移植视网膜NOS阳性神经元的发育

目的 观察不同年龄组段大鼠正常视网膜及移植视网膜内NOS阳性神经元的发育情况及其定位分布。方法实验分正常视网膜发育组和移植视网膜发育组 ,应用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 (NADPH)组织化学方法显示。结果 1、NOS阳性神经元最早出现于生后第五天 (P5 ) ,P18时阳性神经元数目达到最高峰。 2、移植视网膜具有正常视网膜的各层结构和相似的生长规律 ,NOS阳性神经元在生后第 4天移植视网膜 (TP4)中出现 ,TP12数量达到高峰值 ,TP2 2后降至正常成年鼠水平。结论 根据NOS阳性神经元的定位、分布 ,推测其为无长突细胞、移位无长突细胞及节细胞。

维拉帕米对缺血后大鼠视网膜NOS阳性神经元的影响

实验用 β- NADPH脱氢酶组织化学染色研究维拉帕米对缺血后大鼠视网膜 NOS阳性神经元的影响。结扎双侧颈总动脉使视网膜缺血 ,3小时后松结复流。分别于缺血前 15分钟和再灌流前 1分钟腹腔注射维拉帕米 (5 m g/kg/次 ) ,对照组腹腔注射等量生理盐水。动物存活 3天后取视网膜进行 β- NADPH组化反应。结果表明 :视网膜缺血后 NOS阳性神经元减少 ,并出现 i NOS阳性细胞。在缺血前后应用维拉帕米可使视网膜内 NOS神经元较对照组显著减少 (P<0 .0 1) ,NOS神经元形态良好。说明维拉帕米减少大鼠视网膜缺血后 NOS阳性神经元 ,其相应 NO量减少 ,推测维拉帕米对大鼠缺血后视网膜功能具有保护作用。

移植视网膜NOS阳性神经元的发育及其与上丘的联系

目的:观察不同年龄组段大鼠正常视网膜及移植视网膜内NOS阳性神经元的发育情况及其定位分布,以及移植视网膜能否与视觉中枢建立功能联系。方法:应用NADPH脱氢酶组织化学方法和c-fos免疫组织化学方法显示。结果:(1)正常大鼠视网膜NOS阳性神经元最早出现于生后第5天,第18d数量达到高峰。(2)移植视网膜具有正常视网膜的各层结构和相似的生长发育规律,移植视网膜NOS阳性神经元在生后第4d出现,第12d数量达到高峰,第22d后降至正常成年鼠水平。(3)移植视网膜接受光刺激后,一侧或双侧上丘浅层出现明显的c-fos免疫反应阳性神经元。结论:根据NOS阳性神经元的定位、分布,推测其为无长突细胞、移位无长突细胞及节细胞;移植视网膜能与宿主视觉中枢上丘建立功能联系。

银杏内酯对胚基底前脑NOS、AChE阳性神经元发育的影响

目的 探讨银杏内酯对胚基底前脑NOS和AChE阳性神经元发育的影响。方法 实验分成银杏组、NGF组、BDNF组和单纯对照组 ,取孕 17dSD大鼠胚基底前脑原基制成细胞悬液接种于 96孔培养板和 2块 2 4孔培养板中 ,分别加入含银杏内酯、NGF、BDNF及不含上述成份的DMEM培养液 ,于体外培养 18d后 ,96孔培养板行MTT比色分析测定光吸收值 (OD值 ) ,以检测培养的神经元活力。2块 2 4孔培养板分别行NADPH d和AChE组化染色 ,显微镜下计数各组每孔中的NOS和AChE阳性神经元数 ,并用CMM 30 1图像分析系统对两种神经元的细胞面积和细胞周长进行处理 ,数据用方差分析和SNK检验进行统计学处理。结果 银杏组MTT比色分析的OD值和NOS、AChE阳性神经元数、细胞面积、细胞周长等指标均明显地好于单纯对照组 ,达到或仅稍差于NGF组或BDNF组的指标。

植物雌激素对去卵巢大鼠海马NOS阳性神经元及学习记忆的影响

目的 :观察植物雌激素对去卵巢大鼠海马NOS阳性神经元及学习、记忆的影响 ,对中枢神经系统的保护作用。方法 :采用NADPH d酶组化观测各组大鼠海马各功能亚区NOS阳性神经元数目和Morris水迷宫行为学方法。结果 :定位航行实验显示各组大鼠的平均逃避潜伏期无明显差异 ,而空间探索实验显示植物雌激素组平台象限的游泳距离百分比和穿台次数均高于去卵巢对照组。在海马CA1和齿状回 (DG) ,植物雌激素组NOS阳性神经元数目较去卵巢对照组明显增多 (P <0 .0 5 )。结论 :植物雌激素能增加海马神经元NOS的表达 ,改善去卵巢大鼠的学习记忆能力 ,提示对中枢神经系统退行性病变具有保护作用。

先天性巨结肠病肠壁NOS阳性神经元光镜和电镜观察

目的 探讨NOS阳性神经元与先天性巨结肠病病因及病理机制的关系。 方法 对扩张段和移行段肠壁分别作全层铺片 ,NADPH d酶组织化学染色 ,光镜和扫描电镜下观察NOS阳性神经结构。 结果 扩张肠段光镜下肠肌丛神经节和神经元均较大 ,节内神经元染色深数量多 ,沿神经节周边及神经纤维发出处排列。扫描电镜下神经元胞体较大 ,排列较密 ,发出的神经纤维较多 ,在各个方向上相互连接。沿肌纤维排列的神经元之间有较多的横向连接纤维 ,肠肌丛神经元还通过穿行于环行肌层的神经纤维和粘膜下层神经元相连接。移行段光镜下节内神经元胞浆染色较淡 ,深浅不一 ,神经节和神经元均较小 ,发出的纤维较细且染色较淡。扫描电镜下神经元胞形较小 ,且大小不等 ,密度较小 ,神经元间的纤维联系及神经纤维攀附于肌纤维表面的现象均较少。神经元和神经纤维呈沿纵行肌长轴线性分布。

人胎大肠NOS阳性神经元发育的免疫组化观察

目的探讨人胎大肠NOS阳性神经元发育的规律。方法用免疫组织化学法对人胎大肠NOS阳性神经元的表达进行观察。结果第3个月龄时,肌间神经丛处有单个分布或三、五成群的NOS阳性神经元,胞体较小,圆形或椭圆形,胞质少,染色淡,有的神经元一端有小的突起。随着胎龄的增加,NOS阳性神经元胞体逐渐增大,粘膜下层也出现单个的NOS阳性神经元。第6-7个月龄时,肌间神经丛内NOS阳性神经元为多极神经元,稀疏地分布在靠内环肌一侧,肌间神经丛内形成神经纤维网,网中出现胞体较小淡染的NOS阳性神经元。在环肌层内可见到NOS阳性神经元分布。结论大肠壁内NOS阳性神经元的发育与各层组织细胞的发育有密切关系。

电针对SNI大鼠痛觉过敏及脊髓背角NOS阳性神经元表达的影响

目的:探讨电针对SNI大鼠痛觉过敏及脊髓背角NOS阳性神经元表达的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组(n=8)。采用坐骨神经分支选择性损伤模型,电针"委中"和"环跳"穴,观察其对大鼠机械痛阈和热痛阈的影响,以还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)法,观察各组大鼠脊髓背角NOS阳性神经元的变化,并用平均光密度来定量表示脊髓背角NOS的阳性神经元表达。结果:SNI手术可显著降低大鼠机械痛阈,损伤侧脊髓背角NOS阳性神经元表达显著升高,与假手术组及非伤侧相比,差异均有显著性(P<0.05或0.01);电针干预后大鼠伤侧脊髓背角的NOS阳性神经元表达降低,与模型组比较差异有显著性(P<0.05),与此同时大鼠机械痛敏状态显著改善,甚至痛行为消失。结论:电针减轻神经病理性痛的痛过敏可能与其调控脊髓NOS的功能有关。

神经节苷脂对不完全性脑缺血后海马CA1区NOS阳性神经元表达的影响

目的 :探讨神经节苷脂 (GM1)对不完全性脑缺血及再灌注不同时间后海马CA1区一氧化氮合酶 (NOS)的影响及对神经元的保护作用。方法 :用双侧颈总动脉夹闭加放血的方法制成大鼠不完性脑缺血及再灌注模型 ,以还原尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 (NADPH d)组织化学方法观察缺血及再灌注后海马CA1区NOS阳性神经细胞变化及GM1对其影响。结果 :海马CA1区神经细胞受损 ,在缺血 30min时NOS阳性细胞数最高 (44 .5±7.4 ) ,为对照组的 2倍 ,再灌注 2h ,12h ,2 4h ,3d后逐渐下降 ,5d时恢复正常水平。而GM1能防止脑缺血及再灌注后神经细胞受损和NOS阳性神经细胞变化。 结论 :GM1对大鼠不完全性脑缺血及再灌注不同时间后海马CA1区NOS的表达有抑制作用 ,并对神经元具有保护作用。

大鼠孤束核内5-HT能纤维和终末与向臂旁核投射的NOS阳性神经元的联系

应用四甲基罗达明逆行标记和免疫荧光技术相结合 ,在激光扫描共聚焦显微镜下对大鼠孤束核内 5 -HT能纤维和终末与向臂旁核投射的 NOS阳性神经元之间的联系进行了观察。将四甲基罗达明注入一侧外侧臂旁核后可见孤束核尾段背内侧、胶质、小细胞、内侧、中间内侧等亚核和连合亚核内出现较多的逆标神经元 ,四甲基罗达明逆标和 NOS阳性神经元以及 5 -HT阳性终末重叠分布 ,其中四甲基罗达明和 NOS双重阳性神经元分别占四甲基罗达明逆标和 NOS阳性神经元总数的 8.3% ( 14 /16 8)和 18.4% ( 14 /76 )。在此 5 -HT样阳性纤维和终末包绕着 NOS阳性神经元、四甲基罗达明逆标神经元及四甲基罗达明和一氧化氮合酶双重阳性神经元的胞体和树突 ,形成点状紧密接触。本研究结果提示 ,孤束核内来自下行性抑制系统的 5 -HT能纤维和终末可能与向臂旁核投射的 NOS阳性神经元形成突触联系 ,从而可对

内脏伤害性刺激后Fos在大鼠脑内NOS阳性神经元内的表达

目的 :观察一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元在内脏伤害性信息传递通路上的分布。方法 :给予大鼠内脏伤害性刺激后 ,采用Fos免疫组织化学 (ABC法 )和还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 (NADPH d)组织化学双重染色的方法 ,观察脑内NOS和Fos阳性神经元的分布。结果 :脑内Fos/NOS双标阳性神经元主要分布在孤束核 ,中缝背核 ,丘脑室旁核 ,下丘脑室旁核、室周核、背内侧核 ,中脑导水管周围灰质腹外侧部、背外侧部 ,臂旁内侧核 ,内侧缰核 ,杏仁复合体内侧部等部位。结论

电针抗胃炎性痛对内脏感觉c-fos及NOS阳性神经元的影响

目的 :探讨大鼠内脏感觉传入系统c fos及NOS阳性神经元在胃炎性痛时的变化和电针抗胃炎性痛对其的影响。方法 :采用免疫组织化学方法和还原型辅酶Ⅱ显色方法 ,显示在生理条件、胃炎性痛及电针抗痛时c fos和NOS阳性神经元在结状神经节 (NG)、背根神经节 (DRG)、脊髓(SC)及孤束核 (NTS)的表达及其变化。结果 :胃炎性痛时大鼠NG、DRG、SC和NTS中NOS阳性成分有明显变化 ,而c fos的变化仅仅出现在NTS。电针抗胃痛时能调整各个部位NOS阳性成分的变化幅度及孤束核c fos的表达量。结论 :①NO可能参与将胃的伤害性信息向中枢传递 ,其上传途径可能主要是伴随迷走神经径路上行到达脑干的内脏感觉通路 ;②依据c fos在NTS和SC中表达的差异 ,推测在脊髓中可能存在着下行抑制性通路 ,在脊髓水平即对传入的内脏伤害性信息进行了整合 ,阻抑信息的上传 ;③电针参与对胃炎性痛的调节与迷走神经通路中的NO能神经有密切的关系。

人胎儿和新生儿脊髓和DRG内nNOS阳性神经元的表达和分布

目的 :观察 2 4～ 2 7w人胎儿和新生儿的脊髓和背根神经节 (DRG)内神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)阳性神经元的表达和分布。方法 :ABC免疫细胞化学方法。结果 :( 1 ) 2 4～ 2 7w人胎儿胸髓和腰 1～ 3节段的中间带外侧核和前角Ⅷ层和Ⅸ层内可观察到nNOS阳性神经元。颈、胸、腰各段DRG内nNOS免疫阳性神经元占DRG细胞总数的 84%～ 88%。 ( 2 )新生儿脊髓和DRG内nNOS免疫阳性神经元的分布情况与上述胎儿相似。但DRG内nNOS免疫阳性神经元的体积有所增加 ,数量明显减少 ,约占DRG细胞总数的 70 %～ 73 %。结论 :人胎儿脊髓和DRG在发育的 2 4～ 2 7w至出生时 ,nNOS阳性神经元的表达在定位分布上无差异 。

雄激素替代对去睾丸大鼠基底前脑NOS及Nestin阳性神经元的影响

目的 观察雄激素替代对去睾丸大鼠基底前脑一氧化氮合酶 (NOS)及巢蛋白 (Nestin)阳性神经元的影响。方法 将 2 8只健康成年雄性SD大鼠随机分为 4组 :去势 2 4h雄激素替代组、去势 2w雄激素替代组、去势 2 4h芝麻油替代组及假手术组。用组织化学及免疫组织化学染色方法观察基底前脑NOS和Nestin阳性神经元变化。结果 去势芝麻油替代组内侧隔核 (MS)、斜角带垂直支 (vDB)NOS阳性神经元数明显多于假手术组 (P <0 .0 5 ) ;去势 2 4h或 2w行雄激素替代MS和vDBNOS阳性神经元数少于假手术组水平 (P <0 .0 5、P <0 .0 1) ,但去势芝麻油替代或雄激素替代对斜角带水平支 (hDB)的NOS阳性神经元数影响不大 (P >0 .0 5 )。去势芝麻油替代或雄激素替代 ,Nestin阳性神经数的变化趋势与NOS阳性神经元的相似。结论 去睾丸行雄激素替代 ,可选择性地使基底前脑的NOS、Nestin阳性神经元数明显下降 ,但与替代的时程关系不大 ,提示雄激素可能通过其受体下调NOS和Nestin的表达。

雄性大鼠去势后基底前脑NOS及Nestin阳性神经元的变化

目的 探讨睾丸源性雄激素对基底前脑一氧化氮合酶 (NOS)及巢蛋白 (Nestin)阳性神经元的影响 ,为阐明基底前脑的功能提供资料。方法 将 16只成年健康雄性SD大鼠随机分为去势组和对照组 ,2周后用组织化学及免疫组织化学染色方法观察基底前脑的内侧隔核 (MS)、斜角带垂直支 (vDB)及水平支 (hDB)的NOS和Nestin阳性神经元的形态和数目变化。结果 与对照组相比较 ,去势组大鼠MS、vDB的NOS阳性神经元数分别明显升高了 37 2 %和 2 9 1% (P <0 0 5 ) ;而且去势组大鼠MS、vDB的Nestin阳性神经元数升高更明显 ,分别达 6 8 2 %和 5 6 9% (P <0 0 5 ) ,但去势组大鼠hDB的NOS和Nestin阳性神经元数均升高不明显 (P >0 0 5 )。去势组与对照组大鼠的NOS和Nestin阳性神经元的形态均相似。结论 雄性大鼠去势后可选择性地使基底前脑各亚区的NOS、Nestin阳性神经元数升高 ,但不影响神经元的形态 ,这可能与神经元的表达摆脱了睾丸源性雄激素的抑制作用有关。

人胎胃壁内NOS阳性神经元发育的研究

研究用 NADPH- d组织化学法对第 3个月胎龄至足月人胎胃壁内 NOS阳性神经元的分化、迁移和生长发育进行了观察。结果表明 :第 5个月龄时 ,肌层神经节处的圆形细胞出现一氧化氮合酶 (nitric oxide synthase,NOS)阳性反应。第6个月龄时 ,NOS阳性细胞分化演变成 NOS阳性神经细胞 ,细胞呈圆形或椭圆形 ,核大 ,细胞质极少 ,由细胞发出短小的突起。有部分 NOS阳性细胞分化演变成梭形的 NOS阳性神经细胞 ,呈条索状排列向粘膜下层延伸 ,有的到达粘膜层 ,在粘膜层形成网状结构。第 7个月龄时 ,神经元细胞明显增大、细胞质增多、染色加深 ,在肌层形成神经节 ,神经节细胞突起投射到整个肌层。第 8～ 10个月龄时 ,肌层和粘膜下层神经元日趋成熟 ,细胞质增多 ,染色强度加深 ,肌层神经纤维分布密度增加 ,大多数神经纤维增粗 ,有的呈弹簧样弯曲 ,其走向与肌纤维长轴平行。结果提示 :人胎胃壁内 NOS阳性神经元来源于胚胎早期肌层神经节处的圆形细胞 ,通过分化、生长发育形成成熟的

人胎舌内NOS阳性神经元发育的免疫组化观察

目的：探讨人胎舌内NOS阳性神经元的发育规律。方法：免疫组织化学方法。结果：第3～4个月龄时，在舌肌和舌粘膜固有层可见到胞体较小，淡染的NOS阳性神经元，分布稀疏。第6～8个月龄时，舌肌组织中NOS阳性神经元数目明显增多，胞体略大，核大，胞质极少。第9～10个月龄时，舌枯膜固有层和舌肌组织内NOS阳性神经元胞体明显增大，细胞质也相应增多，舌肌组织中可见小的NOS阳性神经节分布。结论：舌内NOS阳性神经元的发育与舌粘膜和舌肌的发育密切相关。

高频刺激丘脑底核对帕金森病大鼠模型纹状体NOS阳性神经元的影响

目的观察高频刺激丘脑底核对帕金森病(PD)大鼠纹状体中NOS阳性神经元的影响,以探求其作用机制。方法应用6OHDA制备偏侧PD大鼠模型,丘脑底核区埋入刺激电极进行电刺激,采用组织化学方法观察纹状体中NOS阳性神经元的变化。结果PD大鼠纹状体中NOS阳性神经元数与正常大鼠相比明显增加(P<0.01),经电刺激后PD大鼠纹状体NOS阳性神经元数量明显减少,且与正常大鼠相比无显著性差异。结论高频电刺激丘脑底核治疗PD的机制之一可能是与其抑制纹状体NO的过度释放有关。

脑创伤与缺血后大鼠脑内NOS阳性细胞变化和神经元损害的形态学观察

脑创伤与缺血后大鼠脑内ＮＯＳ阳性细胞变化和神经元损害的形态学观察李红丽蔡文琴（第三军医大学组胚教研室）本实验应用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学技术结合尼氏染色观察了大鼠皮层针刺损伤及全脑缺血／再灌注术后皮层、海马及下丘脑室旁核等敏感区域神经元受损与ＮＯＳ阳性...

视神经不完全损伤后Long Evans大鼠视网膜神经元凋亡的实验研究

目的观察视神经不完全损伤后Long Evans大鼠视网膜神经元凋亡的情况，方法用大鼠视神经钳夹伤模型，于伤后1、3、5、7、14d通过未端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素化dUTP缺口未端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end-labllingTUNEL)检测视网膜神经元的凋亡，结果视神经钳夹伤后7d视网膜出现TUNEL阳性细胞，14d视网膜TUNEL阳性细胞明显增多。结论视神经不完全损伤后存在视网膜神经元的凋亡征象，是，导致视神经不完全损伤后视网膜神经节细胞及内、外核层视神经元死亡的重要方式之一。