患者1年、3年和5年的生存概率为:手术组99.7%、98.9%和98.6%;化疗组97.4%、95.8%和95.8%;手术联合化疗组97.9%、95.8%和95.0%。Cox回归分析结果显示,与手术组比较,化疗组患者特异性死亡风险比为1.367(95%CI 1.100~1.700),手术联合化疗组特异性死亡风险比为1.132(95%CI0.963~1.330);与RB病灶为1个的患者比较,RB病灶数≥2个的患者特异性死亡风险比为0.399(95%CI0.268~0.594)。结论RB患者接受治疗后生存概率较高;在控制年龄、性别等因素的影响后,3种治疗方式中手术的疗效更好;多灶性可能是RB患者预后的独立影响因素。

人工智能技术在视网膜母细胞瘤中的应用现状

视网膜母细胞瘤是一种常见于儿童的眼部恶性肿瘤,是威胁儿童视力和生命的主要原因之一。视网膜母细胞瘤的诊断和评估一直是临床的热点问题。在过去的几年,人工智能(AI)技术的应用在医学领域取得了显著进展,为视网膜母细胞瘤的诊断和治疗提供了新的机会和挑战,如利用AI算法分析海量临床数据,可以帮助医生更准确地诊断疾病,提供个性化的治疗方案。此外,AI技术还在医学图像分析、基因组学研究等多方面发挥重要作用,可以助力新药开发、改善患者预后。本文结合近年研究情况,综述AI在视网膜母细胞瘤中的应用进展。

视网膜母细胞瘤患儿血清LncRNA-NEAT1水平表达及对瘤细胞生物学功能的影响

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)核富集转录体1(nuclera-enriched autosomaltranscript,NEAT1)在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)患儿血清中表达,以及下调Rb细胞Y79中NEAT1对细胞生物学功能的影响。方法以2015年3月~2021年3月鄂东医疗集团黄石市中心医院诊疗的83例Rb患儿为研究对象,同期,在儿童保健中心选取健康儿童50例(对照组),实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测血清中NEAT1表达,分析Rb患儿和对照组血清NEAT1表达差异,以及不同临床指标Rb患者血清中NEAT1表达差异。培养Y79细胞并分为si-NEAT1组(转染NEAT1的干扰序列)、si-NC组(转染对照序列)和Ctl组(仅加入转染试剂),分别使用qRT-PCR,MTT,流式细胞术和Transwell检测NEAT1表达、细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭情况。结果Rb患儿血清中NEAT1表达量(1.43±0.28)高于对照组(1.01±0.21),差异具有统计学意义(t=9.116,P<0.001);国际视网膜母细胞瘤分期(Intraocular International Retinoblastoma classificaton,IIRC)CDE期、低分化、视神经浸润和淋巴结转移的Rb患儿血清中NEAT1表达量明显高于AB期、中高分化、未发生视神经浸润和淋巴结转移的Rb患儿,差异具有统计学意义(t=2.190~3.693,均P<0.05);血清中NEAT1表达诊断Rb曲线下面积为0.882(95%CI:0.826~0.937),当NEAT1表达量取1.20时,灵敏度和特异度分别为80.00%和79.52%;相比于si-NC组(1.03±0.09)和Ctl组(1.02±0.15),si-NEAT1组细胞中NEAT1表达(0.35±0.06)明显降低,差异具有统计学意义(t=14.829,9.994,均P<0.001);si-NEAT1组24,48,72和96 h时吸光度(A值)明显低于si-NC组和Ctl组(tsi-NC=2.796~4.362,tCtl=2.641~5.555,均P<0.05),而细胞凋亡率相比于si-NC组和Ctl组明显升高,差异具有统计学意义(t=4.999,3.915,均P<0.05);与si-NC组和Ctl组比较,si-NEAT1组迁移细胞数(116.50±9.35 vs 132.00±7.32,134.00±7.95)和侵袭细胞数(96.33±8.94 vs 117.67±12.39,119.17±10.05)均降低,差异具有统计学意义(tsi-NC=3.196,3.421,tCtl=3.492,4.159,均P<0.05)。结论Rb患儿血清中NEAT1表达量升高,对Rb患儿具有一定的诊断价值,沉默Y79细胞中NEAT1表达可减少Rb细胞增殖、加速细胞凋亡,同时抑制细胞迁移和侵袭。

婴幼儿视网膜母细胞瘤生存率预测列线图模型的构建

目的:构建预测婴幼儿视网膜母细胞瘤(RB)生存率的列线图。方法:收集2004年至2019年SEER数据库中929例RB患儿(0~3岁)的临床资料作为训练集,采用Cox回归分析筛选出婴幼儿RB生存的影响因素,并基于回归结果构建预测RB患儿3、5和10 a生存率的列线图。收集2010年至2019年郑州大学第一附属医院诊断的RB患儿111例为外部验证集。利用C指数、ROC曲线、校准曲线和决策曲线分析(DCA)评估列线图模型的预测价值。结果:以因RB死亡为终点事件,Cox回归分析结果显示,肿瘤基底直径≥15 mm、T3期、T4期、M1期和放化疗联合治疗是生存预后的危险因素,HR(95%CI)分别为3.049(1.459~7.782)、6.341(1.811~12.372)、9.554(6.054~13.989)、5.087(1.602~16.155)、10.452(1.180~19.598)。在训练集和外部验证集中,列线图模型预测的C指数(95%CI)分别为0.948(0.923~0.973)、0.858(0.728~0.987);在训练集中,列线图模型3、5和10 a生存率预测的AUC(95%CI)分别为0.966(0.946~0.986)、0.960(0.930~0.990)、0.934(0.906~0.962),在外部验证集中分别为0.825(0.769~0.881)、0.843(0.781~0.905)、0.868(0.796~0.940);校准曲线与标准曲线重合度较高,同时DCA显示模型具有理想的临床收益。结论:构建的列线图可用于婴幼儿RB生存率的预测,为临床个性化诊疗提供参考。

lncRNA HIF1A-AS1对长春新碱耐药视网膜母细胞瘤细胞化疗敏感性的影响

目的:探讨长链非编码RNA-HIF1A-AS1(lncRNA HIF1A-AS1)调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达对长春新碱(VCR)耐药视网膜母细胞瘤(RB)细胞化疗敏感性的影响。方法:建立人RB VCR耐药细胞株SO-RB50/VCR,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测SO-RB50与SO-RB50/VCR细胞lncRNA HIF1A-AS1表达;在SO-RB50/VCR细胞中抑制lncRNA HIF1A-AS1表达或同时过表达HIF-1α,检测SO-RB50/VCR细胞对VCR的半数抑制浓度(IC_(50))及细胞增殖、凋亡情况;Western blot检测HIF-1α、多药耐药相关蛋白(MRP)、P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达。结果:与SO-RB50细胞相比,SO-RB50/VCR细胞中lncRNA HIF1A-AS1与HIF-1α蛋白表达水平升高(P<0.05);在SO-RB50/VCR细胞中抑制lncRNA HIF1A-AS1表达后,细胞凋亡率显著升高(P<0.05),细胞吸光度(OD_(450))值显著降低,VCR对细胞的IC_(50)值及HIF-1α、MRP、P-gp蛋白表达水平显著降低(P<0.05);过表达HIF-1α可减弱下调lncRNA HIF1A-AS1表达对SO-RB50/VCR细胞耐药性的抑制作用。结论:lncRNA HIF1A-AS1在SO-RB50/VCR细胞中高表达,抑制lncRNA HIF1A-AS1表达可通过下调HIF-1α表达,降低SO-RB50/VCR细胞对VCR的耐药性。

视网膜母细胞瘤铂类耐药机制及耐药治疗的研究进展

视网膜母细胞瘤是一种最常见于儿童的原发性眼内恶性肿瘤,其恶性程度高、病程进展快,预后差。近年来,铂类化疗药物被发现对晚期和转移性视网膜母细胞瘤具有显著的治疗效果。然而,随着临床研究的不断深入,铂类药物治疗晚期视网膜母细胞瘤的耐药问题逐渐浮出水面。本文旨在综述近年来铂类对视网膜母细胞瘤的耐药机制和耐药后治疗的研究进展。旨在为后续研究提供参考。

个体化预测视网膜母细胞瘤预后风险预警模型的建立与验证

目的建立个体化预测视网膜母细胞瘤预后的风险预警模型,同时对其预测效果进行验证。方法选取2018年1月至2020年1月郑州大学第一附属医院收治的视网膜母细胞瘤患者125例作为研究对象。根据患者预后情况将分为预后良好组(98例)及预后不良组(27例),利用Logistic多因素回归分析影响视网膜母细胞瘤患者预后的危险因素。绘制预测视网膜母细胞瘤患者发生不良预后的列线图模型。应用受试者工作曲线(ROC)对列线图模型预测效能进行检验,并利用Bootstrap法检验模型的准确性。另选取2020年1月至2021年1月郑州大学第一附属医院收治的24例视网膜母细胞瘤患者对模型预测效能进行验证。结果单因素分析结果显示:预后良好组和预后不良组肿瘤直径(χ2=4.808,P=0.028)、单/双眼发病(χ2=5.482,P=0.019)、肿瘤分期(χ2=6.302,P=0.042)、肿瘤残留(χ2=9.517,P=0.002)、脑转移(χ2=11.413,P=0.001)、糖类抗原153(CA153)水平(χ2=4.834,P<0.001)、糖类抗原199(CA199)水平(χ2=3.826,P<0.001)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平(χ2=5.530,P<0.001)比较差异均有统计学意义。多因素Logistic回归分析结果显示:肿瘤直径≥20 mm、双眼发病、具有脑转移、CA153水平、CA199水平及NSE水平均是影响视网膜母细胞瘤患者预后的危险因素(P=0.001,P=0.003,P=0.002,P<0.001,P<0.001,P<0.001)。根据Logistic多因素分析结果建立预测视网膜母细胞瘤患者预后的风险预警模型,Bootstrap法内部验证结果显示,C-index指数为0.837(95%CI:0.766~0.903)。曲线下面积、敏感性、特异性分别为0.812、0.845、0.648。选取2020年1月至2021年1月郑州大学第一附属医院收治的24例视网膜母细胞瘤患者对本研究所建立的风险预警模型预测效能进行验证,视网膜母细胞瘤患者预后风险预警模型预测发生预后不良5例,实际预后不良4例。曲线下面积、敏感性、特异性分别为0.847、0.805、0.703。结论肿瘤直径、双眼发病、脑转移、CA153水平、CA199水平及NSE水平是视网膜母细胞瘤预后不良的危险因素,基于以上因素构建的列线图风险模型对视网膜母细胞瘤患者的预后具有良好的预测效能。

LncRNA FAM83A-AS1通过miR-150/HMGA2轴对视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)序列相似家族83成员A-反义核糖核酸1(FAM83AAS1)在视网膜母细胞瘤(RB)细胞中的作用及其潜在的分子机制。方法体外培养RB细胞,将Vector、pcDNA-FAM83A-AS1、NC-siRNA、FAM83A-AS1-siRNA分别转染至细胞中(依次为pcDNA-FAm83A-AS1组、NC-siRNA组、FAm83A-AS1-siRNA组),检测RB细胞中FAM83A-AS1的表达、RB细胞增殖能力、凋亡率。生物信息学方法和双荧光素酶报告基因实验预测和验证FAM83A-AS1与miR-150以及miR-150与高迁移率族蛋白A2(HMGA2)的靶向关系。RT-qPCR检测RB细胞中miR-150、HMGA2 mRNA的表达;Western blot检测RB细胞中HMGA2蛋白的表达;MTT实验和流式细胞术检测转染后RB细胞增殖和凋亡能力。结果pcDNA-FAM83A-AS1组细胞中FAM83A-AS1的表达显著高于Vector组,低于NC-siRNA组(P<0.05)。pcDNA-FAM83A-AS1组较Vector组的细胞增殖能力显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。FAM83AAS1-siRNA组较NC-siRNA组的细胞增殖能力显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。miR-150 mimic可显著抑制RB细胞增殖能力,促进细胞凋亡。而pcDNA-HMGA2可显著逆转miR-150 mimic对RB细胞增殖和凋亡的作用。结论敲低lncRNA FAM83A-AS1通过调控miR-150/HMGA2轴抑制RB细胞增殖,促进细胞凋亡。

胎儿视网膜母细胞瘤超声表现

目的观察胎儿视网膜母细胞瘤(RB)超声表现。方法回顾性分析7胎接受产前超声检查的单胎单侧RB胎儿资料,观察眼内病变二维、三维超声和血流成像表现。结果7胎眼内RB病灶均形态不规则、边缘不光整;6胎呈实性偏高回声,1胎呈无回声;6胎可见钙化,其中5胎点状钙化伴声影、1胎未伴声影;6胎呈分支状血流,与视网膜动脉连续,收缩期最高血流速度15.78~19.68 cm/s,阻力指数0.82~1.01,1胎呈稀疏点状;三维断层超声成像(TUI)显示4胎偏高回声肿块位于眼眶内,其余3胎未获得满意TUI。结论胎儿RB主要超声表现为眼内实性肿块伴钙化斑及高速高阻血流。

771例儿童视网膜母细胞瘤发病的流行病学分析

目的分析我院儿科收治的视网膜母细胞瘤(RB)的发病特点及流行病学特征。方法回顾性分析2016年1月—2020年12月,在我院儿科病房接受诊治的771例RB患者的临床资料。结果其中男436人,女335人,起病中位年龄为20.0(0-153)个月。单侧眼发病542人,双眼发病222人,三侧性RB患者7人;中位发病年龄分别为24.0个月、10.5个月及6.0个月,三组患儿的平均发病年龄对比有统计学差异(P=0.000)。17.6%(136/771)患者存在延误诊治的情况;眼内期(703/771)、眼外期(55/771)及转移期(13/771)患儿延误的中位时间分别为5.0个月,7.0个月,12.0个月的诊治延误,差异有统计学意义(P=0.005)。随着地域经济水平的下降,患者诊治延误的比例及晚期患者比例有升高的趋势。结论RB患者5岁以下多见,单眼RB患者发病年龄高,延误诊治与晚期疾病相关。就诊患者围绕区域医疗中心放射分布,地域经济水平可能影响RB患者的就诊情况,进而影响预后。

快速自旋回波弥散加权成像在视网膜母细胞瘤患儿病灶活动性评估中的价值

目的:分析快速自旋回波弥散加权成像(fast spin-echo diffusion-weighted imaging,TSE-DWI)在评估单眼发病眼内期视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)患儿病灶活动性中的价值。方法:收集2014年5月—2018年7月于山东大学附属儿童医院临床诊治的180例单眼发病眼内期RB患儿及53例社区健康志愿者(对照组)的磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)资料及相关临床资料。所有患儿均行MRI常规序列、TSE-DWI及动态对比增强MRI(dynamic contrastenhanced MRI,DCE-MRI)检查,患儿分别于治疗前、后及稳定期各检查1次,对照组只进行1次扫描。对比患儿眼球内病灶活动期、稳定期及对照组表观弥散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)及信号强度增强率(signal strength enhancement ratio,△SI)的变化及两者在评估病灶是否具有活动性中的效能。结果:治疗前病灶TSE-DWI呈高信号,ADC图呈低信号,增强扫描呈不同程度强化;治疗后病灶体积缩小,DWI信号减低,ADC图信号增高,增强后不强化或轻度强化。病灶活动期、稳定期及对照组ADC与△SI差异均有统计学意义(P<0.001)。△SI=1.14%时,鉴别病灶是否具有活动性的灵敏度、特异度及准确度分别为75.91%、82.31%及87.56%,ADC=1.17×10^(-3)/mm^(2)时,鉴别病灶是否具有活动性的灵敏度、特异度及准确度分别为95.72%、87.23%及93.76%。两者鉴别病灶是否具有活动性的能效相似。结论:在评估病灶是否具有活动性方面,TSE-DWI与DCE-MRI价值相似,但TSE-DWI更具优势。

视网膜母细胞瘤结合锌指蛋白1调控肥胖和肿瘤信号通路研究综述

视网膜母细胞瘤结合锌指蛋白1(retinoblastoma-interacting zinc finger protein 1,RIZ1)基因,又称PRDM2(positive regulatory domain 2)基因,是PRDM基因家族一员,其蛋白序列包含1个PR结构域、1个核激素受体结合基序、8个锌指结构域和1个视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma protein,Rb)相互作用基序。RIZ1主要定位于细胞核内,在核内发挥转录抑制因子、基因调控、蛋白质-蛋白质相互作用等功能。RIZ1是代谢通路的重要参与者,其通过调控代谢相关基因影响基础代谢,抑制肥胖的形成;RIZ1功能突变或含量不足与多种肿瘤发生发展相关,其通过激活下游致癌基因或调控代谢参与肿瘤进程。RIZ1通过v-akt鼠科胸腺瘤病毒癌基因同源物Ⅲ(v-akt murine thymoma viral oncogene homolog 3,AKT3)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1),以及作为协同激活剂等方式分别调控AKT/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、IGF-1、雌激素这3条肿瘤和肥胖相关分子信号通路。3条分子通路功能有差异且其下游分子存在交叉,提示RIZ1在不同年龄、性别和器官中的作用可能不同。详细研究RIZ1与RIZ2在代谢进程中的调控作用有助于全面了解RIZ1参与肥胖和肿瘤形成的机制。未来基于RIZ1靶点进行诊断研究或功能恢复可能对代谢性疾病和肿瘤的诊断和治疗有重要意义。

视网膜母细胞瘤化疗耐药的研究进展

视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)是儿童最常见的眼内恶性肿瘤,化疗是目前治疗RB最常用的方法,包括静脉化疗、动脉化疗和玻璃体腔化疗。然而,RB的化疗耐药时有发生,是导致RB患者保眼治疗失败的主要原因。因此,探索RB化疗耐药的发生发展机制、寻找RB治疗新策略及药物联合治疗的新方法具有重要临床意义。本文综述了RB细胞可通过ATP结合盒式蛋白(ABC转运蛋白)、非编码RNA、表观遗传学修饰、自噬、上皮-间充质转化、细胞外基质改变等多种途径获得化疗耐药性,并对其潜在的治疗靶点或药物进行总结,以期为RB化疗耐药性的进一步研究提供参考。

过表达miR-515-5p的视网膜母细胞瘤细胞增殖、凋亡、侵袭能力变化及其机制

目的探讨过表达miR-515-5p对视网膜母细胞瘤细胞增殖、凋亡、侵袭能力的影响及其机制。方法利用StarBase数据库进行生物信息学分析并预测miR-515-5p的靶基因为CBX4,并经双荧光素酶报告基因实验验证。选择视网膜母细胞瘤细胞系SO-RB50、Y79、HXO-RB-44细胞中miR-515-5p表达降低最明显的SO-RB50细胞进行实验,分为miR-515-5p NC组、miR-515-5p mimics组、miR-515-5p mimics+CBX4组、miR-515-5p mimics+CBX4-NC组,分别转染miR-515-5p阴性对照、miR-515-5p mimics、miR-515-5p mimics+CBX4过表达载体、miR-515-5p mimics+CBX4空载体。采用实时荧光定量PCR法检测各组miR-515-5p及CBX4 mRNA表达,Western blotting法检测CBX4蛋白表达,CCK-8法检测转染12、24、48、72 h的细胞增殖能力(OD值),TUNEL法检测细胞凋亡率,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果miR-515-5p mimics组、miR-515-5p mimics+CBX4组、miR-515-5p mimics+CBX4-NC组miR-515-5p相对表达量均高于miR-515-5p NC组(P均<0.05)。miR-515-5p mimics组、miR-515-5p mimics+CBX4-NC组、miR-515-5p mimics+CBX4组CBX4 mRNA相对表达量及培养48、72 h的OD值均低于miR-515-5p NC组,且miR-515-5p mimics组、miR-515-5p mimics+CBX4-NC组降低更明显(P均<0.05)。培养12 h,各组细胞OD值比较P>0.05。培养24 h,miR-515-5p mimics组、miR-515-5p mimics+CBX4-NC组OD值均低于miR-515-5p NC组(P均<0.05)。与miR-515-5p NC组、miR-515-5p mimics+CBX4组比较,miR-515-5p mimics组、miR-515-5p mimics+CBX4-NC组细胞凋亡率均升高,CBX4蛋白相对表达量及侵袭细胞数均降低(P均<0.05)。结论过表达miR-515-5p能够抑制视网膜母细胞瘤细胞SO-RB50的增殖、侵袭能力并促进其凋亡,其机制可能与抑制CBX4表达有关。

视网膜母细胞瘤基因表达谱的生物信息学分析

目的:通过生物信息学方法探寻促进视网膜母细胞瘤发生的关键基因与分子标记。方法:检索Gene Expression Omnibus(GEO)数据库中的视网膜母细胞瘤表达谱芯片对肿瘤组织与正常视网膜组织的差异基因进行GO与KEGG聚类分析,构建蛋白-蛋白相互作用网络并筛选关键节点,利用受试者工作曲线(ROC)评估临床诊断效能。应用qRT-PCR在正常RPE细胞系与视网膜母细胞瘤细胞系中验证枢纽基因的RNA表达情况结果:在视网膜母细胞瘤数据集GSE97508与GSE110811中获得二者差异表达基因的交集共121个,KEGG分析显示差异基因富集于光传导通路、细胞周期与p53通路上,PPI网络筛选并与上述两个数据集中差异最大的30个基因取交集得到MCM6、DTL、UBE2T、TOP2A、NUSAP1、CENPK、RRM2、RLBP1、RHO共9个关键基因。在独立验证数据集GSE24673中确认以上9个基因的表达差异。利用ROC曲线发现UBE2T、RRM2与RHO的AUC≥80%且具有统计学意义(P>0.05)。在视网膜母细胞瘤细胞系中确认UBE2T与RRM2的mRNA水平均显著高于对照ARPE-19细胞系,而RHO的mRNA水平显著低于对照ARPE-19细胞系。结论:本研究筛选发现UBE2T、RRM2与RHO是视网膜母细胞瘤发生的关键基因,可能成为视网膜母细胞瘤的潜在治疗靶点。

视网膜母细胞瘤中枢神经系统转移的诊疗现状

视网膜母细胞瘤(RB)是儿童最常见的眼内恶性肿瘤,占儿童恶性肿瘤的4%左右。RB1基因突变是最早被发现与RB发生有关的肿瘤抑制基因,常表现为点突变及RB1部分缺失。随着认识的深入以及诊治方法的改善,远处转移期尤其是中枢神经系统(CNS)转移的RB就诊率逐年增高。目前,CNS转移性RB主要通过对临床表现、影像学特征、脑脊液(CSF)细胞学检查、组织病理学检查、基因检测等综合分析而最终诊断,其治疗是目前的难点。虽然近年来针对性地应用了全身静脉化疗、腰穿鞘注化疗、全脑全脊髓放射疗法等手段,结合针对原发病灶的手术及局部治疗手段等进行综合治疗,患儿生存率未见明显提高。因此,全面认识目前CNS转移性RB的诊断、综合治疗及国内外研究进展,对于研究RB发生CNS转移的原因及机制、预后影响因素及发掘更加有效的治疗手段等工作十分必要。

超声影像学在视网膜母细胞瘤诊断中的研究进展

视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)是儿童阶段发生最为常见的一类眼内恶性肿瘤,占全部儿童恶性肿瘤的3%。RB约67%在2岁之前被诊断,95%在5岁之前被诊断。超声影像学是一种普及、便利、可靠的影像学技术,能了解屈光介质混浊的眼内形态,在RB普遍筛查、鉴别诊断及治疗中有重要价值;特别是新兴的超声分子影像学技术为RB的诊疗带来了新的前景和希望。本文将对超声影像学在RB诊断中研究进展进行综述。

LncRNA LUCAT1靶向miR-502-5p对人视网膜母细胞瘤细胞生物学行为的影响

目的研究长链非编码RNA(LncRNA)肺癌相关转录产物1(LUCAT1)靶向微小RNA(miR)-502-5p对人视网膜母细胞瘤(RB)细胞增生、迁移和侵袭的影响。方法收集2019年5月至2021年1月在河南省立眼科医院确诊并行眼球摘除术的27例RB患者的RB组织样本,正常视网膜组织标本(12例眼球破裂伤、7例眼球萎缩、8例眼球穿通伤合并有色素膜嵌顿)取自同期在河南省立眼科医院行眼球摘除术的27例患者。采用实时荧光定量PCR检测LncRNA LUCAT1和miR-502-5p在RB组织、细胞系(Y-79、WERI-Rb-1、HXO-RB44)及人视网膜上皮细胞(ARPE-19)中的表达。将RB细胞Y-79分为对照组、小干扰RNA(si)-LncRNA LUCAT1组、si-对照(con)组、pcDNA组、pcDNA-LncRNA LUCAT1组、miR-con组、miR-502-5p组、si-LncRNA LUCAT1+anti-miR-con组和si-LncRNA LUCAT1+anti-miR-502-5p组,分别转染相应试剂。采用Western blot法检测MMP2和MMP9蛋白表达;采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增生活力;采用克隆形成实验检测细胞增生能力;采用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。采用双荧光素酶报告实验和实时荧光定量PCR验证LncRNA LUCAT1对miR-502-5p的靶向调控作用。结果RB组织中LncRNA LUCAT1表达量为2.73±0.34,明显高于正常视网膜组织的1.00±0.15;miR-502-5p表达量为0.42±0.06,明显低于正常视网膜组织的1.00±0.13,差异均有统计学意义(t=24.190、21.049,均P<0.001)。人RB细胞系Y-79、WERI-Rb-1和HXO-RB44中LncRNA LUCAT1表达水平明显高于ARPE-19细胞,miR-502-5p表达水平明显低于ARPE-19细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05)。si-LncRNA LUCAT1组LncRNA LUCAT1表达量,MMP2、MMP9蛋白相对表达量,吸光度(A)值,细胞增生、迁移、侵袭数量较对照组均明显减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-502-5p组miR-502-5p表达量高于miR-con组,MMP2、MMP9蛋白相对表达量,细胞活力A值,细胞增生、迁移、侵袭数量少于miR-con组,差异均有统计学意义(t=20.274、14.884、14.181、12.692、17.749、20.889、21.913,均P<0.001)。si-LncRNA LUCAT1+anti-miR-502-5p组miR-502-5p表达量低于si-LncRNA LUCAT1+anti-miR-con组,MMP2、MMP9蛋白相对表达量,细胞活力A值,细胞增生、迁移、侵袭数量高于si-LncRNA LUCAT1+anti-miR-con组,差异均有统计学意义(t=14.097、15.839、15.757、11.860、16.235、16.565、16.487,均P<0.001)。与LncRNA LUCAT1-野生型共转染时,miR-502-5p组相对荧光素酶活性值低于miR-con组,差异有统计学意义(t=16.379,P<0.001)。pcDNA-LncRNA LUCAT1组LncRNA LUCAT1表达量高于pcDNA组,miR-502-5p表达量低于pcDNA组,si-LncRNA LUCAT1组LncRNA LUCAT1表达量低于si-con组,miR-502-5p表达量高于si-con组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论抑制LncRNA LUCAT1表达通过靶向上调miR-502-5p可减弱人RB细胞的增生、迁移和侵袭能力。

视网膜母细胞瘤患者玻璃体切除术后复发眼的组织病理学研究

目的 探讨视网膜母细胞瘤(RB)患者经玻璃体切除术治疗后复发眼的组织病理学特征及其发生的高危因素。方法 回顾性分析行组织病理学检查的58例(58只眼)RB患者的组织病理学检测报告。所有患者全部为玻璃体切除术后肿瘤复发施行眼球摘除术,病变区域的切片由具有较丰富经验的病理医师进行查阅并写组织病理学检测报告。探讨全部患者复发眼的组织病理学特征及高危因素(肿瘤侵犯眼前节、肿瘤穿过巩膜壁到眼球外生长、肿瘤侵犯视神经、肿瘤侵犯巩膜、肿瘤侵犯大区域脉络膜)。结果 58例(58只眼)RB患者按肿瘤侵犯区域分类,其中32只眼(55.17%)肿瘤侵犯睫状体、24只眼(41.38%)肿瘤侵犯虹膜、14只眼(24.14%)肿瘤侵犯脉络膜、12只眼(20.69%)肿瘤侵犯视盘。58只眼中有56只眼(96.55%)存有组织病理学高危因素,其中15只眼存有单项组织病理学高危因素,占比26.79%(15/56);41只眼存在多项组织病理学高危因素,占比73.21%(41/56)。病理学高危因素中肿瘤侵犯眼前节占比(67.86%)最高,其次为侵犯脉络膜(42.86%)、侵犯视神经(26.79%)、侵犯巩膜(12.50%)、巩膜外浸润(7.14%)。结论 RB患者经玻璃体切除术后复发眼的肿瘤组织极易入侵眼前节区域,主要侵犯部位为睫状体,且多数复发眼存有组织病理学高危因素,临床应严格掌控手术适应证,并按患者自身情况合理选用玻璃体切除术进行治疗。