莪连颗粒对胃癌种植瘤裸鼠肿瘤生长及维甲酸相关孤核受体γt表达的影响

目的:探讨莪连颗粒对胃癌种植瘤裸鼠肿瘤生长及维甲酸相关孤核受体γt(retinoid-related orphan nuclear receptorγt,RORγt)表达的影响。方法:构建裸鼠人胃癌SGC-7901种植瘤模型,实验组予莪连颗粒灌胃,对照组予生理盐水灌胃。灌胃28天后处死小鼠并测定种植瘤体积及瘤重,计算抑瘤率。采用Western-Blot法检测肿瘤组织中RORγt表达。结果:实验组小鼠瘤重及肿瘤体积均低于对照组,抑瘤率为53.3%;实验组肿瘤组织RORγt表达较对照组减少。结论:莪连颗粒可抑制胃癌肿瘤生长,该作用可能与其抑制RORγt表达,减轻由辅助性T细胞17介导的免疫调节有关。

人胎盘间充质干细胞对呼吸道合胞病毒致毛细支气管炎大鼠肺组织视黄酸受体相关孤核受体γt基因的调控及意义

目的研究人胎盘间充质干细胞（hpMSCs）对呼吸道合胞病毒（RSV）致毛细支气管炎大鼠肺组织中视黄酸受体相关孤核受体γt（RORγt）的调控及其意义。方法将36只sD幼鼠随机分为正常对照组、RSV致毛细支气管炎组（RSV组）和hpMSCs组，每组12只。RSV组和hpMSCs组均采用RSV滴鼻法建立毛细支气管炎动物模型，hpMSCs组接种病毒后向大鼠尾静脉内注射hpMSCs进行干细胞移植治疗，正常对照组不制作模型。观察3组肺组织病理学变化；应用酶联免疫吸附试验检测血浆白细胞介素17（IL-17）、IL-23的含量；采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组外周血单个核细胞（PBMC）及肺组织中RORγtmRNA的水平；采用蛋白质印迹法检测3组肺组织中RORγt蛋白的表达。结果RSV组大鼠肺组织肺间质炎症明显，肺泡间隔增宽，肺泡腔变小，有大量嗜酸粒细胞、淋巴细胞浸润；与RSV组相比，hpMSCs组肺间质炎症明显减轻，肺泡腔相对增大，炎性细胞浸润减少；正常对照组大鼠肺组织无炎性改变。RSV组血浆IL-17、IL-23含量高于正常对照组[（56±6）ng／L比（27±4）ng／L、（61±5）ng／L比（19±3）ng／L]（P〈0．05）；hpMSCs组IL-17、IL-23含量[（30±4）ng／L、（40±6）ng／L]低于RSV组（P〈0．05）。RSV组大鼠PBMC及肺组织中RORTγt mRNA表达水平均高于正常对照组（PBMC：11．4±1．1比1．0±0．0，肺组织：8．1±0．7比1．0±0．0）（P〈0．05）；hpMSCs组PBMC及肺组织中RORγtmRNA表达水平（PBMC：4．4±0．7．肺组织：3．4±0．5）均低于RSV组（均P〈0．05）。RSV组肺组织中RORγt蛋白的表达水平高于正常对照组（1．26±0．12比0．72±0．12）（P〈0．05）；hpMSCs组肺组织中RORγt蛋白表达水平（0．88±0．14）低于RSV组（P〈0．05）。结论hpMSCs可以下调RSV致毛细支气管炎大鼠肺组织中特异性转录因子RORγt及相关细胞因子的表达水平，对减轻气道炎症有重要意义。

乙型肝炎肝硬化患者辅助性T淋巴细胞17和调节性T淋巴细胞及维甲酸相关核孤儿受体γt和叉状头/翅膀状螺旋转录因子3 mRNA表达水平的变化及其临床意义研究

目的通过对乙型肝炎肝硬化患者外周血辅助性T淋巴细胞17(Th17)、调节性T淋巴细胞(Treg)及其特异性转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)和叉状头/翅膀状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA表达水平的检测探讨其临床意义。方法选取2015年7—12月昆明医科大学第一附属医院诊治的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者64例,其中慢性乙型肝炎(CHB)患者21例(CHB组)、代偿期肝硬化(CLC)患者21例(CLC组)、失代偿期肝硬化(DCLC)患者22例(DCLC组)。同期选取本院体检健康者20例为对照组。收集研究对象一般资料〔性别、年龄及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)〕;应用流式细胞术检测研究对象外周血Th17、Treg表达率,计算Th17/Treg比值;应用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-q PCR)法测定外周血RORγt、Foxp3 mRNA表达水平。结果 4组年龄、ALT、AST、TBIL比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CHB组、CLC组、DCLC组Th17、Treg表达率及Th17/Treg比值均高于对照组(P<0.05);DCLC组Th17、Treg表达率及Th17/Treg比值均高于CHB组,Th17表达率及Th17/Treg比值均高于CLC组(P<0.05)。CHB组、CLC组、DCLC组RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05);DCLC组RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平均高于CHB组、CLC组(P<0.05)。CHB组、CLC组、DCLC组外周血Th17表达率与RORγt mRNA表达水平均呈正相关(P<0.05);CHB组、CLC组、DCLC组外周血Treg表达率与Foxp3 mRNA表达水平均呈正相关(P<0.05);CHB组、CLC组、DCLC组外周血Th17表达率、RORγt mRNA表达水平与ALT呈正相关(P<0.05);CHB组外周血Foxp3mRNA表达水平与ALT呈正相关(P<0.05);CHB组RORγt mRNA表达水平、Foxp3 mRNA表达水平与AST、TBIL呈正相关(P<0.05)。结论 Th17、Treg及其特异性转录因子RORγt、Foxp3可能与乙型肝炎肝硬化患者的疾病进展与肝功能有关。

白细胞介素-17和维甲酸相关核孤儿受体γt在小鼠真菌性角膜炎中的表达

背景CD4＋效应T细胞（Th1／Th2）的平衡模式以往常用于解释真菌感染性疾病的免疫机制。近年来发现，除Th1和Th2细胞亚群外，Th17细胞亚群也参与抗真菌感染的免疫应答，但其在真菌性角膜炎中的作用却鲜有研究。目的探讨白细胞介素-17（IL-17）及Th17特异性转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt（RORγt）在真菌性角膜炎中的表达变化及其意义。方法将清洁级BALB／c小鼠96只按随机数字表法随机分为真菌性角膜炎模型组和损伤对照组，真菌性角膜炎模型组小鼠采用角膜表面镜术辅助上皮刮除并层间注入1×10^6CFU／ml真菌菌液5μl法建立小鼠茄病镰刀菌性角膜炎模型，损伤对照组在角膜表面镜术辅助上皮刮除后层间注入等体积（5111）的PBS液。采用质量分数10％KOH湿片法检查菌丝，部分用接种法进行真菌培养并鉴定菌种，另一部分进行细菌培养以排除细菌污染。于造模后第1、3、5、7天在裂隙灯显微镜下观察小鼠角膜炎症的变化特点，参照Wu和Hu的方法对角膜炎症进行评分。分别于造模后第1、3、5、7天处死小鼠并获取角膜组织行苏木精一伊红染色，观察角膜组织的病理改变。采用real—timePCR技术检测IL-17mRNA及其特异性转录因子RORγtmRNA的表达水平，并用ELISA法检测IL-17蛋白在角膜组织中的表达。结果造模后第1、3、5、7天角膜的炎症评分分别为（3．2±0．8）、（6．6±1．1）、（9．4±1．1）、（6．8±0．8）分，差异有统计学意义（F=89．786，P=0．010），其中第3天和第7天角膜炎症评分明显高于第1天，但低于第5天，差异均有统计学意义（P〈0．05）；角膜的组织病理学检测炎性细胞浸润情况与角膜炎症评分变化趋势一致。造模后第3、5、7天，IL-17mRNA在真菌性角膜炎模型组小鼠角膜的表达分别为4．12±0．73、20．72±1．81、14．16±1．88，高于损伤对照组的0．35±0．17、0．28±0．09、0．22±0．09，差异均有统计学意义（P〈0．01），且组内比较第5天时表达量高于第1、3、7天值，差异有统计学意义（P〈0．01），真菌性角膜炎模型组IL-17蛋白在造模后第1、3、5、7天的表达量均明显高于损伤对照组，差异均有统计学意义（P〈0．叭）。真菌性角膜炎模型组各时间点RORγt mRNA在角膜组织中的表达变化与IL-17mRNA的表达趋势一致（P〈0．01）。结论IL-17及其特异性转录因子RORγt在真菌性角膜炎局部组织中的表达量均上调，其表达量变化的趋势与其炎症反应程度相关，推测Th17在真菌性角膜炎的免疫反应中发挥重要作用。

维甲酸相关孤核受体α与Wnt信号途径及肿瘤的关系

维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα)是核受体超家族中的一员,广泛分布于机体各组织,具有多种重要的生理功能。近年来,RORα与肿瘤的关系受到越来越多的关注,RORα在肿瘤发生中的作用是目前研究的热点之一。研究表明:RORα的表达下调可能与肿瘤的发生有关,RORα的磷酸化可能会通过削弱Wnt/β-catenin信号转导途径的功能而对肿瘤的发生产生抑制作用。RORα具有重要的抗肿瘤作用,是肿瘤治疗的一个可能的潜在靶点。本文就RORα与Wnt信号转导途径及肿瘤的关系做一综述,分析RORα在肿瘤发生中的主要作用及作用机制。

维甲酸相关核孤儿受体γt和4-1BB/4-1BBL在口腔扁平苔藓中的表达及意义

目的研究口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血中维甲酸相关核孤儿受体γ(tRORγt)和4-1BB/4-1BBL mRNA的表达。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测30例OLP患者和30例健康人外周血中RORγt和4-1BB/4-1BBL的基因表达水平。结果在OLP患者中,RORγt、4-1BB、4-1BBL mRNA的表达水平显著高于对照组(P<0.05),结果经2-ΔΔCT转换后,OLP组3种基因mRNA表达水平分别是健康对照组的3.087、3.320和4.005倍。RORγt和4-1BB mRNA的表达水平无明显相关性(P>0.05),4-1BB和4-1BBL mRNA表达水平呈正相关(r=0.455 0,P<0.05)。结论RORγt和4-1BB/4-1BBL在OLP的发病中起了一定作用。

维甲酸相关孤核受体α抵抗小鼠压力负荷型心肌损伤的作用及机制研究

目的探究维甲酸相关孤核受体α(RORα)在小鼠压力负荷引起的心肌损伤中的具体作用。方法通过小鼠主动脉弓缩窄手术(TAC)后8周建立压力负荷型心肌损伤模型。实验小鼠分为以下4组:假手术(Sham)+空载病毒(null)处理组(Sham+null组)、Sham+心肌特异性过表达RORα病毒处理组(Sham+RORα组)、TAC+null组、TAC+RORα组。TAC后8周检测心肌RORα表达水平;心脏收缩功能;心肌纤维化指标包括心肌血管周纤维化百分比、组织间隙纤维化百分比、结缔组织生长因子(CTGF)、I型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达水平;心肌肥厚指标包括心脏体重比、心肌细胞平均横截面积、脑钠肽(BNP)表达水平;氧化应激指标包括活性氧(ROS)产量、丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、核因子红系2相关因子2(Nrf2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)表达水平;炎症反应指标包括核因子-κ-基因结合(NF-κB)含量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果与TAC+null组相比,TAC+RORα组小鼠心脏RORα表达水平明显增高;心脏收缩功能显著改善;心肌纤维化指标包括心肌血管周纤维化百分比、组织间隙纤维化百分比、CTGF、CollagenⅠ表达水平显著降低;心肌肥厚指标包括心脏体重比、心肌细胞平均横截面积、BNP表达水平显著降低;氧化应激指标包括心肌ROS生成、MDA含量显著降低,而Nrf2、SOD2表达水平明显增高;炎症反应指标包括心肌NF-κB、TNF-α表达水平显著降低(均P<0.05)。结论心肌特异性过表达RORα处理可通过抑制心肌组织氧化应激和炎症反应、延缓TAC所致的心肌肥厚和心肌纤维化,最终发挥减轻压力负荷型心肌损伤的保护作用。

视黄酸相关孤核受体α对脓毒症小鼠心肌损伤的影响

目的 本研究旨在探索视黄酸相关孤核受体α(RORα)对脓毒症炎症反应及其所致的心脏功能损害影响。方法 通过腹腔注射脂多糖(LPS)建立小鼠脓毒症模型,通过LPS刺激巨噬细胞,建立脓毒症细胞模型,采用细胞转染和小鼠尾静脉注射过表达质粒,以在细胞和组织中过表达RORα,进而探究RORα在脓毒症炎症反应和脓毒症所致心肌损伤中的作用。采用实时定量PCR试验、蛋白免疫印记试验检测RORα、NF-κBp65和炎症因子的变化,采用酶联免疫试验、病理切片等检测脓毒症小鼠心肌损伤的变化。结果 RORα在LPS刺激巨噬细胞中显著降低(P<0.05);过表达RORα能够显著抑制LPS刺激巨噬细胞中炎症因子白介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达(P<0.05)、NF-κBp65的核移位水平(P<0.05)、脓毒症小鼠血清中炎症因子IL-1β和TNF-α的释放、降低脓毒症小鼠肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量以及改善脓毒症所致的心肌病理损害。结论 RORα能够通过抑制NF-κBp65的核移位进而负性调控LPS刺激巨噬细胞中的炎症反应,从而缓解脓毒症小鼠的炎症反应及心肌损害。

视黄酸相关孤儿核受体RORα在脂质代谢调控中的作用

核受体是一类配体依赖的转录因子超家族。视黄酸相关孤儿核受体(retinoid-related orphan nuclear receptors,RORs)由于在基因序列上与视黄酸受体(retinoic acid receptor,RAR)和类维甲酸X受体(retinoid X receptor,RXR)相似而得名。近年来研究陆续发现,核受体RORα不仅在一些代谢组织中表达,而且在脂质代谢,以及动脉粥样硬化的发生发展中扮演关键角色。因此,深入了解RORα与脂质代谢的关系,将为肥胖、2型糖尿病和动脉粥样硬化等疾病提供新的治疗靶点。

肝细胞癌组织中维甲酸相关孤核受体α的表达变化及其意义

目的观察肝细胞癌(HCC)组织中维甲酸相关孤核受体α(RORα)的表达变化,并探讨其临床意义。方法取92例HCC患者,术中获取HCC组织和癌旁正常肝组织各92例份。分别采用免疫组化法及Western blotting法检测HCC组织和癌旁正常肝组织中的RORα、VEGF,分析RORα表达与HCC临床病理参数的关系。结果HCC组织及正常肝组织中RORα阳性分别为31(33.7%)、62(67.3%)例,VEGF阳性分别为74(80.4%)、17(18.5%)例。HCC组织中RORα阳性表达率低于正常肝组织,VEGF阳性表达率高于正常肝组织(P均<0.05)。HCC组织及正常肝组织中RORα相对表达量分别为0.52±0.07、1.70±0.03,VEGF相对表达量分别为1.94±0.08、0.55±0.07。HCC组织中RORα相对表达量低于正常肝组织,VEGF相对表达量高于正常肝组织(P均<0.05)。HCC组织中RORα与VEGF表达无相关性(P>0.05)。RORα阳性表达与HCC患者的年龄、性别、肿瘤直径、临床分期、淋巴结转移情况等无关(P均>0.05)。HCC病理分级为Ⅰ~Ⅱ级者RORα阳性表达比例高于Ⅲ级者(P<0.05)。结论 HCC组织中RORα表达下调,且与HCC的病理分级有关。RORα表达异常可能参与了HCC的发生发展。

二烯丙基二硫对人胃癌细胞维甲酸相关孤核受体α表达的影响

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)处理前后人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体α(RORα)表达变化情况。方法 将胃癌SGC7901、MGC803细胞分为对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养及细胞形态学观察,采用免疫细胞化学、Western blot分析RORα的表达;半定量RT-PCR检测RORα核酸水平的表达。结果 DADS处理24 h后,胃癌SGC7901、MGC803细胞形态学发生明显改变;RORα在人胃癌SGC7901、MGC803细胞核中呈强阳性表达,与对照组比较表达显著上调;半定量RT-PCR灰度扫描定量分析结果显示,DADS处理24 h后,SGC7901、MGC803细胞中RORα的表达量[(1.09±0.01)与(0.97±0.01)]较对照组[(0.45±0.03)与(0.44±0.02)]显著上调,差异均有统计学意义(P<0.01);Western blot分析及灰度扫描显示,DADS处理人胃癌MGC803、SGC7901细胞8、12、24 h后,RORα蛋白表达量较未处理组显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DADS可诱导人胃癌细胞分化,其诱导分化作用可能与上调RORα表达有关。

维甲酸相关孤核受体α(RORα)在奥曲肽抗大鼠肝纤维化中的作用

目的观察奥曲肽(OCT)对实验性肝纤维化大鼠肝组织病理学及肝脏血清学的影响,探究维甲酸相关孤核受体α(RORα)在奥曲肽抗大鼠肝纤维化的作用。方法将36只雄性SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组、OCT组。实验采用四氯化碳(CCl4)建立肝纤维化模型(模型组和OCT组),饲养8周后处死大鼠并随机采集标本,使用HE及VG染色法观察大鼠肝细胞的病理改变;检测大鼠血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、透明质酸(HA)、大鼠层粘连蛋白(LN)、大鼠Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)、大鼠Ⅳ型胶原(COL4)含量;使用Ishak评分系统分析各组肝细胞的炎症活动度及纤维化程度;Western blot法检测肝组织RORα受体的表达情况。结果与对照组比较,模型组和OCT治疗组大鼠肝脏细胞的病理变化程度、肝脏炎症活动度、肝脏纤维化程度、肝脏血清AST、ALT、HA、LN、PⅢNP、COL4含量均显著上升,RORα显著下降(P<0.01)。与模型组比较,OCT治疗组大鼠肝脏细胞的病理变化程度、肝脏炎症活动度、肝脏纤维化程度、肝脏血清AST、ALT、HA、LN、PⅢNP、COL4含量显著下降,RORα下降程度降低(P<0.05)。结论OCT可降低大鼠体内RORα的下降程度,减少肝功能损害及肝纤维化程度,治疗实验性大鼠肝纤维化效果确切。

维甲酸相关孤核受体α抗肝纤维化作用研究进展

肝纤维化是肝脏对各种致病因子（相关肝炎病毒、慢性酒精中毒、脂肪性肝炎等）所致的慢性损伤的一种慢性炎性反应过程，

维甲酸受体相关孤核受体α作为肿瘤治疗潜在靶点的研究进展

维甲酸受体相关孤核受体α(retinoic acid receptor-related orphan nuclear receptorα,RORα)属于核受体甾体激素受体家族成员,其是一种转录因子,在多种生理、病理过程中起着关键的调节作用。近年来,越来越多的证据表明,RORα参与多种恶性肿瘤的发生、发展过程,故被认为是肿瘤治疗的潜在靶点。本文介绍RORα在几种常见肿瘤中的作用及其机制的研究进展,为RORα在肿瘤治疗领域的基础研究和临床转化研究提供参考。

维甲酸相关孤核受体α及其激动剂SR1078的研究进展

在过去的一段时间,一些关于维甲酸相关孤核受体α（retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα）研究迅速增加。RORα在一些病理生理功能中的潜在作用机制,特别是ROR缺陷小鼠和基因表达分析的特性RORα的关键功能,为其各种生理过程的调节提供了解释。RORα进一步参与各种代谢途径的调节,使体内能量平衡。此外，ROR（x调节生物钟几个组件的表达，可能参与生物钟的整合和节奏下游（代谢）基因的表达模式。

维甲酸相关孤核受体α(RORα)在头颈部鳞癌中的表达及意义

目的:观察并探讨维甲酸相关孤核受体α(Retinoid orphan nuclear receptorα,RORα)参与头颈部鳞癌侵袭转移的作用机制。方法:通过免疫组织化学染色检测RORα在头颈部鳞癌组织中的表达;再采用RORα激活剂(SR1078)干预及转染RORαcDNA两种技术手段,激活头颈部鳞癌细胞中RORα的表达,而后观察细胞的体外增殖、迁移及侵袭能力及肿瘤侵袭转移相关因子表达水平的变化。结果:RORα在头颈部鳞癌组织及体外培养的两种头颈部鳞癌细胞株中不表达或仅呈极低表达,而在癌旁正常组织标本中则呈较为恒定的高表达;采用RORα激活剂(SR1078)进行干预处理及转染RORαcDNA两种方法激活头颈部鳞癌细胞株中RORα表达后,癌细胞增殖、迁移及体外侵袭能力均显著受到抑制,E-cadherin表达明显上调,MMP-2、MMP-9表达明显下调,MTA-1及β-catenin表达水平稍有下降;两种方法所获得的结果基本一致。结论:RORα表达下调在头颈部鳞癌侵袭转移中发挥重要作用;采用SR1078干预或转染RORαcDNA的技术手段激活头颈部鳞癌细胞中RORα的表达,可显著抑制癌细胞的增殖、迁移及侵袭活性。

孤儿核受体RORs的病理生理作用及其调控机制

核受体是一类配体依赖的转录因子超家族。视黄酸相关孤儿受体(retinoid-related orphan receptors,RORs),又称为NF1R,因在基因序列上与视黄酸受体和视黄酸X受体类似而得名。RORs亚家族主要包括RORα、RORβ和RORγ等三个成员。作为核受体家族的一个重要成员,RORs通过调控相关基因表达,在机体发育、免疫反应、生物节律以及细胞代谢等多种生理过程中发挥重要作用。新近研究发现,RORs表达或功能异常还影响诸多病理过程,主要包括肿瘤、免疫炎症性疾病、动脉粥样硬化等心血管疾病。关于RORs的大量研究拓宽了我们对核受体家族生物学特征及其病理生理作用的认识及理解。本综述主要讨论RORs亚家族各成员的生物学特征及其在机体内的病理生理作用及机制。

红细胞膜相关蛋白通过IL-6/STAT3/ROR-γt信号通路抑制小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎中Th17细胞分化

目的探讨小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型中,外源性和内源性红细胞膜相关蛋白(ERMAP)通过白细胞介素6/信号转录及转录激活因子3(IL-6/STAT3)/维甲酸相关孤核受体γt/(ROR-γt)信号通路对辅助性T细胞17(Th17)细胞分化的影响。方法流式细胞术验证不同浓度ERMAP-Ig融合蛋白功能;琼脂糖凝胶电泳鉴定ERMAP基因敲除小鼠。流式细胞术检测ERMAP-Ig融合蛋白在体外对Th17细胞分化影响。40只6周龄普通C57BL/6小鼠随机分为2组建立EAE模型:对照(control)-Ig和ERMAP-Ig组,每组20只;记录临床评分;流式细胞术检测EAE小鼠体内Th17细胞分化情况。40只6周龄已鉴定的野生型和ERMAP基因敲除小鼠分为2组建立EAE模型:ERMAP^(+/+)和ERMAP^(-/-)组,每组20只。记录临床评分;脊髓HE和固蓝(LFB)染色并进行组织学半定量评分。流式细胞术检测IL-17A+CD4+T细胞百分比;Western blotting检测IL-6、白细胞介素17(IL-17)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、ROR-γt蛋白水平表达;Real-time PCR检测IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、STAT3和ROR-γt的mRNA表达;ELISA检测细胞水平IL-17和TNF-α的表达。结果1.外源性ERMAP-Ig融合蛋白抑制体内外Th17细胞分化且减轻小鼠EAE症状。2.与对照组相比,ERMAP^(-/-)组EAE小鼠炎性浸润和脱髓鞘症状加重,Th17分泌IL-17A增加。3.内源性ERMAP基因敲除后,IL-17、TNF-α、IL-6、STAT3及ROR-γt表达均增加。差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ERMAP可能通过IL-6/STAT3/ROR-γt信号通路调控Th17细胞分化,参与小鼠EAE发生发展。

不同肝组织炎症分级和纤维化分期的自身免疫性肝炎患者外周血单个核细胞TLR2和CTLA-4水平变化研究

目的 调查不同肝组织炎症分级和纤维化分期的自身免疫性肝炎(AIH)患者外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体2(TLR2)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)水平变化。方法 2018年6月~2022年6月我院诊治的47例AIH患者和同期50例健康人,所有AIH患者接受肝活检。抽取外周血,分离PBMCs,采用PCR法检测PBMCs TLR2和CTLA-4 mRNA水平,使用流式细胞仪检测TLR2和CTLA-4阳性的PBMCs百分比。结果 AIH患者PBMCs TLR2 mRNA水平和细胞表面TLR2阳性的PBMCs百分比分别为(1.7±0.4)和(34.2±7.9)%,均显著高于健康人【分别为(0.9±0.2)和(21.4±3.5)%,P<0.05】,而PBMCs CTLA-4 mRNA水平和细胞表面CTLA-4阳性的PBMCs百分比分别为(0.5±0.2)和(2.3±0.8)%,均显著低于健康人【分别为(1.1±0.2)和(13.7±3.9)%,P<0.05】;21例肝组织G3/G4级患者TLR2 mRNA水平和细胞表面TLR2阳性的PBMCs百分比分别为(1.9±0.3)和(37.2±5.7)%,均显著高于26例G1/G2级患者【分别为(1.5±0.3)和(30.5±6.2)%,P<0.05】,而PBMCs CTLA-4 mRNA水平和细胞表面CTLA-4阳性的PBMCs百分比分别为(0.3±0.1)和(1.9±0.6)%,均显著低于G1/G2级患者【分别为(0.7±0.2)和(2.6±0.8)%,P<0.05】;17例肝组织F3/F4期患者TLR2 mRNA水平和细胞表面TLR2阳性的PBMCs百分比分别为(1.9±0.3)和(37.6±5.3)%,均显著高于25例F1/F2期患者【分别为(1.6±0.3)和(32.9±4.2)%,P<0.05】或5例F0期患者【分别为(1.3±0.2)和(28.7±1.9)%,P<0.05】,而PBMCs CTLA-4 mRNA水平和细胞表面CTLA-4阳性的PBMCs百分比分别为(0.3±0.1)和(1.8±0.6)%,均显著低于F1/F2期患者【分别为(0.6±0.2)和(2.3±0.7)%,P<0.05】或F0期患者【分别为(0.9±0.2)和(4.2±0.4)%,P<0.05】。结论 AIH患者PBMCs TLR2 mRNA和TLR2阳性的PBMCs百分比升高,而PBMCs CTLA-4 mRNA水平和CTLA-4阳性的PBMCs百分比降低,并与肝组织炎症活动度和纤维化程度相关,值得进一步研究。

急性缺血性脑卒中患者血清salusin-β、RORγt水平与病情、短期预后的关系

目的:探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清salusin-β、视黄酸相关孤儿受体γt(RORγt)水平与病情、短期预后的关系。方法:选取AIS患者112例,根据美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIH stroke scale,NIHSS)评分将AIS患者分为轻度组(NIHSS<5分,n=40)、中度组(NIHSS为5~20分,n=54)、重度组(NIHSS>20分,n=18)。采用酶联免疫吸附法检测血清salusin-β、RORγt水平。出院后连续随访3个月,根据改良Rankin量表(modified Rankin scale,m RS)评分将AIS患者分为预后良好组(mRS评分<3分,n=83)、预后不良组(mRS评分≥3分,n=29)。采用Pearson相关分析探讨血清salusin-β、RORγt与NIHSS评分关系,采用受试者工作特性(ROC)曲线评估血清salusin-β、RORγt对AIS患者预后的预测价值,采用多因素Logistic回归分析AIS患者预后的影响因素。结果:随着病情加重,AIS患者血清salusin-β、RORγt水平逐渐升高(轻度组<中度组<重度组)(P<0.05)。AIS患者的血清salusin-β、RORγt与NIHSS评分均呈正相关(r=0.603,P<0.001;r=0.541,P<0.001)。预后良好组的血清salusin-β、RORγt低于预后不良组(P<0.05)。血清salusin-β、RORγt预测AIS患者预后的AUC(95%CI)分别为0.772(0.711~0.823)、0.848(0.807~0.889),截点值分别为5.74 nmol/L、98.29 pg/mL,特异度分别为53.01%、65.06%,灵敏度分别为93.10%、93.10%,二者联合检测的AUC(95%CI)为0.912(0.871~0.953),特异度为85.54%,灵敏度为86.21%。预后良好组年龄、高血压、糖尿病、发病至入院时间、入院NIHSS评分、WBC、CRP与预后不良组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄≥60岁(OR=2.280,95%CI 1.562~3.328)、入院NIHSS评分>20分(OR=2.088,95%CI 1.464~2.977)、salusin-β≥5.74 nmol/L(OR=2.654,95%CI 1.745~4.037)、RORγt≥98.29 pg/mL(OR=3.031,95%CI 1.943~4.730)是AIS患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论:血清salusin-β、RORγt在急性缺血性脑卒中患者中随病情严重程度增加而上升,且与患者预后密切有关。