川芎嗪对兔眼高压下视网膜神经节细胞和双极细胞损伤的保护作用

目的 观察川芎嗪对慢性眼高压下视网膜神经细胞损伤的保护作用 .方法 用 2 0 g· L- 1 甲基纤维素前房注射法建立兔慢性眼高压模型 .4组分别给予生理盐水、川芎嗪注射液 10 mg· kg- 1 ,2 .5 g· L- 1 噻吗心安眼液和联合应用川芎嗪与噻吗心安 ,连续用药 4wk.于 2 8d取眼球作光镜、电镜检查和光镜下细胞计数 .结果 生理盐水组模型眼节细胞数为 (7.83± 1.34 )个 /10格 ,双极细胞数为 (10 .6 6± 1.6 3)个 /格 ;川芎嗪组模型眼节细胞数为 (9.5 0± 3.87)个 /10格 ,双极细胞数为 (12 .5 0± 2 .73)个 /格 ;生理盐水组模型眼和川芎嗪组模型眼节细胞 (P<0 .0 5 )与双极细胞 (P<0 .0 5 )比较 ,有显著性差异 .生理盐水组模型眼节细胞变性、坏死 ,锥、杆细胞外节紊乱 ,色素上皮不完整 ,川芎嗪组变化比生理盐水组轻 ,联合用药组变化最小 .结论 川芎嗪对慢性眼高压下视网膜神经节细胞和双极细胞具有保护作用 .

微波致人视网膜色素上皮细胞损伤及牛磺酸的防护效应

目的 探讨牛磺酸 (Taurine,Tau)对微波致人色素上皮细胞脂质过氧化损伤的防护作用 .方法 体外培养人视网膜色素上皮细胞 ,设立对照组、微波辐照组 (10 m W· cm- 2 ,2 0 m W· cm- 2 ,30 m W· cm- 2 ,辐照时间为 1h)及 Tau防护组 (加入不同浓度 Tau:5 mmol· L- 1 ,10 mm ol· L- 1 ,2 0mmol· L- 1选择 30 m W/ cm2微波辐照 ) ,共 7组细胞 ,每组为5个平行样品 ,测定每组细胞内超氧化物歧化酶 (SOD)的活性 ,丙二醛 (MDA)的含量 .结果 微波损伤组 SOD的活性下降 ,MDA的含量增加 ;与辐照组比 ,加入 Tau后细胞内 MDA含量减少 ,SOD活性增高 ,且与 Tau浓度相关 .结论

葛根素、大黄素对糖基化产物引起的牛视网膜微血管周细胞损伤的影响

应用MTT比色测定细胞活性的方法 ,观察药物对AGE形成的影响以及药物对AGE引起的牛视网膜微血管周细胞损伤的影响。结果葛根素及大黄素与BSA共孵后形成的糖基化产物对周细胞的损伤较不给药组有不同程度的减轻作用 ,终浓度为10mM效应最大 ,提示药物可能在孵育时抑制了AGE的形成 ;细胞培养基中直接加入葛根素 (1,10mM )能对AGE引起的周细胞损伤起一定的保护作用。

锌对微波致猪视网膜神经节细胞损伤的防护作用

目的 探讨微波对体外培养的猪视网膜神经节细胞的脂质过氧化损伤作用及耐受剂量 ,为进一步研究微波的眼底损伤机制及其防护提供一定的实验依据 .方法 体外培养猪视网膜神经节细胞 ,按微波辐照强度分为对照组 ,30 m W·cm- 2组 ,6 0 m W· cm- 2组及各辐照剂量加锌组 ,微波理疗机于微波屏蔽室内辐照 1h,辐照后立即于光镜及电镜观察细胞形态变化 ,测定超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA)活性 .结果 微波辐照后 ,细胞有聚集现象 ,部分细胞轴突消失 ,电镜可见线粒体及内质网肿胀 ,细胞 MDA活性明显增高 ,SOD降低 ,加锌各组光镜下细胞形态变化不明显 ,电镜显示线粒体轻度肿胀 ,嵴完整 ,MDA活性有所恢复 ,SOD活性增高 .结论 微波可引起视网膜神经节细胞脂质过氧化损伤 ,锌可提高细胞的抗氧化能力 。

微波对体外培养视网膜神经细胞损伤的光镜与电镜观察

为了探讨 2 45 0MHz微波对眼底的损伤 ,采用体外培养视网膜神经细胞 ,按微波强度分为 3组进行微波辐照 1h ,进行光镜和透射电镜观察。结果表明 ,30mW /cm2 微波辐照可使视网膜神经细胞发生凋亡 ,6 0mW /cm2 微波辐照可导致细胞坏死。可见 ,微波可损伤体外培养的视网膜神经细胞 ,诱发细胞凋亡 ,随着微波辐照强度的增大 ,损伤程度加重。

视网膜神经节细胞的损伤机制

视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的进行性死亡是许多视网膜和视神经疾病发展到最后的必经之路.

周围神经或其组织成分移植修复成年哺乳动物视网膜节细胞的损伤

本综述重点阐述了移植周围神经或其组织成分雪旺细胞、成纤维细胞和神经营养因子 ,改善成年哺乳动物中枢神经系统抑制神经再生的微环境、增强受损神经元的内在再生潜力 ,以促进节细胞损伤后的存活和轴突再生。

青光眼视网膜神经节细胞损伤的研究进展

青光眼是严重损害视力的常见眼病，其病理基础是视网膜神经节细胞及其纤维的丧失。关于青光眼视网膜神经节细胞损伤的机制，迄今未明。以往曾有“机械学说”和“血流学说”等。近年来，随着分子生物学的发展，对青光眼视网膜神经节细胞损伤机制的研究进一步深入。综述了青光眼视网膜神经节细胞超微结构、轴浆运输以及凋亡等几个方面的研究进展。

青光眼视网膜神经节细胞损伤及其保护

青光眼是一种主要的致盲眼病 ,导致视功能损害的病理基础是视网膜神经节细胞进行性死亡和视神经纤维丧失 ,视网膜神经节细胞损伤的机理是复杂的 ,到目前为止还不完全明了 。

热休克蛋白72对大鼠急性高眼压性视网膜神经节细胞损伤的保护作用

目的探讨热休克蛋白72(heat shock protein,HSP 72)对大鼠急性高眼压性视网膜神经节细胞(RGCs)损伤的保护作用。方法右眼前房内灌注平衡盐溶液制作大鼠急性高眼压性 RGC 损伤模型;用热休克反应或腹腔内注射硫酸锌诱导模型大鼠 RGCs 中 HSP 72表达,观察 HSP72表达以后,模型大鼠 RGC 密度的改变情况,并与未处理的模型大鼠 RGC 密度相比较。结果正常大鼠 RGC 密度为2 504±181个/mm^2;急性高眼压模型大鼠 RGC 密度为2 015±111个/mm^2。热休克反应组和硫酸锌注射组 RGC 密度分别为2207±200个/nm^2和2262±155个/mm^2,显著高于模型组(P_(热体克)=0.036,P_(硫酸锌)=0.019);HSP 72阴性对照组与模型组 RGC密度差异无显著意义(P_(槲皮黄酮+热休克)=0.260,P_(槲皮黄酮+硫酸锌)=0.748)。结论热休克反应和腹腔内硫酸锌注射在急性高眼压模型大鼠 RGCs 中诱导产生的 HSP 72;可能对急性高眼压性 RGC 损伤具有保护作用。

奎宁酸衍生物KZ-41通过IGF-1受体依赖机制缓解视网膜内皮细胞高糖性损伤的机制研究

目的:探究奎宁酸衍生物KZ-41通过IGF-1受体依赖机制缓解视网膜内皮细胞高糖性损伤的机制。方法:采用M131培养基对原代人视网膜微血管内皮细胞(REC)进行常规培养,取第6代REC随机分为对照组(n=20)、高葡萄糖组(n=20)、KZ-41处理组(n=20),并分别在5 mmol/L葡萄糖培养基、25 mmol/L葡萄糖培养基、25 mmol/L葡萄糖+10μmol/L KZ-41培养基中培养3 d。通过蛋白印迹分析各细胞系中TNF-α、caspase-3表达及细胞裂解物中磷酸化(Ser473)Akt和(Tyr458)p85调节亚基的蛋白表达;酶联免疫吸附实验检测细胞系中IRS-1、ERK的水平;逆转录-聚合酶链反应检测VEGF、IL-6、MMP9 mRNA表达情况。结果:高葡萄糖组TNF-α、caspase-3蛋白表达较对照组升高(P<0.05),KZ-41处理组TNF-α、caspase-3蛋白表达较高葡萄糖组降低(P<0.05);高葡萄糖组Ser473、Tyr458表达较对照组降低(P<0.05),KZ-41处理组Ser473、Tyr458表达较高葡萄糖组升高(P<0.05);高葡萄糖组IRS-1水平较对照组降低(P<0.05),KZ-41处理组IRS-1水平较高葡萄糖组升高(P<0.05);高葡萄糖组ERK水平较对照组升高(P<0.05),KZ-41处理组ERK水平较高葡萄糖组降低(P<0.05);高葡萄糖组VEGF、IL-6、MMP9 mRNA表达较对照组升高(P<0.05),KZ-41处理组VEGF、IL-6、MMP9 mRNA表达较高葡萄糖组降低(P<0.05)。结论:奎宁酸衍生物KZ-41可逆转REC中高葡萄糖诱导的胱天蛋白酶-3和TNF-α的激活,缓解视网膜内皮细胞高糖性损伤。

当归多糖调控miR-148a-3p对高糖诱导视网膜神经节细胞损伤的影响

探讨当归多糖调控 miR-148a-3p 对高糖诱导视网膜神经节细胞损伤的影响。 方法:将高糖诱导视网膜神经节细胞(RGCs)分为 9 组,均进行 CCK-8 实验和流式细胞术检验 RGCs 增殖抑制率和凋亡率,测定 RGCs 内 SOD、MDA,用 RT-qPCR 检测 miR-148a-3p 表达。 结果:HG+当归多糖+miR-148a-3p In￣hibitor 组中 RGCs 增殖抑制率和凋亡率均低于其他组(P<0.05);HG+当归多糖+miR-148a-3p Inhibitor 组中RGCs 内 SOD 含量最高,MDA 最低(P<0.05);HG+当归多糖+miR-148a-3p Inhibitor 组中 miR-148a-3p 表达低于其他组(P<0.05)。 结论:当归多糖可上调 miR-148a-3p,促进 RGCs 增殖,抑制凋亡,减轻对高糖诱导RGCs 的损伤。

白藜芦醇通过Nrf2/HO-1通路对高糖诱导的视网膜神经节细胞损伤的保护作用机制

目的 探讨白藜芦醇通过Nrf2/HO-1通路对高糖诱导的视网膜神经节细胞损伤的影响。方法将野生型C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组、高糖组和RES组,每组20只。Nrf2敲除的C57BL/6小鼠为RES+Nrf2敲除组,20只。建立糖尿病视网膜病变小鼠模型,HE染色观察RES对视网膜组织的影响;流式细胞仪检测视网膜神经节细胞凋亡率;ELISA法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量;Western blot检测Nrf2和Ho-1蛋白表达。结果 与高糖组相比,RES组可以减轻高糖诱导引起的损伤;而RES+Nrf2敲除组较RES组相比,视网膜神经节细胞层(GCL)、内核层(INL)有所减少,外核层(ONL)厚度有所降低。RES组视网膜厚度显著高于高糖组(P<0.05),RES+Nrf2敲除组视网膜厚度相对低于RES组(P<0.05)。RES组中的神经节数量明显高于高糖组(P<0.05),RES+Nrf2敲除组中的神经节数量显著低于RES组(P<0.05)。RES组中的凋亡率明显低于高糖组(P<0.05),RES+Nrf2敲除组中的凋亡率显著高于RES组(P<0.05)。高糖组中的Bax和Cleaved Caspase3蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),RES组中的Bax和Cleaved Caspase3蛋白表达明显低于高糖组(P<0.05),RES+Nrf2敲除组中的Bax和Cleaved Caspase3蛋白表达显著高于RES组(P<0.05);而高糖组中的Bcl2蛋白表达明显低于对照组(P<0.05),RES组中的Bcl2蛋白表达明显高于高糖组(P<0.05),RES+Nrf2敲除组中的Bcl2蛋白表达显著低于RES组(P<0.05)。RES组中的SOD水平明显高于高糖组(P<0.05),RES+Nrf2敲除组中的SOD水平显著低于RES组(P<0.05);而RES组中的MDA和8-OHdG水平明显低于高糖组(P<0.05),RES+Nrf2敲除组中的MDA和8-OHdG水平显著高于RES组(P<0.05)。此外,RES组中Nrf2和Ho-1的蛋白表达明显高于高糖组(P<0.01),RES+Nrf2敲除组Nrf2和Ho-1的蛋白表达显著低于RES组(P<0.05)。结论 白藜芦醇对糖尿病性视网膜病变小鼠视网膜和神经节细胞具有一定的保护作用,白藜芦醇通过激活Nrf2和Ho-1抑制氧化应激,从而抑制神经节细胞的凋亡,保护糖尿病性视网膜病变视网膜的完整性。

谷氨酸在大鼠冲击伤复合缺氧后视网膜神经节细胞损伤中的作用

目的研究谷氨酸在大鼠冲击伤复合缺氧后视网膜神经节细胞(RGCs)损伤中的作用及机制。方法健康Wistar大鼠56只,分为正常对照组(NG,6只)、单纯冲击伤组(BG,24只)、冲击伤复合缺氧组(HG,24只)。致伤组动物用BST-Ⅰ型生物激波管致冲击伤。HG组致伤后置于体积分数为12.5%低氧舱内6h。于伤后1,3,5,7d处死大鼠取视网膜采用氮基酸分析仪测定其谷氨酸浓度,用免疫组化方法检测Caspase-3P20表达,TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)染色观察凋亡情况。结果伤前视网膜谷氨酸浓度为(0.245±0.008)μg/mg,伤后1d谷氨酸浓度即明显升高(P<0.01),以后逐渐回落,但仍明显高于正常(P<0.01)。正常视网膜内未见Caspase-3P20表达和TUNEL染色阳性细胞,伤后3d开始出现,5d明显增多(P<0.01),7d仍维持于高水平,且阳性细胞主要为RGCs,内核层偶见。所检测三个指标变化呈显著性相关。结论冲击伤复合缺氧明显加重了视网膜的损伤,谷氨酸兴奋毒性介导的RGCs凋亡可能是冲击伤复合缺氧后视网膜损伤的重要机制之一。

高糖诱导视网膜神经节细胞损伤中当归多糖调控miR-148a-3p的影响作用探究

探讨高糖诱导视网膜神经节细胞损伤中当归多糖调控miR-148a-3p的影响作用。方法:将高糖诱导视网膜神经节细胞(RGCs)分为6组,分别为正常糖(NG)组、高糖(HG)组、当归多糖低剂量组、当归多糖中剂量组、当归多糖高剂量组、当归多糖+miR-148a-3p Inhibitor组,对比各组的RGCs增殖率和凋亡率,RGCs内SOD、MDA及LDH含量,miR-148a-3p表达。结果:除对照组外,当归多糖+miR-148a-3p Inhibitor组的RGCs增殖率高于其他组,RGCs凋亡率低于其他组(P<0.05);当归多糖+miR-148a-3p Inhibitor组的RGCs内SOD活性高于其他组,MDA及LDH含量低于其他组(P<0.05);当归多糖+miR-148a-3p Inhibitor组的RGCs中miR-148a-3p表达高于其他组(P<0.05)。结论:高糖诱导RGCs中当归多糖可上调miR-148a-3p,提高对RGCs的抗氧化保护作用,为临床治疗提供了新思路。

金丝桃苷对高糖诱导视网膜周细胞损伤的保护作用

目的 探讨金丝桃苷对高糖诱导视网膜周细胞(RPCs)损伤的保护作用,并对其可能机制做出初步探索。方法 将RPCs正常培养传代后接种至细胞培养板,按不同处理分为5组:正常葡萄糖(NG)组(葡萄糖5 mmol/L)、高糖(HG)组(葡萄糖20 mmol/L)、甘露醇(MT)组(葡萄糖5 mmol/L、渗透压20 mmol/L)、高糖+低浓度金丝桃苷(HG+L-HY)组(葡萄糖20 mmol/L、金丝桃苷100μg/mL)、高糖+高浓度金丝桃苷(HG+H-HY)组(葡萄糖20 mmol/L、金丝桃苷400μg/mL)。培育相应时间后,CCK-8法检测各组RPCs活性,Annexin V/PI及TUNEL法检测RPCs凋亡率,Real-time PCR及Western Blot法检测RPCs中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)、Gasdermin-D蛋白-N(GSDMD-N)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-18(IL-18)mRNA及蛋白表达水平。结果 与NG组比较,HG组RPCs活性降低,凋亡率升高(P<0.01),NLRP3、caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18 mRNA及蛋白表达升高(P<0.01)。与HG组比较,HG+L-HY及HG+H-HY组RPCs活性升高,凋亡率降低(P<0.01),NLRP3、caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。与HG+L-HY组比较,HG+H-HY组RPCs活性增高,凋亡率降低(P<0.01),NLRP3、caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18 mRNA及蛋白表达降低(P<0.01)。结论 金丝桃苷可减轻高糖诱导的RPCs损伤,且该作用随金丝桃苷浓度提高而增强,其机制可能与抑制RPCs焦亡有关。