视网膜色素上皮细胞来源的细胞外囊泡在年龄相关性黄斑变性发病机制中的作用

年龄相关性黄斑变性(AMD)是全球老年人不可逆视力丧失的主要原因之一,其主要病理特征是视网膜色素上皮(RPE)细胞变性和感光细胞不可逆性损伤或丢失。细胞外囊泡(EVs)是一类具有脂质双层膜的异质性纳米囊泡,包括外泌体、微囊泡和凋亡小体,它们通过传递RNA和蛋白质等分子发挥生物学效应。本综述论述了RPE细胞来源的细胞外囊泡(RPE-EVs)参与调节氧化应激、炎症反应、新生血管生成等AMD病理生理过程。RPE-EVs来源的Apaf1、HDAC6、miR-494-3p、miR-138-5p、miR-21、miR-543、miR-302a-3p等可作为诊断和治疗AMD的候选分子靶点,但其作用机制尚未阐明。由于RPE-EVs具有高生物相容性、低免疫原性、低毒性、靶向性、稳定性、特异性等独特优势,未来需要继续深入研究RPE-EVs在AMD发病机制中的作用,同时将关注点放到RPE-EVs在AMD诊疗中的作用,实现RPE-EVs的临床转化,为AMD的诊断和治疗开辟新途径。

枸杞提取物对过氧化氢诱导的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的:体外通过过氧化氢(H2O2)诱导视网膜色素上皮(RPE)细胞造成氧化损伤,观察枸杞提取物对人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞活性的影响,探讨枸杞提取物通过抗氧化对ARPE-19细胞的保护作用。方法:采用不同浓度H2O2诱导体外ARPE-19细胞的氧化损伤,确定最佳浓度;采用MTT法检测枸杞含药血清对ARPE-19细胞活力的影响,确定安全有效的药物浓度;观察各组细胞的形态,划痕试验检测各组ARPE-19细胞的活力;Western Blot法检测各组细胞Nrf2/ARE信号通路相关因子Nrf2的质蛋白和核蛋白的表达水平;试剂盒检测氧化应激水平的相关指标活性氧(ROS)含量、还原型谷胱甘肽(GSH)含量及过氧化氢酶(CAT)活力。结果:当H2O2浓度为200μmol/L,作用2 h时,ARPE-19细胞出现明显的氧化损伤(P<0.01);不同浓度的枸杞含药血清对ARPE-19细胞的干预效果不同,在2.5%、5%、10%的浓度下对损伤的ARPE-19细胞具有明显的促进增殖的作用(P<0.05),故选择2.5%、5%、10%浓度的枸杞含药血清进行下一步实验,与模型组相比,枸杞含药血清组细胞形态良好,长势均匀;细胞内的ROS含量显著降低(P<0.01),GSH含量明显上升(P<0.05),CAT活力显著升高(P<0.01);Nrf2质蛋白表达增强(P<0.05),核蛋白表达减弱(P<0.05)。结论:枸杞含药血清能够提高ARPE-19细胞自身的抗氧化能力,从而对ARPE-19细胞产生保护作用。

LED光源照射及PI3K抑制剂对人视网膜色素上皮细胞自噬和凋亡的影响

目的探讨LED光源照射对人视网膜色素上皮(RPE)细胞自噬和凋亡的影响,以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002在光照下对RPE细胞自噬和凋亡的影响。方法体外培养人ARPE-19细胞,随机分为6 h对照组、6 h模型组、6 h LY294002组,12 h对照组、12 h模型组、12 h LY294002组,24 h对照组、24 h模型组、24 h LY294002组,分别给于设定时间的LED冷光照射或加入LY294002后的光照。采用噻唑蓝法检测各组细胞存活率;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;透射电子显微镜观察各组细胞超微结构;构建稳定表达红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(LC3)的RPE细胞株,激光共聚焦合倒置荧光显微镜分析细胞自噬流变化;Western blot法检测苄氯素1(Beclin 1)、LC3和p62自噬相关蛋白表达水平。结果与对照组比较,6、12、24 h模型组细胞存活率均下降(均P<0.05),12、24 h LY294002组细胞存活率均下降(均P<0.01);与模型组比较,12、24 h LY294002组细胞存活率均升高(均P<0.05)。与对照组比较,6、12、24 h模型组和LY294002组细胞凋亡率均升高(均P<0.05);与模型组比较,6、12 h LY294002组细胞凋亡率均下降(均P<0.05)。模型组RPE细胞在光照24 h后,胞内可见较多的自噬泡,LY294002干预后也可见聚集性分布的自噬囊泡。观察自噬流发现,对照组少见红色亮点,模型组红色亮点荧光随光照时间延长数量逐渐增多,Merge图中黄色亮点数量增多明显,LY294002干预后,红色亮点与黄色亮点呈增多趋势。与对照组比较,6、12、24 h模型组和LY294002组细胞中Beclin 1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平均升高,p62蛋白表达水平均下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,6、12、24 h LY294002组细胞中Beclin 1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达均升高,12、24 h LY294002组细胞中p62蛋白表达水平均下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论LED光源照射可刺激ARPE-19细胞发生自噬,增加细胞凋亡率;PI3K抑制剂LY294002能上调细胞的自噬活性,减缓凋亡。

热休克转录因子1对视网膜色素上皮细胞抗氧化和抗衰老的调控作用

目的探讨热休克转录因子1(HSF1)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)抗氧化和抗衰老的作用。方法利用成簇规律间隔短回文重复序列及相关蛋白9(CRISPR/Cas9)基因编辑技术敲除人ARPE-19细胞系中HSF 1基因,构建并获得2种HSF1缺失ARPE细胞株(ARPE/Hsf1-/-),分别命名为H8、H9细胞株。取野生型、H8和H9细胞株,应用DHE探针染色结合流式分析技术测定细胞内活性氧簇(ROS)含量,应用流式细胞分析方法测定细胞周期;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定不同培养时间点细胞活力值;采用结晶紫染色实验测定细胞相对存活率;采用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色实验检测衰老细胞比率;采用Western blot法检测各细胞株中热休克蛋白(HSP)70、HSP27、聚集素(CLU)、p53、p21和白细胞介素(IL)-1β蛋白表达水平;采用实时荧光定量PCR法测定各细胞株中p53、p21、IL-6、IL-8、IL-1β、单核细胞趋化蛋白1(MCP1)mRNA表达水平。比较各细胞株在不同热休克处理条件下和HSP90抑制剂IPI504处理下热休克反应相关蛋白相对表达量,比较各细胞株不同浓度H_(2)O_(2)处理后相对存活率,比较各细胞株经或未经ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理后p21蛋白相对表达量。结果基因测序显示H8和H9细胞株成功携带突变基因,Western blot检测结果显示H8、H9细胞株不表达HSF1蛋白,HSF1在ARPE-19细胞中被成功敲除。与野生型细胞株相比,H8、H9细胞株中的HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);各细胞株HSP90蛋白相对表达水平总体比较,差异无统计学意义(F=0.29,P>0.05)。在不同热休克刺激和IPI504诱导下野生型细胞株中HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与野生型细胞株相比,H8和H9细胞株的HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著低于相应处理的野生型细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与野生型细胞株相比,H8和H9细胞株培养24、48、72和96 h的细胞活力均显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与野生型细胞株比较,H8和H9细胞株G1期细胞百分比显著升高,细胞周期抑制因子p53、p21的mRNA和蛋白相对表达水平显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),SA-β-gal染色阳性细胞比率显著增加,差异均有统计学意义(均P<0.001);衰老相关炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β、MCP1 mRNA相对表达量显著下降,差异均有统计学意义(均P<0.001)。H8和H9细胞株ROS含量明显高于野生型细胞株,差异均有统计学意义(均P<0.001);H8和H9细胞株经NAC处理后p21蛋白相对表达量较未经NAC处理明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。H8和H9细胞株200、400、600、800μmol/L H 2O 2处理条件下细胞相对存活率明显低于野生型细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论敲除HSF1可下调HSP的表达,激活ROS/P53/P21通路,诱导RPE细胞衰老,并增加RPE对氧化应激刺激的敏感性。HSF1在RPE细胞中可能具有抗衰老和抗氧化调控作用。

雷帕霉素对光诱导下视网膜色素上皮细胞自噬的影响

目的:探讨雷帕霉素对光诱导下视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)自噬的影响。方法:将自噬双标mRFP-eGFP-LC3质粒转染进ARPE-19细胞中获得稳定表达的转染细胞株,随后随机分为6 h对照组、6h模型组、6 h雷帕霉素组;12 h对照组、12 h模型组、12 h雷帕霉素组和24 h对照组、24 h模型组、24 h雷帕霉素组。对照组避光培养,模型组受光照刺激;雷帕霉素组加入10μmol/L雷帕霉素后受光照刺激,光源采用LED冷光灯,在(16500±500)lx光照强度下照射细胞6、12、24 h。检测转染效率,MTT检测ARPE-19细胞存活率;激光共聚焦显微镜对自噬流变化进行定性分析,透射电镜观察细胞自噬形态;蛋白免疫印迹法对Beclin1、LC3、P62自噬相关蛋白表达量进行检测。结果:与对照组相比,模型组光照6、12、24 h后,细胞存活率显著下降(P<0.001);雷帕霉素组经光照后细胞存活率高于模型组(P<0.05)。光照6、12、24 h后模型组红色荧光斑点较对照组逐渐增多,绿色荧光斑点也随之增加,Merge图中从光照12 h开始黄色斑点数量增多明显。雷帕霉素组在光照6、12、24 h时红色荧光斑点较模型组加强,绿色荧光较模型组弱。透射电镜观察发现模型组胞内见较多的自噬泡,雷帕霉素组细胞见大量聚集分布自噬囊泡。蛋白免疫印迹结果发现光照6、12、24 h后,模型组中自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的相对表达水平均增加,P62蛋白表达较低。而采用雷帕霉素干预后,与模型组相比,雷帕霉素组在光照6 h时Beclin 1蛋白表达量差异不明显、在12、24h时Beclin 1蛋白表达量逐渐升高;LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值均高于模型组;P62蛋白表达量差异不显著。结论:光照可诱导ARPE-19细胞自噬现象的发生,且雷帕霉素能上调其自噬活性。

DRP1调控线粒体稳态对人视网膜色素上皮细胞上皮-间充质转化的影响

目的探讨线粒体动力相关蛋白(DRP1)对人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞上皮-间充质转化(EMT)进程的影响。方法构建H_(2)O_(2)干预ARPE-19细胞模型,将ARPE-19细胞分为3组,NG组:采用含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养细胞6 h;H_(2)O_(2)组:先采用650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预细胞,此后培养方式及时间与NG组相同;H_(2)O_(2)+Mdivi-1组:先采用10μmol·L^(-1)Mdivi-1处理ARPE-19细胞2 h,再给予650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预,此后培养方式及时间与NG组相同。Western blot检测各组细胞p-DRP-1/DRP1、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波型蛋白(Vimintin)及紧密连接蛋白(ZO-1)表达水平;线粒体红色荧光探针检测各组细胞线粒体形态;线粒体超氧化物红色荧光探针检测各组细胞线粒体活性氧(ROS)水平;JC-1染色试剂盒检测各组细胞线粒体膜电位;免疫荧光检测各组细胞中ZO-1表达水平。结果H_(2)O_(2)组细胞p-DRP-1/DRP1蛋白表达比值高于NG组,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞p-DRP-1/DRP1蛋白表达比值低于H_(2)O_(2)组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞较H_(2)O_(2)组线粒体碎片化程度得到改善。H_(2)O_(2)组细胞线粒体ROS水平(4.42±0.29)与NG组(1.00±0.17)及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组(2.15±0.18)比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)组细胞红/绿荧光强度比值(0.16±0.12)与NG组(1.00±0.09)及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组(0.42±0.05)比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)组细胞上皮样标志物表达下降,间质样标志物表达上升,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞上皮样标志物表达上升,间质样标志物表达下降。各组细胞α-SMA、N-钙黏蛋白、E-钙黏蛋白、Vimintin及ZO-1相对表达量比较,H_(2)O_(2)组与NG组及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ZO-1免疫荧光染色实验显示,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组的细胞连接紧密程度优于H_(2)O_(2)组。结论DRP1可调控线粒体动态平衡,靶向DRP1可改善线粒体功能并抑制EMT进展,从而减轻H_(2)O_(2)诱导的RPE细胞功能障碍。

滋阴补肾片对H_(2)O_(2)诱导人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨滋阴补肾片(ZYBS)对H_(2)O_(2)诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞ARPE-19氧化应激损伤的保护作用。方法将ARPE-19细胞分为对照组(CG)、模型组(MG)、低剂量ZYBS组(LZYBS)、中剂量ZYBS组(MZYBS)、高剂量ZYBS组(HZYBS),CG组不作任何处理,MG组加入200 mM H_(2)O_(2)处理24 h,LZYBS、MZYBS、HZYBS组分别加入0.5%、1.0%、2.0%的ZYBS含药血清后,再加入200 mM H_(2)O_(2)处理24 h。细胞计数试剂-8(CCK-8)测定各组细胞活性,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)细胞原位凋亡试剂盒测定细胞凋亡,生化试剂盒检测细胞上清液中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的表达水平。结果(1)细胞活性:与CG组比较,MG组ARPE-19细胞活性降低(t=27.844,P=0.000);与MG组比较,LZYBS、MZYBS、HZYBS组ARPE-19细胞活性升高(t_(LZYBS)=3.550,P=0.003;t_(MZYBS)=7.402,t_(HZYBS)=10.930,均P=0.000),差异均有统计学意义,且细胞活性随浓度的升高呈剂量依赖性。(2)细胞凋亡:与CG组比较,MG组ARPE-19细胞凋亡率升高(t=25.611,P=0.000);与MG组比较,MZYBS、HZYBS组ARPE-19细胞凋亡率降低(t_(MZYBS)=4.376,P=0.001;t_(HZYBS)=8.166,P=0.000),差异均有统计学意义,且细胞凋亡率随浓度的升高呈剂量依赖性。(3)氧化应激:与CG组比较,MG组ARPE-19细胞ROS、MDA水平升高(t_(ROS)=27.333,t_(MDA)=23.922,均P=0.000),SOD、GSH-Px水平降低(t_(SOD)=11.083,t_(GSH-Px)=14.192,均P=0.000);与MG组比较,LZYBS、MZYBS、HZYBS组ARPE-19细胞ROS(t_(LZYBS)=6.410,t_(MZYBS)=10.417,t_(HZYBS)=10.116,均P=0.000)、MDA(t_(LZYBS)=4.998,t_(MZYBS)=12.319,t_(HZYBS)=19.922,均P=0.000)水平降低,SOD(t_(LZYBS)=6.268,t_(MZYBS)=7.889,t_(HZYBS)=14.894,均P=0.000)、GSH-Px(GSH-Px:t_(LZYBS)=4.453,P=0.001;t_(MZYBS)=6.162,t_(HZYBS)=11.501,均P=0.000)水平升高,差异均有统计学意义,且呈剂量依赖性。结论ZYBS可降低H_(2)O_(2)诱导的RPE细胞的氧化应激损伤,抑制凋亡并减轻氧化应激水平。

手术联合药物治疗视网膜色素变性450例疗效观察

视网膜色素变性是一种遗传性致盲性眼病,以感光细胞变性、凋亡以及上皮功能缺失为特征,阻碍视网膜色素上皮细胞吞噬视细胞外节脱落的膜盘,视细胞最终变性死亡。目前其临床发病机制尚不明确,而且缺乏特异性的治疗手段。如何拓宽及改善其综合治疗方法,提高临床治疗效果,

视网膜色素上皮细胞间紧密连接及其在AMD发病过程中的作用研究进展

年龄相关性黄斑变性(AMD)是引起老年人群不可逆性视力损害的常见眼病。视网膜色素上皮细胞(RPECs)间紧密连接(TJ)是血-视网膜外屏障(oBRB)的重要结构单元。紧密连接在AMD的发病过程中有所缺陷,进而促进oBRB的破坏,加速AMD的发生和进展。本文将对紧密连接与紧密连接蛋白在维持oBRB功能、紧密连接蛋白异常与oBRB破坏在AMD发病过程中的作用研究进行综述,以期为AMD治疗的研究提供新的思路。

枸杞子促进虹膜色素上皮细胞定向分化治疗视网膜色素变性的分子网络调控机制研究

目的:基于生物信息学和网络药理学方法探究枸杞子(LF)促进虹膜色素上皮细胞定向分化治疗视网膜色素变性(RP)的分子网络调控机制。方法:在中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)检索LF的主要活性成分及其可能的作用靶点;从GEO数据库下载GSE81058基因表达谱数据,采用R软件构建虹膜色素上皮细胞(IPE)和视网膜色素上皮细胞(RPE)差异表达基因火山图和聚类热图;采用STRING数据库构建LF成分-靶点和IPE-RPE差异表达基因的蛋白质-蛋白质交互网络(PPI),运用Cytoscape提取交集网络基因;通过DAVID数据库对交集基因进行基因本体和信号通路分析;采用cytoHubba分析LF作用于IPE的关键靶点。结果:共获得LF的化学成分188个,其中主要的入血活性成分36个,这些活性成分可能作用的靶点201个;IPE与RPE主要的差异表达基因有142个,其中上、下调基因各71个;发掘得到105个与LF促进IPE分化以治疗RP的相关基因靶点;LF作用于这些靶点涉及的生物学过程包括调节细胞分化、调节视网膜层形成等,相关的分子功能主要涉及转录共激活剂活性、离子通道活性等,主要富集于细胞质、高尔基体、细胞核等区域;LF作用于IPE涉及的分子机制包括调控PI3K-Akt信号通路、神经活性配体-受体相互作用通路等;LF促进IPE分化主要作用于SPP1、MMP9等十个关键靶点。结论:IPE与RPE具有明显差异的基因表达谱,LF的有效活性成分可作用于这些差异表达基因,促进IPE细胞分化为RPE,从而治疗RP。本研究可为细胞移植与中医药联合的中西医结合疗法应用于RP的临床治疗提供科学依据。

lncRNA MEG3靶向miR-130a-5p调控人视网膜色素上皮细胞损伤的研究

目的探讨lncRNA MEG3在年龄相关性黄斑变性(AMD)患者中的表达及其靶向miR-130a-5p对人视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的影响。方法选取2020年6月至2021年8月永州职业技术学院附属医院收治的AMD患者38例以及同期的健康体检者38例,收集其空腹静脉血,qRT-PCR检测其血清lncRNA MEG3表达水平。不同浓度(0μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、600μmol/L)过氧化氢(H2O2)处理人RPE细胞系ARPE-19细胞构建RPE细胞损伤模型,并检测lncRNA MEG3在H2O2处理的ARPE-19细胞中表达。双荧光素酶报告基因实验和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验分析lncRNA MEG3与miR-130a-5p的靶向关系。ARPE-19细胞分为对照组(常规培养,不进行任何特殊处理)、H2O2组(200μmol/L H2O2处理24 h)、Vector组(转染pcDNA3.1-NC 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3组(转染pcDNA3.1-lncRNA MEG324 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3+miR-NC组(共转染pcDNA3.1-lncRNA MEG3和miR-NC 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3+miR-130a-5p组(共转染pcDNA3.1-lncRNA MEG3和miR-130a-5p mimics 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h),qRT-PCR检测各组细胞中lncRNA MEG3、miR-130a-5p表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞活性,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,2,7-二氯二氢代荧光黄二醋酸(DCFH-DA)荧光探针法、硫代巴比妥酸(TBA)法、水溶性四唑盐1(WST-1)法分别检测各组细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,ELISA法检测各组细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、β-淀粉样蛋白(Aβ)水平,Western blot检测各组细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)通路相关蛋白表达。结果与健康体检者比较,lncRNA MEG3在AMD患者血清中呈低表达(P<0.05)。与0μmol/L H2O2处理组比较,100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、600μmol/L H2O2处理ARPE-19细胞均可降低细胞存活率以及下调细胞中lncRNA MEG3表达水平(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验和RIP实验证实lncRNA MEG3与miR-130a-5p存在靶向关系。过表达lncRNA MEG3通过下调miR-130a-5p表达提供了H2O2诱导的ARPE-19细胞存活率、SOD水平及Nrf2、HO-1蛋白表达水平,降低了细胞凋亡率及ROS、MDA、IL-6、TNF-α、Aβ水平(P<0.05)。结论lncRNA MEG3在AMD患者血清中呈低表达,上调lncRNA MEG3可靶向负调控miR-130a-5p表达,激活Nrf2/HO-1通路,减轻人RPE细胞氧化应激和炎症反应,保护细胞免受损伤。

自体虹膜色素上皮细胞移植治疗视网膜色素上皮细胞变性研究

目的:研究自体虹膜色素上皮细胞(iris pigment epithelium,IPE)移植治疗视网膜色素上皮细胞变性的效果。方法:采用酶-机械分离-酶消化法获取高纯度、高活力的IPE细胞用于移植,采用外路法将IPE细胞悬液移植入视网膜下腔。结果:IPE移植术后患者眼底移植区色素沉着减少,未见渗出,出血,视网膜平,视力入院时的0.15,术后2wk提高至0.2。多焦ERG显示移植区P1波平均反应密度上升。结论:自体虹膜色素上皮细胞移植有望成为视网膜色素上皮细胞变性疾病治疗的一新方法。

多次经瞳孔温热疗法的湿性年龄相关性黄斑变性视网膜色素上皮和脉络膜萎缩:病例报告(英文)

目的:报告 1 例湿性年龄相关性黄斑变性(AMD) 在多次经瞳孔温热疗法(TTT) 后,脉络膜新生血管(CNV)消退,但发生了视网膜色素上皮(PRE)和脉络膜的萎缩并伴低视力。方法: 复习包括眼底照相、眼底荧光素血管造影( FFA)、靛青绿血管造影和干涉光断层扫描在内的临床资料。结果: 男性 72 岁主诉左眼视物模糊,FFA证实为黄斑部息肉状脉络膜血管病变。其左眼的 CNV未经任何治疗在6a 间保持 0.1 的视力。约 2a 后,右眼出现一片 CNV。在此后 3a 内,病灶保持或大(3×5PD)或小(1×2PD)并伴有明显渗出和出血,先后做了 7 次 TTT,参数为 80￣280mW、2mm光斑、曝光 60s,每次间隔 3mo以上。CNV病灶最终消退,但黄斑部遗留白色区,视力由 0.3降至 0.04。结论:TTT可使 CNV病灶消退,但可发生明显的 RPE和脉络膜萎缩,这无益于视力。如果对亚洲患者应用 TTT,其参数可低于 120mW/mm,限于 2 次。

视网膜色素变性患者手术治疗45名(英文)

目的:评估视网膜色素变性患者的手术疗效。方法:对45名视网膜色素变性患者90眼进行手术治疗,术前和术后分别对这些患者进行了视锐度、自动视野计和三种视觉电生理指标(F-ERG、EOG和P-VEP)的检测。结果:术后3～22月,患者的视锐度得到了明显的改善,视野显著扩大,视野缺损减低。术前在90眼中有73眼(81.1%)的暗视F-ERG为熄灭型,在术后3～22月期间进行复查时,有些曾消失的F-ERG波复现,暗视F-ERG为熄灭型的眼下降至66(73.3%)只(P <0.05, t检验),一些原来残存的F-ERG波的波幅增加,峰潜伏期也缩短。EOG曲线变得更为弯曲,某些EOG的参数(如Arden比和G比值)也明显的增加(P <0.05, t检验)。用棋盘格翻转刺激中央6о视野时能够记录到P-VEP的患者数目,在45例中由术前的22例在术后增加到31例。这45例的残存P100波的平均振幅由术前的1.007μV增加到术后的2.236μV,有显著的统计学差异(P<0.005, t检验)。结论:手术治疗RP是有效和安全的,并能改善患者的视觉和阻止RP病程的发展。

视网膜色素上皮、Bruch膜及脉络膜的老年性黄斑变性改变(英文)

目的研究并定量分析视网膜色素上皮(retinalpigment epithelium,RPE)、Bruch膜和脉络膜的老年性改变及在老年黄斑变性眼的改变。方法应用改良Masson三色组织染色法及电脑图像分析软件,对36例不同龄正常眼及6例老年黄斑变性(age—related macular degenera—tion,ARMD)眼的RPE数量和形态、Bruch膜的厚度和脉络膜毛细血管的密度及脉络膜厚度进行定量分析研究及讨论。结果RPE老年性形态改变包括数量的减少及细胞高度的增加伴有Bruch膜增厚(老年性黄斑变性);但脉络膜毛细血管密度及脉络膜的厚度与年龄未见明显的关系。ARMD眼主要表现为RPE形态明显改变及基底膜线样沉着物形成,Bruch膜增厚。结论RPE以及Bruch膜的改变可能是早期和基础性的老年性改变,其进一步的变化可能导致脉络膜及视网膜的损害。

虹膜色素上皮细胞移植治疗视网膜色素上皮细胞变性

目的研究自体虹膜色素上皮细胞(Iris P igm ent Ep ithelium,IPE)移植治疗视网膜色素上皮细胞变性的效果。方法采用酶—机械分离—酶消化法法获取高纯度、高活力的RPE细胞用于移植,采用外路法将IPE细胞悬液移植入视网膜下腔。结果IPE移植术后患者眼底移植区色素沉着减少,未见渗出,出血,视网膜平,视力从入院时的0.15提高至术后2W的0.2。多焦ERG显示移植区P1波平均反应密度上升。结论IPE细胞移植有望成为RP治疗的一新方法。

表皮生长因子治疗碘酸钠诱导视网膜色素上皮变性扫描电镜观察

通过扫描电镜观察碘酸钠对家兔视网膜色素上皮(RPE)细胞的破坏及表皮生长因子(EGF)对其影响。参照 Cohen 法从胎儿组织中提取人表皮生长因子(hEGF);给家兔静脉注入碘酸钠,分别间隔48小时和72小时再注射一次;第7天取出部分眼球,扫描电镜观察 RPE 细胞外形及数量,余右眼玻璃体内注入hEGF 提取液,左眼注等量生理盐水;7天后,取出眼球观察。结果间隔48小时组,RPE 细胞损伤较重,hEGF对其影响不大;间隔72小时组,RPE 细胞损伤较轻,hEGF 治疗组残余 RPE 细胞较多。表明 hEGF 对损伤程度较轻的 RPE 细胞可能有促修复作用。

手术治疗视网膜色素变性的护理

手术治疗视网膜色素变性的护理承德医学院附属医院鲍延华视网膜色素变性（ＲＰ）是一种视功能进行性减退的先天性遗传性眼病，致盲率高。其临床表现为夜盲、色觉障碍、视野逐渐缩窄、晶体后囊混浊、玻璃体退变、视网膜血管变细、赤道附近有不同程度骨细胞样色素沉积、视乳...

Tetramethylpyrazine在视网膜色素上皮细胞变性及脉络膜血流和RPE细胞氧化应激中的作用(英文)

目的:研究1%Tetramethylpyrazine(TMP)在视网膜色素上皮细胞(RPE)变性,脉络膜血流和RPE细胞氧化应激中的作用。方法:在碘酸钠诱导的大鼠RPE变性研究中,1%TMP滴眼液预先处理1wk,3次/d,1wk后予碘酸钠舌下静脉注射,在2wk和4wk末,视网膜电图(ERG)测量c波。色素微球体技术分析高眼压状态下TMP对脉络膜血流的影响。Methylthiazoltetrazolium(MTT)分析TMP在各种氧化应激中对RPE的保护作用。结果:碘酸钠注射后2wk,碘酸钠组ERG的c波下降至对照组的36%(P<0.01)。4wk后,碘酸钠组下降至对照组的46%(P<0.01),而1%TMP+碘酸钠组下降至对照组的77%(P<0.01)。与碘酸钠组比较,1%TMP+碘酸钠组控制了67%的c波下降(P<0.05)。在脉络膜血流的测量中,30,60,和120min的结果显示,TMP显著增加脉络膜血流。在氧化应激部分,不同浓度的TMP在各种氧化应激损伤中,对RPE都有各种程度的保护作用。结论:浓度为1%Tetramethylpyrazine可以显著保护碘酸钠和氧化应激诱导的RPE变性,增加脉络膜血流,并可能在AMD的治疗中发挥作用。