视黄酸受体β在针灸提高脑损伤幼鼠运动功能中的作用

目的:本实验以围生期缺血缺氧性脑损伤幼鼠为模型,采用电针灸干预,从神经再生的角度入手,探讨视黄酸受体β在电针灸对于脑损伤幼鼠运动功能恢复中的作用。方法:首先建立围生期缺血缺氧性脑损伤幼鼠模型,共分3组:假手术组、缺血缺氧性脑损伤组和脑损伤后针灸组。采用电针灸仪针刺百会穴和大椎穴2周,在21天对幼鼠的运动功能进行评价。通过免疫组化法和免疫印记法检测视黄酸受体β(RARβ)在大鼠脑内定量定位的表达变化。结果:①生后21天进行的神经行为学评定表明,缺血缺氧性脑损伤削弱了幼鼠的运动功能,而2周的电针灸使其运动功能得到改善(P<0.05)。②免疫组化和免疫印迹结果显示:脑损伤后RARβ表达明显降低,而电针灸后RARβ表达升高(P<0.05)。结论:2周的电针灸提高了缺血缺氧性脑损伤幼鼠的运动功能。RARβ表达的变化从新的角度解释了电针灸有益于脑损伤幼鼠康复的神经再生机制。

维生素C对视黄酸受体β基因的调控

采用半定量RT-PCR方法,研究了在体外培养的猪成纤维细胞内添加不同浓度的维生素C后,视黄酸受体β基因(RARβ)的表达变化情况。结果表明,维生素C能够促进RARβ基因的表达,而且不同浓度和不同作用时间对RARβ基因的表达影响效果不同。

结直肠癌组织中核受体视黄酸X受体a及核受体相互作用蛋白1的表达与预后的关系

目的分析结直肠癌组织中核受体视黄酸X受体a(RXRA)、核受体相互作用蛋白1(NRIP1)表达与患者临床病理特征、预后的关系。方法将2018年8月—2020年8月本院收治的106例结直肠癌患者手术过程中取得的癌组织标本纳入结直肠癌组(n=106),对应癌旁组织标本纳入癌旁组(n=106)。应用免疫组化法检测RXRA、NRIP1表达情况。采用多因素Cox回归分析探讨RXRA、NRIP1表达对结直肠癌患者预后的影响。结果结直肠癌组RXRA、NRIP1的阳性表达率分别为66.04%、69.81%,高于癌旁组的33.96%、30.19%,差异均有统计学意义(P<0.05)。病理分期为Ⅲ期、低分化、有浆膜浸润、有淋巴结转移患者的RXRA阳性表达率、NRIP1阳性表达率高于病理分期为Ⅱ期、中高分化、无浆膜浸润、无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。病理分期为Ⅱ期、低分化、无浆膜浸润、无淋巴结转移、RXRA阴性、NRIP1阴性患者的3年总生存率高于病理分期为Ⅲ期、中高分化、有浆膜浸润、有淋巴结转移、RXRA阳性、NRIP1阳性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,有浆膜浸润(HR=2.687,95%CI:1.531~3.156)、RXRA阳性(HR=3.743,95%CI:2.217~5.992)和NRIP1阳性(HR=2.641,95%CI:1.124~4.757)是结直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。结论RXRA、NRIP1在结直肠癌中呈高表达,与肿瘤分期、分化及转移密切相关,可作为辅助评估患者预后的生物标记物。

视黄酸受体在脐血淋巴细胞抗体生成中的作用

目的 : 研究视黄酸 (RA)促进脐血淋巴细胞 (CBL )抗体生成的作用机制。方法 : 对脐血标本进行血清维生素 A(VA)浓度测定 ,采用 RT- PCR法检测 CBL中视黄酸受体 -α(RAR-α)的基因表达水平 ,并采用 ELISA法检测细胞培养上清液中 Ig M含量。结果 : 脐血血清 VA水平与未培养 CBL中 RAR- α的基因表达水平之间存在正相关 :r=0 .50 (P<0 .0 1 ) ;RA增加金黄色葡萄球菌 Cowan 株 (SAC)活化 CBL的 Ig M生成能力 (P<0 .0 0 1 ) ;RA上调 SAC活化 CBL中RAR- α的基因表达水平 (P<0 .0 0 1 ) ;RA使 RAR- α基因表达的上调幅度与 RA使 Ig M生成的上调幅度之间存在正相关 :r=0 .40 (P<0 .0 5)。结论 : RA对

法洛四联症患儿类视黄酸受体α基因启动子区序列分析

目的对法洛四联症(TOF)患儿类视黄酸受体α(RXRA)基因启动子区序列进行分析,探讨RXRA基因变异与TOF的关联性。方法采取病例对照研究方法,以2007年4月至2012年12月心导管检查及外科手术证实为TOF患儿为TOF组,以同时期年龄和性别与TOF组匹配的健康儿童为对照组。采集静脉血,提取基因组DNA,PCR扩增RXRA基因转录起始位点(TSS)上游1417bp的启动子区序列,扩增产物采用ABI Prism Bigdye系统进行测序。结果 TOF组纳入213例(男135例,女78例),平均年龄1.8岁;对照组纳入500名(男310名,女190名),平均年龄2.5岁。①RXRA基因TSS上游1191bp处检测出1个杂合突变,即-1191A>AG(TSS定为+1);检测出3个新发SNP,即-1287C>CT、-800C>CA及-760C>CT。②利用http://www.cbrc.jp/research/db/TFSEARCH.html网站进行分析,发现在该4个位点及其附近有多个转录因子结合位点。-1191A>AG导致新的CpG位点产生,-800C>CA导致原有CpG位点消失。这些新产生的CpG位点的甲基化可能会影响转录因子的结合,从而影响RXRA基因转录水平,进一步导致RXRA蛋白水平的变化。结论 TOF患儿RXRA基因启动子区序列变化可能通过影响RXRA表达水平而导致TOF的发生。

视黄酸受体反应蛋白、C反应蛋白水平与2型糖尿病下肢血管病变关系的研究

目的探讨视黄酸受体反应蛋白(chemerin)、C反应蛋白(CRP)水平与2型糖尿病(T2DM)下肢血管病变的关系。方法选取T2DM患者80例,根据有无下肢血管病变及病变程度不同分为4组:单纯2型糖尿病无下肢动脉血管病变组20例(1组),合并轻度下肢血管病变组20例(2组),合并中度下肢血管病变组20例(3组),合并重度下肢动脉血管病变组20例(4组)。另外选取体检健康者20例作为对照组(0组)。用酶联免疫法检测各组受试者血浆chemerin,免疫比浊法测CRP水平,并分析血浆chemerin、CRP水平与糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等的关系。结果 1组、2组、3组、4组患者血浆chemerin、CRP水平显著高于0组,且升高程度与下肢动脉血管病变程度相关(P<0.05)。T2DM患者血浆chemerin、CRP水平与HbA1c、HOMA-IR呈正相关关系(P<0.05)。结论 T2DM患者血浆chemerin、CRP水平升高可能与T2DM下肢动脉粥样硬化的发生发展有关。

乳腺癌视黄酸受体的研究进展

乳腺癌视黄酸受体的研究进展余黎明邵志敏蔡三军韩企夏沈镇宙（上海医科大学附属肿瘤医院外科，上海２０００３２）１３４维生素Ａ族化合物包括维生素Ａ及其衍生物，它们在细胞的形态发生、生长、分化过程中起着重要作用，近年已用于肿瘤的化学预防及分化治疗。一般此族化...

人胎盘间充质干细胞对呼吸道合胞病毒致毛细支气管炎大鼠肺组织视黄酸受体相关孤核受体γt基因的调控及意义

目的研究人胎盘间充质干细胞（hpMSCs）对呼吸道合胞病毒（RSV）致毛细支气管炎大鼠肺组织中视黄酸受体相关孤核受体γt（RORγt）的调控及其意义。方法将36只sD幼鼠随机分为正常对照组、RSV致毛细支气管炎组（RSV组）和hpMSCs组，每组12只。RSV组和hpMSCs组均采用RSV滴鼻法建立毛细支气管炎动物模型，hpMSCs组接种病毒后向大鼠尾静脉内注射hpMSCs进行干细胞移植治疗，正常对照组不制作模型。观察3组肺组织病理学变化；应用酶联免疫吸附试验检测血浆白细胞介素17（IL-17）、IL-23的含量；采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组外周血单个核细胞（PBMC）及肺组织中RORγtmRNA的水平；采用蛋白质印迹法检测3组肺组织中RORγt蛋白的表达。结果RSV组大鼠肺组织肺间质炎症明显，肺泡间隔增宽，肺泡腔变小，有大量嗜酸粒细胞、淋巴细胞浸润；与RSV组相比，hpMSCs组肺间质炎症明显减轻，肺泡腔相对增大，炎性细胞浸润减少；正常对照组大鼠肺组织无炎性改变。RSV组血浆IL-17、IL-23含量高于正常对照组[（56±6）ng／L比（27±4）ng／L、（61±5）ng／L比（19±3）ng／L]（P〈0．05）；hpMSCs组IL-17、IL-23含量[（30±4）ng／L、（40±6）ng／L]低于RSV组（P〈0．05）。RSV组大鼠PBMC及肺组织中RORTγt mRNA表达水平均高于正常对照组（PBMC：11．4±1．1比1．0±0．0，肺组织：8．1±0．7比1．0±0．0）（P〈0．05）；hpMSCs组PBMC及肺组织中RORγtmRNA表达水平（PBMC：4．4±0．7．肺组织：3．4±0．5）均低于RSV组（均P〈0．05）。RSV组肺组织中RORγt蛋白的表达水平高于正常对照组（1．26±0．12比0．72±0．12）（P〈0．05）；hpMSCs组肺组织中RORγt蛋白表达水平（0．88±0．14）低于RSV组（P〈0．05）。结论hpMSCs可以下调RSV致毛细支气管炎大鼠肺组织中特异性转录因子RORγt及相关细胞因子的表达水平，对减轻气道炎症有重要意义。

视黄酸X受体α促进猪前体脂肪细胞分化

采用细胞转染、油红O染色、油红O染色提取法、GPDH活性测定、semi-qRT-PCR等方法研究了视黄酸X受体α(retinoic acid X receptorα,RXRα)在猪原代前体脂肪细胞分化中的作用及其机理.结果表明,转染pRXRα-EGFP促进了猪前体脂肪细胞RXRα的表达,脂肪细胞分化能力随之增强,脂肪细胞GPDH活性、分化转录因子PPARγ和C/EBPα mRNA表达水平均显著升高(P<0.05).结果提示,RXRα可能通过调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPARγ)和CAAT/增强子结合蛋白家族(CCAAT/enhancer binding proteins,C/EBP)C/EBPα基因表达变化促进猪前体脂肪细胞分化.

视黄酸受体RARs和RXRs在hBMSCs成骨分化调控过程中的功能差异

目的探讨视黄酸受体RARs和RXRs对h BMSCs成骨分化的影响及机制。方法 h BMSCs体外培养并诱导成骨分化,茜素红和油红O染色检测诱导14 d细胞成骨与成脂分化状态;qRT-PCR及免疫印迹技术检测成骨成脂标志基因以及相关信号通路基因的表达水平。结果 RARs激动剂ATRA、9CRA和TTNPB上调成骨标志基因RUNX2、OSX及OCN的表达,但下调ALPL和I型胶原的表达并抑制钙化,RARs对钙化的抑制可能与其上调TGFβ/SMAD信号通路有关;RXRs激动剂SR11237对成骨分化无明显影响,但可在成骨诱导环境下上调成脂转录因子CEBPB、CEBPA和PPARG的表达,诱导细胞分化为脂肪细胞。结论 RARs诱导h BMSCs成骨分化但抑制钙化过程,RXRs诱导细胞成脂分化,对成骨分化无明显作用。

鲈鱼视黄酸受体α和视黄酸受体γ cDNA克隆和基因表达分析

本文旨在研究鲈鱼视黄酸受体α(RARα)和视黄酸受体γ(RARγ)的结构及其基因的组织表达特点。采用反转录PCR和cDNA末端快速克隆(RACE)技术,从鲈鱼肝脏中克隆得到RARα和RARγ全长cDNA序列。检测鲈鱼肝脏、肌肉、心脏、眼、肠、肾脏、脂肪、脾脏、鳃和大脑10个组织中RARα和RARγ基因的表达情况。结果表明:1)鲈鱼RARαcDNA全长2 094 bp,5'端和3'端的非翻译区分别为124和608 bp,开放阅读框为1 362 bp,推测编码453个氨基酸,分子质量为50.64 ku,理论等电点为8.20。2)RARγcDNA全长1 671 bp,其中包括36 bp的5'端非翻译区、129 bp的3'端的非翻译区和1 506 bp的开放阅读框,共编码501个氨基酸,分子质量为56.20 ku,理论等电点为4.96。3)鲈鱼RARα和RARγ都具有典型的核受体结构,两者氨基酸序列同源性高达63.1%。鲈鱼的RARα和RARγ与红鳍东方鲀有较高的同源性,分别为96.9%和95.2%。4)RARα和RARγ基因在所有检测组织中均有表达,其中RARα基因在心脏和大脑中表达较少,在眼、鳃和肠中表达较高,而RARγ基因仅在鳃和脾脏中有较高表达。总之,本试验成功克隆了鲈鱼RARα和RARγ的全长cDNA;鲈鱼RARα和RARγ有着典型的核受体结构,在各组织中广泛分布。

沉默视黄酸核受体α损伤大鼠原代海马神经元的钙兴奋性

目的:了解视黄酸核受体α(RARα)对大鼠神经元功能的必要性。方法:采用组织消化原代贴壁法分离培养大鼠原代海马神经元,利用腺病毒载体特异沉默RARα;利用Real-Time PCR分析沉默RARα对神经元视黄酸(RA)信号各受体以及神经细胞标志物的影响;利用活细胞钙影像分析沉默RARα对神经元钙兴奋性的影响。结果:免疫荧光显示,分离培养的细胞90%表达神经元标志神经元特异性烯醇化酶(NSE),腺病毒转染效率可达80%。PCR结果显示,RARα沉默后RARα表达降低75%(P<0.01),其他受体均显著降低(P<0.01),但RARβ显著上调(P<0.05)。活细胞钙影像显示,沉默组钙兴奋性显著降低(P<0.05),全反式视黄酸(ATRA)预处理24h能显著增强钙兴奋性(P<0.01)。结论:RARα的缺失能显著降低原代海马神经元的神经元标志物NSE的表达,并显著损伤神经元的钙兴奋性。

视黄酸相关孤儿受体-白介素-23信号通路诱导病理性Th17细胞分化介导血压升高机制研究

目的:探讨视黄酸相关孤儿受体(RORγt)-白介素-23(IL-23)信号通路在病理性辅助性T细胞17(Th17)分化及盐敏感性高血压(SSHT)发病中的免疫机制,揭示RORγt-IL-23R信号通路通过调节Th17细胞的功能在高血压中的作用。方法:收集临床病例共90例,根据盐负荷试验,筛选盐敏感性高血压患者、非盐敏感性高血压患者及正常血压人群健康志愿者。流式细胞技术检测CD_(4)^(+)Th17细胞占辅助性T细胞(CD_(4)^(+)T细胞)的比例。ELISA检测外周血中TH17分泌白介素-17A(IL-17A)比例。检测正常环境、不同浓度NaCl(10、20、40、80 mmol/L)下人初始CD_(4)^(+)T细胞中Th17细胞比例及外周血中IL-17A比例,40 mmol/L NaCl下CD_(4)^(+)T细胞加入RORγt拮抗剂、IL-23R拮抗剂后测Th17细胞比例。结果:盐敏感性高血压组CD_(4)^(+)Th17细胞占CD_(4)^(+)T细胞的比例明显高于健康志愿者组。不同浓度NaCl培养人初始CD_(4)^(+)T细胞,CD_(4)^(+)Th17细胞占CD_(4)^(+)T细胞的比例均高于健康志愿者组,并且随着NaCl浓度增高,CD_(4)^(+)Th17细胞占CD_(4)^(+)T细胞的比例逐渐增高。高浓度NaCl培养基下CD_(4)^(+)T细胞中分别加入RORγt拮抗剂、IL-23R拮抗剂,CD_(4)^(+)Th17细胞占CD_(4)^(+)T细胞的比例均较40 mmol/L NaCl培养人初始CD_(4)^(+)T细胞组CD_(4)^(+)Th17细胞占CD_(4)^(+)T细胞的比例降低。结论:TH17细胞引起的免疫反应参与了高血压的进程,促进SSHT的发生。RORγt-IL-23R信号通路可诱导病理性Th17细胞分化从而导致SSHT的发生。

褪黑素通过视黄酸相关孤儿受体α可抑制骨髓间充质干细胞的成脂肪分化

背景:前期研究发现,褪黑素能够抑制骨髓间充质干细胞向脂肪细胞诱导分化,但其作用机制有待进一步研究。目的:探索褪黑素是否通过核受体视黄酸相关孤儿受体α介导抑制骨髓间充质干细胞向脂肪细胞诱导分化的作用机制。方法:无菌采集骨髓样本,采用密度梯度离心结合贴壁培养分离培养人骨髓间充质干细胞,用流式细胞仪鉴定细胞表面表型。然后将细胞分为褪黑素组、CGP52608组和对照组,分别以含褪黑素、CGP52608脂肪维持液和正常的脂肪诱导液进行诱导,用荧光定量PCR和Western blot法检测核受体视黄酸相关孤儿受体α在骨髓间充质干细胞以及其成脂肪分化过程中的表达特征。用受体特异性激活剂CGP52608,考察核受体视黄酸相关孤儿受体α激活状态下,骨髓间充质干细胞成脂肪分化的影响。结果与结论:原代分离的骨髓间充质干细胞生长旺盛,呈纤维梭状,流式鉴定间充质干细胞表型结果示,CD34和CD45表达阴性,CD29,CD44与CD105表达阳性。荧光定量PCR发现骨髓间充质干细胞高表达褪黑素核受体视黄酸相关孤儿受体α,而且褪黑素能够呈浓度依赖性促进骨髓间充质干细胞表达视黄酸相关孤儿受体α;Western blot检测结果也证实褪黑素呈浓度依赖性促进视黄酸相关孤儿受体α在蛋白水平的表达。在成脂肪分化过程中,褪黑素在早期明显上调视黄酸相关孤儿受体α表达,但在中后期就维持在相对低水平。最后,用CGP52608激活视黄酸相关孤儿受体α后,骨髓间充质干细胞成脂肪分化被抑制。因此,褪黑素通过核受体视黄酸相关孤儿受体α抑制骨髓间充质干细胞成脂肪分化,褪黑素在调节脂肪细胞分化过程中发挥重要作用。

视黄酸受体拮抗剂对脐血淋巴细胞免疫球蛋白M生成的作用

目的通过采用视黄酸受体(RARα)选择性拮抗剂Ro41-5253(Ro)进行阻抑实验,以进一步明确视黄酸(RA)对脐血淋巴细胞IgM生成的促进作用是否通过RARα途径调节。方法分离脐血淋巴细胞进行体外培养,在丝裂原SAC活化的同时,加入RARα激活剂RA或(和)受体拮抗剂Ro。检测培养24 h和48 h的细胞RARα,IL-4I、L-6的基因转录水平及培养d5上清中IgM的质量浓度。结果Ro能拮抗视黄酸对脐血淋巴细胞IgM生成的促进作用;同时视黄酸对RARα基因转录水平的上调也被拮抗剂Ro抑制;Ro拮抗视黄酸对两种细胞因子基因转录水平的上调。结论视黄酸对脐血淋巴细胞IgM生成的促进作用是通过RARα受体途径来调控的。

视黄酸受体的分子生物学

本文主要介绍了视黄酸受体RAR和视黄醇类物质-X受体RXR这两类视黄酸受体的异构体组成、染色体定位、基因及蛋白结构、组织特异性表达等情况。另外,对视黄酸受体介导的转录调控发生机制也作了简要介绍,对该机制的深入研究将有助于人们有效地利用视黄酸攻克肿瘤、治疗癌症以及其他免疫性缺陷病,具有广阔的应用前景。

β视黄酸受体与宫颈癌的研究进展

β视黄酸受体(retinoic acid receptorβ,RARβ)是细胞核受体超家族成员之一,可作为转录因子影响靶基因表达,抑制肿瘤细胞生长,诱导细胞分化。RARβ的分布以脑和生殖系统为主,宫颈组织中RARβ基因表达降低或缺失将导致宫颈癌发生可能性增加。本文主要综述RARβ在宫颈癌发生发展、早期诊断中的重要价值。

胃癌细胞中视黄酸受体抑制AP-1活性的不同方式

研究胃癌细胞中视黄酸受体RARα和RARβ抑制活化蛋白 1(activatorprotein 1,AP 1)活性的不同方式及其与全反式视黄酸 (ATRA)作用的相关性 .瞬时转染RARβ表达载体到MKN 4 5细胞后 ,佛波脂 (TPA)诱导的AP 1活性受到明显抑制 ,且与RARβ浓度正相关 ,与ATRA存在与否无关 ;相反 ,RARα转染细胞后 ,对TPA诱导的AP 1活性的抑制不仅与RARα的浓度相关 ,而且依赖于AT RA .凝胶阻抑测定表明 ,TPA可以显著加强AP 1结合活性 ,当ATRA处理不表达RARβ和低表达RARα的MKN 4 5细胞后 ,AP 1结合活性不受影响 ;然而 ,表达RARα和RARβ的BGC 82 3细胞经AT RA处理后 ,TPA诱导的AP 1结合活性则受到抑制 .另外 ,分析与抗AP 1活性相关的RARβ功能区表明 ,DNA结合区的缺失导致RARβ抑制AP 1活性作用的丧失 ,而配体结合区对于RARβ抑制AP 1活性则是非必需的 .以上结果证实 ,有胃癌细胞中 ,RARβ可能是AP 1活性的抑制因子 ,RARα则可能是ATRA作用的靶向 .尽管它们的作用方式有所不同 ,但最终都可以通过抑制AP

维生素C对视黄酸受体γ基因作用的初探

采用半定量RT-PCR方法研究在体外培养的猪成纤维细胞内添加不同浓度维生素C后视黄酸受体γ基因(RARγ)的表达变化情况。结果表明:维生素C可显著抑制RARγ基因的表达,但是不同浓度组间差异不显著。