小鼠胚胎细胞视黄酸结合蛋白1阳性神经嵴细胞的时空分布与功能

目的探讨小鼠胚胎心神经嵴细胞的形成、分布模式及其在心血管系统发育过程中的作用。方法选用抗细胞视黄酸结合蛋白1(CRABP1)、抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、抗心肌肌球蛋白重链(MHC)、抗胰岛因子1(Isl-1)抗体,对45只胚龄8～12d小鼠胚胎连续切片进行免疫组织化学染色。结果胚龄8d,CRABP1在神经褶的外胚层未见阳性表达。胚龄8.5～9d,在心管与鳃弓水平,神经褶开始出现CRABP1阳性细胞,且有部分细胞从神经褶背侧分离进入邻近间充质。胚龄10d,神经管两侧间充质内的CRABP1阳性细胞迁移至鳃弓、弓动脉壁内皮周围以及流出道心胶质内。胚龄11～12d,弓动脉内皮周围、流出道心内膜垫内CRABP1表达明显下降,但弓动脉管壁α-SMA阳性平滑肌细胞数量增加。主肺动脉隔及其分隔形成的升主动脉和肺动脉干管壁内均可见Isl-1阳性细胞,但未见CRABP1表达。结论小鼠胚胎CRABP1阳性神经嵴细胞形成的时间窗限定在胚龄8.5～9d。胚龄10d后,CRABP1阳性神经嵴细胞经过迁移,参与弓动脉中膜平滑肌和流出道心内膜垫的形成。CRABP1不能用于标记迁移后的神经嵴细胞。

血清视黄酸结合蛋白与冠状动脉造影后造影剂肾病发生相关性的研究

目的：探讨血清视黄酸结合蛋白（sRBP）与冠状动脉造影后造影剂肾病（CIN）发生的相关性。方法采用回顾性研究的方法，选择接受冠状动脉造影术和（或）经皮冠状动脉介入治疗术的冠心病患者为研究对象，收集患者造影前24h内、造影后8h、24h和48h血视黄酸结合蛋白、血清肌酐等相关临床资料。结果CIN组的sRBP在造影前24h内即出现升高，在冠状动脉造影后8h明显升高，24-48h仍持续升高；与非CIN组相应时间点相比，CIN组患者的sRBP显著增高（P＜0.05）。造影前sRBP升高与CIN发生有相关性。结论 sRBP可能是预测和判断CIN发生的一个较好的血液学指标。

细胞视黄酸结合蛋白Ⅱ在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 利用Oncomine基因数据库分析CRABPⅡ基因在乳腺癌中的表达及对乳腺癌患者生存的意义。方法 通过Oncomine、Kaplan-Meier Plotter和癌症细胞系百科全书分析CRABPⅡ基因在各类乳腺癌组织中的表达和基因差异表达,并进行Meta分析和乳腺癌患者预后生存分析。结果 Oncomine数据库检索CRABPⅡ基因有438项不同种类结果。50项研究的表达有统计学差异,其中39项研究显示表达增高,11项研究显示表达降低,共有研究样本量653例;癌症细胞系百科全书显示CRABPⅡ基因在乳腺癌细胞系中的表达水平最明显;Kaplan-Meier Plotter数据库检索结果表明CRABPⅡ高表达导致患者的总生存预后不良( P =0.0035);与低表达组相比,CRABPⅡ高表达组乳腺癌患者的总生存时间显著降低( P <0.05);同时,CRABPⅡ的高表达也是luminal A型乳腺癌预后不良的重要因素。结论 通过深入挖掘Oncomine等数据库中CRABPⅡ基因芯片信息,证实CRABPⅡ在乳腺癌组织与细胞中高表达,且与乳腺癌患者生存预后不良相关,为临床乳腺癌的治疗及基因靶向药物的研制提供重要依据。

家蚕过敏原细胞视黄酸结合蛋白(CRABP)的克隆表达及生物学分析

目的研究家蚕细胞视黄酸结合蛋白(CRABP)的原核克隆表达及生物学意义。方法家蚕总RNA提取;根据ref|NM-001043899|设计引物;RT-PCR扩增;PET-28a质粒目的基因表达载体的构建,转化大肠杆菌BL21(DE3);Western bolt检测重组CRABP;采用MEGA5工具包和clustalw2进行同源性分析;采用ProtParam Tools预测CRABP的理化性质;采用PSIPRED和SWISS-MODEL预测其蛋白质结构。利用Preprod、IEDB和DNAStar对CRABP蛋白T、B细胞抗原表位进行预测。结果克隆出家蚕CRABP基因开放阅读框399bp,编码132个氨基酸。CRABP工程菌(DE3)经IPTG诱导高效表达CRABP重组的可溶性蛋白,分子量约18kDa。重组CRABP能够与家蚕过敏患者血清IgE结合。测序证明克隆的家蚕CRABP蛋白与黑脉金斑蝶细胞视黄酸结合蛋白(gb|EHJ79039.1|)同源性为94%。系统进化树结果显示家蚕与小菜蛾亲缘关系比较近。理化性质预测显示CRABP蛋白质较稳定。二级结构及三级结构预测结果显示CRABP的结构主要以β折叠组成。T细胞抗原表位预测得到4个肽序列(4-12、20-29、51-59、80-88)。B细胞抗原表位预测得到4个肽序列(1-16、40-55、67-82、105-120)。结论克隆并表达的家蚕CRABP蛋白具有良好的变应原性,为进一步研究家蚕过敏原的结构成分及其理化性质奠定理论基础。

猪视黄醇及视黄酸结合蛋白基因的几个内含子的克隆测序

视黄醇及其具生理活性的代谢产物在动物的视觉、生长、繁殖、细胞的分化及胚胎发育等方面起重要作用.本研究对猪细胞视黄醇结合蛋白基因2（CRBP2）的内含子3,猪细胞视黄醇结合蛋白基因7（CRBP7）的内含子2,猪血浆视黄醇结合蛋白基因4（RBP4）的内含子2、3,猪细胞视黄酸结合蛋白基因2（CRABP2）的内含子2进行了克隆测序,为这些基因的结构及其功能的深入研究奠定了一定的基础.

斜纹夜蛾视黄酸结合蛋白(Slcrabp)基因的克隆、表达及功能

视黄酸结合蛋白(Cellular retinoic acid binding protein,CRABP)属于胞内脂质结合蛋白超基因家族,参与了许多生理活动,如细胞分化、组织重建和信号转导等,但其在昆虫中肠的作用尚不明确。研究从斜纹夜蛾Spodoptera litura中肠基因表达序列标签(EST)文库中克隆获得一个编码Slcrabp的全长c DNA,该c DNA由396个核苷酸组成,编码132个氨基酸。预测CRABP蛋白质的空间结构与脂肪酸结合蛋白非常相似,含一个由10个反平行的β折叠和2个α螺旋形成的配体结合中心结构域。Sl CRABP基因具有4个外显子,与脊椎动物crabp基因类似。RT-PCR检测表明,在转录水平上,Slcrabp在6龄幼虫中肠的各个时期均有较高表达。Western blot分析结果显示,Sl CRABP蛋白分布广泛,在中肠、脂肪体、精巢等组织上大量表达。在中肠,其表达峰值出现在预蛹期。利用荧光标记物质8-苯胺基-1-萘磺酸(1,8-ANS)分析了重组Sl CRABP蛋白与不同底物的亲和力,发现Sl CRABP与不饱和长链脂肪酸有较高结合活性,如花生四烯酸钠、亚麻酸、油酸钠和油酸,但与视黄酸、视黄醇的结合力却很弱或几乎不结合,暗示斜纹夜蛾Sl CRABP功能与同家族脂肪酸结合蛋白(FABP)性质相似。对6龄幼虫进行饥饿处理,结果显示经过经24 h和48 h饥饿处理后,虫体中肠Sl CRABP蛋白质的表达量有显著上升,暗示Sl CRABP可能参与了斜纹夜蛾体内脂类的转运过程。

细胞视黄酸结合蛋白2在肾母细胞瘤中的生物信息学分析

目的:通过生物信息学方法分析细胞视黄酸结合蛋白2(CRABP2)在肾母细胞瘤中的表达,并探讨其在肾母细胞瘤发生发展中的分子机制。方法:通过TARGET、GTEx、GEO数据库获得CRABP2的表达数据,将数据进行统一标准化处理,通过Meta分析探讨CRABP2在肾母细胞瘤组织和正常对照组织的差异表达。通过TARGET和cBioPortal网站分析CRABP2的共表达基因,并将其取交集,将交集的共表达基因通过WebGestalt网站进行GO功能分析和KEGG富集分析,探索CRABP2在肾母细胞瘤中的分子机制。结果:Meta分析森林图结果显示,CRABP2在肾母细胞瘤中的表达高于正常对照组织(SMD=2.87,95%CI:0.71~5.04,P=0.000),SROC曲线下面积(AUC)=0.999 2,具有诊断意义。通过TARGET和cBioPortal网站获得CRABP2的435个重叠共表达基因。GO富集分析结果显示,重叠共表达基因功能主要富集于chromosome organization、DNA metabolic process和DNA clamp loader activity等生物学过程。KEGG通路结果显示,重叠共表达基因主要富集于spliceosome、pyrimidine metabolism和cell cycle等信号通路。结论:CRABP2作为肾母细胞瘤中的一种新的分子诊断标志,可能通过参与肾母细胞瘤的DNA组成及代谢,从而参与肾母细胞瘤的发生发展。

细胞视黄酸结合蛋白Ⅱ、表皮型脂肪酸结合蛋白及Ki-67在乳腺浸润性导管癌中的表达及相关性

目的研究细胞视黄酸结合蛋白(CRABP)Ⅱ、表皮型脂肪酸结合蛋白(E-FABP)和Ki-67在乳腺浸润性导管癌中的表达情况及三者的相关性。方法采用免疫组织化学检测2001年1月-2007年12月手术切除的152例乳腺浸润性导管癌中CRABPⅡ、E-FABP和Ki-67的表达。结果在浸润性导管癌中,CRABPⅡ在Ki-67阴性组的阳性率高于Ki-67阳性组(P<0.05),相反地,E-FABP在Ki-67阳性组的阳性率高于Ki-67阴性组(P<0.05)。CRABPⅡ和Ki-67表达呈负相关(rS=0.432,P<0.05);E-FABP和Ki-67表达呈正相关(rS=0.842,P<0.05)。E-FABP和Ki-67的表达具有协同性,E-FABP和Ki-67共同表达与肿瘤的转移有关(P<0.05)。单因素生存分析显示,E-FABP的阳性表达患者、Ki-67的阳性表达患者以及E-FABP和Ki-67的共同阳性表达患者的预后差(P<0.05)。多因素生存分析提示E-FABP的表达(RR=4.223,P=0.012)和TNM分期(RR=8.412,P=0.000)是影响浸润性导管癌患者预后的独立危险因素。结论在乳腺浸润性导管癌中,CRABPⅡ和E-FABP与肿瘤细胞的增殖有关,CRABPⅡ抑制细胞增殖,E-FABP促进细胞增殖。E-FABP和Ki-67在浸润性导管癌的发生、发展中起协同作用,两者的阳性表达可能对评估肿瘤的转移和患者的预后有一定价值。

细胞视黄酸结合蛋白与肿瘤相关研究

细胞视黄酸结合蛋白(CRABP)在细胞质介导视黄酸与细胞核上视黄酸核受体之间互相作用,同时促进视黄酸代谢酶类的活性,增强视黄酸的转化速率。在脊椎动物细胞中,CRABP包含两种高度同源蛋白质:CRABP1和CRABP2。CRABP属于低分子量的蛋白质,种属间高度保守。现有研究表明在许多肿瘤中存在CRABP基因异常甲基化,基因表达水平较正常组织有差别;CRABP基因异常甲基化与部分肿瘤患者低生存率存在相关性,CRABP基因可以成为常见的肿瘤诊断以及判断预后的分子靶标。

豚鼠形觉剥夺性近视视网膜中视黄酸转运系统的研究

目的了解视黄醇(RA)转运系统在豚鼠近视发生发展中的作用。方法2周龄英国短毛豚鼠48只,随机分为形觉剥夺组(n=24)和正常对照组(n=24)。形觉剥夺组随机取1只眼,用白色半透明眼罩遮盖形成形觉剥夺,遮盖时间为2周,干预前后均采用睫状肌麻痹后带状光检影法测定其屈光不正状态,用CinescanA/B型超声仪测定玻璃体腔深度和眼轴长度。处死后取视网膜,用HPLC法测定视网膜中的RA水平,Westernblot法定量检测视网膜中视黄酸结合蛋白-Ⅰ(CRABP-Ⅰ)和视黄酸核受体-β(RAR-β)的蛋白水平,并用Real-timePCR法测定其mRNA水平。结果形觉剥夺后模型眼的等效球镜为(-3.82±0.13)D,对照眼为(1.99±0.58)D,差异有统计学意义(t=8.376,P<0.01);形觉剥夺组眼轴长度为(8.346±0.047)mm,对照组眼轴长度为(7.888±0.042)mm,差异有统计学意义(t=3.343,P<0.05)。形觉剥夺组视网膜RA水平较对照组高,差异有统计学意义(t=4.934,P<0.01);模型眼视网膜中CRABP-Ⅰ和RAR-β的含量较对照组均提高(P<0.05)。结论豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜中RA转运系统水平显著上升,RA可能是近视发展的信使。

CRABP2通过Wnt/β-catenin通路调控子宫内膜样腺癌细胞的增殖与侵袭

目的:探讨细胞视黄酸结合蛋白2(CRABP2)在子宫内膜样腺癌组织和细胞中的表达及其对子宫内膜样腺癌细胞增殖与侵袭的影响与其分子机制。方法:收集2020年6月至2021年4月在衡水市人民医院手术切除的子宫内膜样腺癌组织及配对正常子宫内膜组织,共24对;体外培养人子宫内膜样腺癌细胞An3ca、KLE。采用免疫组化分析及WB法检测子宫内膜样腺癌组织及正常子宫内膜组织中CRABP2的表达情况,采用WB法检测An3ca及KLE细胞中敲低CRABP2表达的效率,并以EDU法及Transwell实验检测敲低CRABP2表达后的An3ca及KLE细胞的增殖及侵袭能力,免疫荧光染色及WB法检测敲低CRABP2表达后的An3ca及KLE细胞中Wnt/β-catenin通路相关关键蛋白(β-catenin、c-Myc、cyclin-D1、MMP7及MMP9)的表达情况。以裸鼠体内成瘤实验观察敲低CRABP2表达对子宫内膜样腺癌细胞移植瘤生长和移植瘤组织中Ki67和β-catenin表达的影响。结果:与正常子宫内膜组织相比,CRABP2在人子宫内膜样腺癌组织中表达上调(P<0.01)。转染靶向CRABP2的shRNA后,An3ca、KLE细胞中CRABP2的表达降低(均P<0.01);敲低CRABP2表达后An3ca及KLE细胞增殖及侵袭能力均降低(均P<0.01),并且Wnt/β-catenin通路受到抑制(P<0.01)。成瘤实验显示敲低CRABP2表达后,裸鼠体内移植瘤体积明显缩小(P<0.01)。结论:CRABP2可通过调节Wnt/β-catenin通路发挥对子宫内膜样腺癌细胞增殖与侵袭的促进作用。

肺癌细胞HK-Ⅱ、CRABP1基因的表达及意义

目的探讨QG-56人肺扁平上皮癌细胞,LTEP-a-2人肺腺癌细胞,NCI-H460人大细胞肺癌细胞己糖激酶-Ⅱ(HK-Ⅱ)和视黄酸结合蛋白1(CRABP1)基因的表达及意义。方法利用RT-PCR法检测三株肺癌细胞HK-Ⅱ和CRABP1基因的表达情况。结果 HK-Ⅱ和CRABP1基因在三株肺癌细胞中均明显表达,在健康人血细胞中不表达。结论 HK-Ⅱ和CRABP1基因在肺癌细胞中的表达水平较正常细胞呈增高趋势。

CRABPⅡ、E-FABP和Ki-67在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及临床意义

目的探讨细胞视黄酸结合蛋白(CRABP)Ⅱ、表皮型脂肪酸结合蛋白(E-FABP)及Ki-67在乳腺浸润性导管癌(IDC)组织中的表达及临床意义。方法收集2009年1月至2013年1月深圳市宝安区石岩人民医院收治的112例IDC患者的临床资料,患者均采用手术切除,并对IDC组织进行免疫组织化学染色,观察IDC组织中CRABPⅡ、E-FABP及Ki-67的表达情况。结果 CRABPⅡ在Ki-67阴性表达组的阳性表达率高于Ki-67阳性表达组(67.6%比19.2%,χ2=24.761,P=0.000);E-FABP在K-i67阳性表达组中的阳性表达率高于Ki-67阴性表达组(84.6%比35.3%,χ2=27.245,P=0.000)。IDC组织中CRABPⅡ表达与Ki-67表达呈负相关(rs=-0.467,P=0.000),E-FABP表达与Ki-67表达呈正相关(rs=0.916,P=0.000)。E-FABP与Ki-67共同表达与肿瘤大小、组织学分级、IDC淋巴转移有关,与患者年龄、TNM分期均无关。结论 CRABPⅡ和E-FABP可能参与了肿瘤细胞的增殖调控,CRABPⅡ对肿瘤细胞的增殖具有抑制作用,E-FABP对肿瘤细胞的增殖具有促进作用,E-FABP和Ki-67对IDC的进展具有协同作用,两者的共同表达对IDC转移的判断具有一定的临床价值。

浸润性乳腺癌中CRABPⅡ和E-FABP的差异表达及与临床病理的关系

目的 :探讨细胞视黄酸结合蛋白(cellular retinoic acid-binding proteinⅡ,CRABPⅡ)和表皮脂肪酸结合蛋白(epidermal fatty acid-binding protein,E-FABP)的差异表达在乳腺癌中的意义,以及与临床病理特征和分型的关系。方法:分析123例浸润性乳腺癌患者的临床资料,采用免疫组化法检测乳腺癌组织中CRABPⅡ和E-FABP的表达。结果:CRABPⅡ和E-FABP在浸润性乳腺癌的表达存在显著差异(P<0.01)。此差异表达分为E-FABP≥CRABPⅡ与E-FABP﹤CRABPⅡ两种。在浸润性乳腺癌中,E-FABP≥CRABPⅡ的表达较多见。CRABPⅡ和E-FABP的差异表达与腋窝淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05)。差异表达与病理分型相关,Luminal A型中E-FABP≥CRABPⅡ的百分率最低(61.6%),Basal-like型中的百分率最高(95.2%)。结论 :在浸润性乳腺癌中,CRABPⅡ和E-FABP的差异表达可能与乳腺癌的侵袭性及预后相关,E-FABP≥CRABPⅡ时的乳腺癌侵袭性高、预后差。

CRABP2对肺癌细胞应答全反式视黄酸及细胞增殖的影响

目的探讨细胞视黄酸结合蛋白2(CRABP2)对肺癌细胞应答全反式视黄酸(ATRA)及细胞增殖的影响。方法观察两株肺癌细胞95-D和A549对ATRA的敏感性。应用小干扰RNA(siRNA)敲低CRABP2的表达,采用CCK-8和流式细胞术分别检测细胞增殖和周期变化,Western blot检测NF-κB和丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路分子的表达。结果 ATRA抑制95-D和A549细胞增殖,其中95-D细胞的抑制作用更为明显;而干扰CRABP2的表达则显著降低ATRA对95-D细胞的抑制作用。干扰CRABP2表达在一定程度上能直接抑制95-D细胞增殖,增加G1期的细胞比例,减少S期的细胞,降低NF-κB、应激活化蛋白激酶/c-JUN氨基末端激酶(SAPK/JNK)和c-JUN的磷酸化水平。结论 CRABP2能增强肺癌细胞对ATRA的敏感性,并且还可能通过调控NF-κB和SAPK/JNK信号通路促进细胞增殖,提示CRABP2在肿瘤细胞中的双重作用。

卵巢癌患者组织及血清ADPN、CA-125、CRABP2表达与临床病理特征及预后的相关性

目的研究卵巢癌(OC)患者组织及血清脂联素(ADPN)、糖类抗原125(CA-125)、细胞视黄酸结合蛋白2(CRABP2)表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选取2018年1月至2020年11月于沧州市人民医院妇科行手术切除的OC患者(OC组)97例为研究对象,另取卵巢良性肿瘤患者(良性组)99例以及无卵巢相关疾病的健康女性(对照组)100例,根据随访3年的预后情况将患者分为生存组(n=67)和死亡组(n=30),分析各组患者卵巢组织及血清中ADPN、CA-125、CRABP2表达及其与临床病理特征的关系。用多因素Logistic回归分析OC患者死亡的影响因素;用Kaplan-Meier法对OC患者3年生存率进行分析。结果OC组卵巢组织中CA-125、CRABP2阳性表达高于良性组,ADPN阳性表达低于良性组(P<0.05);血清中CA-125、CRABP2表达高于良性组和对照组,ADPN表达低于良性组和对照组(P<0.05)。生存组ADPN水平高于死亡组,CA-125、CRABP2水平低于死亡组(P<0.05)。血清ADPN水平与FIGO分期、淋巴结转移、病理分期呈负相关,与淋巴结清扫呈正相关(P<0.05);血清CA-125、CRABP2水平与FIGO分期、淋巴结转移、病理分期呈正相关,与淋巴结清扫呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析表明ADPN、CA-125、CRABP2是OC患者死亡的独立影响因素(P<0.05)。ADPN阳性表达患者3年总生存率明显高于ADPN阴性表达患者,CA-125阳性表达患者3年总生存率明显低于CA-125阴性表达患者,CRABP2阳性表达患者3年总生存率低于CRABP2阴性表达患者(P<0.05)。结论OC患者组织及血清中ADPN水平较低,CA-125、CRABP2水平较高,与患者临床病理特征和预后相关。

CKMT1A、CRABP2、PAX8在子宫内膜癌患者血清中的表达水平及其与临床病理参数和预后的关系

目的探讨线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)、细胞视黄酸结合蛋白2(CRABP2)、配对盒基因8(PAX8)在子宫内膜癌患者血清中的表达水平及其与临床病理参数和预后的关系。方法选取2021年5月至2022年5月唐山市妇幼保健院收治的107例子宫内膜癌患者作为研究组。并在治疗后进行1年定期随访,根据患者复发情况分为复发组和未复发组。另选取同时期在该院进行体检的86例健康者作为健康组。采用酶联免疫吸附试验检测各组血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平,比较不同临床病理指标的子宫内膜癌患者血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平。采用Pearson相关分析子宫内膜癌患者血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CKMT1A、CRABP2、PAX8单独及三者联合检测对子宫内膜癌复发的预测价值。结果研究组血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平均高于健康组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,血清CKMT1A与CRABP2水平呈正相关(r=0.437,P<0.001),CKMT1A与PAX8水平呈正相关(r=0.526,P<0.001),CRABP2与PAX8水平呈正相关(r=0.493,P<0.001)。不同肌层浸润、分化程度、淋巴结转移情况等的子宫内膜癌患者血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平随着分化程度的降低及淋巴结的转移而升高(P<0.05)。复发组纳入12例患者,非复发组纳入95例患者。复发组血清CKMT1A、CRABP2、PAX8水平均高于非复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清CKMT1A、CRABP2和PAX8单独预测子宫内膜癌复发的曲线下面积分别为0.886、0.850、0.811,均低于三者联合检测的0.978(Z三者联合-CKMT1A=2.318,P=0.020;Z三者联合-CRABP2=2.030,P=0.042;Z三者联合-PAX8=2.955,P=0.003)。结论子宫内膜癌患者血清CKMT1A、CRABP2和PAX8水平均高表达,三者表达与病理类型、分化程度、淋巴结转移情况等临床病理参数以及预后有关,可以作为评估子宫内膜癌患者预后的生物学指标。

小鼠CRABP2真核表达载体的构建及体外表达

为了进一步研究细胞视黄酸结合蛋白2(cellular retinoic acid-binding protein 2,CRABP2)基因在肌肉发育中的功能和作用机制,试验从成年小鼠肌肉组织中提取RNA,经反转录获得c DNA样本,RT-PCR扩增小鼠CRABP2基因的编码区,克隆入pc DNA3.1(+)真核表达载体中。经PCR扩增、双酶切和测序分析鉴定后提取去内毒素质粒,将其转染C2C12细胞,通过Real-time PCR检测其在C2C12细胞中的表达情况。结果表明:pc DNA3.1-CRABP2真核表达载体成功构建及其在体外细胞有效表达。