人体组织微缩接触印迹技术用于视网膜细胞移植

目的：表明微缩接触印迹技术，一种现代的物质装配技术，可以在移植中被用于处理人体组织的表面，并显示抑制分子可被用于影响视网膜色素上皮细胞或虹膜色素上皮细胞在人晶状体囊膜上的生长。

兔视网膜色素上皮细胞移植的实验研究

目的 用改良的二步酶法制备视网膜色素上皮 (RPE)细胞悬液 ,不做玻璃体切割 ,直接进行视网膜下间隙的移植。方法 用酶Ⅰ (含 2 2 0kU/L透明质酸酶和 0 .1 %胰蛋白酶 )分离视网膜神经上皮层与RPE之间的联系 ,再用酶Ⅱ (含 0 .2 5 %胰蛋白酶 )将RPE从玻璃膜上分离下来获取悬浮的RPE细胞 ,用特制的移植针头通过人为造成的局限性视网膜脱离区将其移植入受体视网膜下间隙。结果 术后 2周供体RPE细胞呈单层排列于受体视网膜下间隙并存活 ,未见明显炎症反应。电镜观察术后 7周供体RPE细胞位于受体Bruch膜上并与受体感光细胞外节盘膜形成镶嵌关系。结论 改良的内路法可以将供体RPE细胞成功移植在受体眼视网膜下间隙 ,并至少存活

视网膜色素上皮细胞移植术后免疫排斥的相关问题探讨

视网膜色素上皮细胞(RPE)移植在动物实验中已取得大量成功,并正逐步向临床应用方面过渡,但移植后相关免疫排斥以及细胞凋亡所致一系列问题不容忽视,免疫排斥反应已成为RPE移植成功的最大障碍,且主要是慢性排斥反应。近年在该方面进行的研究已逐步深入,大量研究为防治移植后免疫排斥问题提供了可靠的实验室依据和应用前景,以期在不远的将来RPE移植能够成功地应用于人类RPE相关疾患的治疗。

低氧诱导趋化因子受体表达对视网膜前体细胞迁移能力的影响

背景体外研究表明，趋化性细胞因子受体4（CXCR4）及其配体基质细胞衍生因子-1（SDF．1）在诱导视网膜前体细胞（RPCs）定向迁移的过程中可能起重要作用。RPCs表达CXCR4升高能增强干细胞的趋化活性，从而提高移植细胞的定向迁移能力。目的探讨RPCs在低氧条件下CXCR4受体的表达。方法分离孕龄17d的NIH小鼠的胚胎视网膜细胞并制备成含5×10^6～10×10^6个／L细胞的悬液，将细胞接种到25cm2培养瓶中，用全神经球贴壁培养法进行培养。RPCs在正常O2（体积分数16％O2）和低O2（体积分数10％O2）环境中培养12h和24h后，用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测CXCR4和缺氧诱导因子-1（HIF-1）mRNA的表达；流式细胞仪（FACS）检测RPCs中CXCR4阳性细胞的百分比；Boyden小室实验观察30μg／L的SDF-1对RPCs的趋化效应。结果10％O2培养12h和24h后，RPCs中CXCR4mRNA的表达量（CXCR4mRNA／B—actinmRNA）分别为0．28±0．07和0．48±0．17，比正常氧培养组的0．16±0．02升高了1．75倍和3．00倍，10％O2培养12h和24h后RPCs中HIF-1mRNA表达量（HIF—1mRNA／B—actinmRNA）分别为0．18±0．07和0．38±0．13，比正常氧培养组的0．06±0．01升高了3．00倍和6．30倍，差异有统计学意义（P〈0．01）。Boyden小室实验表明，10％O2培养12h和24h后SDF-1对RPCs的趋化效应由正常氧的13．00％分别上升到36．00％和46．00％。FACS检测表明，10％O2诱导12h和24h后，RPCs中CXCR4阳性细胞率由正常氧浓度的9．01％分别上升到26．90％和46．10％，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论RPCs在低氧条件下CXCR4受体表达增加，同时对SDF-1的趋化能力增强。HIF-1的表达增加是CXCR4表达增高的可能机制。

原发性视网膜色素变性的视网膜移植及基因治疗

视网膜移植是指将同种异体的感光细胞或视网膜色素上皮细胞移植于受体视网膜下腔；大量研究证明移植物可对受体视网膜细胞起到营养作用并增加其数量，同时视网膜色素变性致病基因的认识逐渐清楚明确，可通过补充外源性基因或清除异常基因等方法，在基因水平上治疗视网膜色素变性。

世界首例!日本男子接受了来自他人的干细胞移植

近日，一名日本男子接受了一次开创性的视网膜细胞移植一这是世界首例从捐赠者而不是本人身上获取细胞的移植。医生从捐赠者银行中取出皮肤细胞，并将它们重新编为诱导多功能干细胞，使之能够长成身体里其他类型的细胞。在这个过程里，医生将多功能诱导干细胞生长成一种视网膜细胞，然后将其注入患者右眼的视网膜。

光感受器前体细胞移植可修复视网膜损伤

年龄相关性黄斑变性（AMD）和视网膜色素变性（RP）这一类难治性视网膜疾病，其致盲的主要原因是视网膜光感受器（即光感细胞）的损伤和缺失。在过去的几十年中，研究人员做了大量的工作去探索修复这种视网膜光感细胞的有效方法，其中细胞替换疗法，即视网膜光感细胞（包括脑源性和视网膜源性的干细胞）移植一直是研究热点，但尚无实验能证明视网膜细胞移植对修复受损的视网膜光感受器并恢复视力有确切的帮助。但最近英国伦敦大学眼科中心和Moorfields眼科医院的一项联合研究给人们带来了希望，他们的研究结果表明，采用特定时期的视网膜光感细胞前体作为移植细胞能够成长为具有功能活力的视网膜光感受器。

视网膜干细胞移植任重而道远

进行性视网膜感光细胞的死亡是许多视网膜变性疾病的共同特征。现有的治疗方法不能恢复已经丧失的视功能。视网膜干细胞移植研究的不断深入在为视网膜变性患者带来希望的同时也面临一些严峻挑战:如何获得理想的视网膜干细胞?如何诱导视网膜干细胞分化成视杆及视锥细胞?如何诱导移植的细胞与受体细胞形成功能性突触连接?感光细胞丧失的早期,内部的视网膜神经通路是完整的,新的感光细胞只需与双极细胞形成突触连接就能恢复完整的视网膜神经通路。而感光细胞替换通常比其它神经元更直接更容易。因为感光细胞是感觉神经元,只在一个方向上与双极细胞-水平细胞形成连接。另外,视网膜特殊的层状结构决定了视网膜外层的感光细胞层是视网膜干细胞移植最理想的位置。视网膜干细胞研究的进展、视网膜变性疾病的特征及视网膜的特殊结构让我们有理由相信,干细胞移植的成功将首先来自视网膜感光细胞移植。

视网膜移植后结构和功能的重建

视网膜退行性变性疾病是一种视力渐进性减退最终丧失而致盲的眼底疾病。当今世界上治疗视网膜退行性变性疾病的方法主要有：视网膜移植（包括视网膜细胞移植、片层移植、全层移植等），人工视网膜植入，基因治疗和药物治疗等，其中用视网膜移植的方法来治疗视网膜退行性变性疾病的基础研究及临床应用在近10余年中开展的最普及和深入，

眼色素上皮细胞生理功能的研究现状及进展

视网膜色素上皮细胞移植治疗相关视网膜疾病的研究正广泛展开 ,由于视网膜色素上皮细胞的同种异体移植产生排斥反应 ,虹膜色素上皮细胞代替视网膜色素上皮细胞移植成为新的研究领域。本文就近年来视网膜色素上皮细胞和虹膜色素上皮细胞形态学和生理功能上的异同进行综述 。

维甲酸诱导分化视网膜母细胞瘤的机理研究

目的研究全反式维甲酸在视网膜母细胞瘤裸鼠移植瘤成瘤过程中的诱导分化作用及可能的机理。方法用腋部皮下注射SO-RB50细胞的方法对裸小鼠造模,定期观察肿瘤体积及重量、病理、电镜超微结构,增殖活性,检测各组肿瘤中CycinD1、CDK4、ICAM的表达水平。结果试验结束时给药组平均瘤重(2.750±0.302)g,于对照组的(7.150±1.228)g(P=0.008)及维甲酸缺乏组的(11.483±2.721)g(P=0.003)。镜检给药组肿瘤细胞大片出血坏死,对照组与原移植瘤的病理表现相同,维甲酸缺乏组核浆比大,核染色较对照组深。电镜示给药组细胞线粒体明显肿胀,空泡化,核糖体较对照组明显减少。对照组细胞同原移植瘤一致。维甲酸缺乏组游离核糖体较对照组多,溶酶体少见。给药组与对照组CyclinD1(P=0.012)、CDK4(P=0.010)差异有统计学意义,ICAM-1(P=0.071)未见有显著统计学差异;维甲酸缺乏组与对照组,CyclinD1(P=0.017)、CDK4(P=0.029)差异有统计学意义,ICAM-1(P=0.083)未见有显著统计学差异。结论维甲酸抑制视网膜母细胞瘤生长,维甲酸缺乏可促进视网膜母细胞瘤的生长,诱导分化作用的实现与调节CyclinD1和CDK4的表达水平有关。

年龄相关性黄斑变性的手术治疗

老年黄斑变性(AMD)在发达国家中是超过75岁老年人的首位致盲性眼病。对于部分亚型的渗出性年龄相关性黄斑变性,手术治疗具有一定的疗效。

分离视细胞层的新技术

目的为了进行视网膜视细胞移植研究，必须分离出可供移植的视细胞。能否得到纯视细胞，是对视网膜视细胞移植实验获得正确分析和良好结果的关键。方法采用一种从视网膜中分离切取纯视网膜视细胞层的可靠方法。用组织细胞震动切削机（ｖｉｂｒａｔｏｍｅ）切削视网膜，取得纯视网膜视细胞层。结果得到了可供移植的小鼠、大鼠、兔、猴及人的纯视网膜视细胞层。结论用此方法可获得视细胞纯度达１００％的纯视细胞层，方法可靠，操作较为简便。