高迁移率族蛋白B-1和NADPH氧化酶衍生活性氧对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜电图波幅和玻璃体通透性的影响

目的:探究高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶衍生活性氧(ROS)对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠视网膜电图波幅和玻璃体通透性的影响及机制。方法:选取40只雄性SD大鼠,根据实验目的将大鼠分为对照组、DR模型组、HMGB1注射组和ROS抑制剂组。使用链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病,进而发展DR模型。通过2’-7’-二氯荧光素-二乙酸酯(DCFH-DA)检测大鼠视网膜组织匀浆中ROS的生成。通过蛋白印迹分析视网膜组织中Nox2、HMGB1、Occludin和ZO-1的蛋白表达。通过PCR分析大鼠视网膜组织匀浆中PARP-1和Caspase 3的mRNA表达。通过视网膜电图分析大鼠a波和b波振幅。通过测量FITC-BSA荧光评估大鼠玻璃体通透性。结果:DR模型组和HMGB1注射组较对照组大鼠视网膜ROS水平升高(均P<0.05),ROS抑制剂组较DR模型组和HMGB1注射组ROS水平降低(均P<0.05)。DR模型组和HMGB1注射组较对照组Nox2和HMGB1的蛋白表达升高(均P<0.05),ROS抑制剂组较HMGB1注射组和DR模型组Nox2和HMGB1的蛋白表达降低(均P<0.05)。HMGB1注射组和DR模型组较对照组大鼠视网膜PARP-1和Caspase 3的mRNA表达升高(均P<0.05)。HMGB1注射组和DR模型组较对照组a波和b波振幅减少(均P<0.05),ROS抑制剂组较HMGB1注射组和DR模型组振幅升高(均P<0.05)。HMGB1注射组和DR模型组较对照组Occludin和ZO-1的蛋白表达降低(均P<0.05),ROS抑制剂组较HMGB1注射组和DR模型组Occludin和ZO-1的蛋白表达升高(均P<0.05)。DR模型组和HMGB1注射组较对照组荧光强度升高(P<0.05),ROS抑制剂组较DR模型组和HMGB1注射组荧光强度降低(P<0.05)。结论:糖尿病视网膜组织中HMGB1和Nox衍生的ROS之间存在正反馈,这可能是促进糖尿病诱导的视网膜电图波幅降低和玻璃体通透性增加的机制。

内毒素通过干预大鼠玻璃体中晶状体蛋白家族蛋白表达影响视网膜电图波幅和玻璃体通透性机制研究

目的:探讨内毒素通过干预大鼠玻璃体中晶状体蛋白家族蛋白表达影响视网膜电图波幅和玻璃体通透性的机制。方法:将糖尿病视网膜病变大鼠(n=36)随机平分为三组:模型组、内毒素A组、内毒素B组,每组12只。内毒素A组、内毒素B组麻醉扩瞳后分别给予玻璃体腔注射30 ng/ml或60 ng/ml内毒素1μl,模型组注射同等体积的0.9%氯化钠溶液,1次/周,持续4周。结果:内毒素A组、内毒素B组处理第1、2、4周体重低于模型组(均P<0.05),且内毒素B组低于内毒素A组(P<0.05)。内毒素A组、内毒素B组处理第1、2、4周的血糖高于模型组(均P<0.05),且内毒素B组高于内毒素A组(P<0.05)。内毒素A组、内毒素B组处理第1、2、4周的视网膜电图a波、b波波幅低于模型组(均P<0.05),且内毒素B组低于内毒素A组(P<0.05)。内毒素A组、内毒素B组处理第4周的视网膜周细胞计数低于模型组(均P<0.05),内皮细胞计数高于模型组(均P<0.05),且内毒素A组与内毒素B组对比差异有统计学意义(P<0.05)。内毒素A组、内毒素B组处理第4周的眼球组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)与血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)相对表达水平高于模型组(均P<0.05),且内毒素B组高于内毒素A组(P<0.05)。结论:内毒素可上调糖尿病视网膜病变大鼠的玻璃体中晶状体蛋白家族蛋白VEGF与VEGFR2表达水平,影响玻璃体的通透性,降低视网膜电图波幅,可导致糖尿病视网膜病变大鼠体重降低,促使血糖持续升高。