维甲酸诱导基因Ⅰ信号通路在西尼罗病毒感染中的作用研究

目的探讨维甲酸诱导基因I(RIG-I)信号通路在西尼罗病毒感染过程中的作用。方法用西尼罗病毒Chin-01株感染A549细胞,分别通过RT-PCR和Western blotting检测病毒感染对RIG-I及干扰素β(IFN-β)启动子刺激因子-1(IPS-1)表达的影响,通过含CAT报告基因的重组质粒观察病毒感染对干扰素调控因子-3(IRF-3)和IFN-β启动子活性的影响,并用ELISA法检测IFN-β的表达水平,明确西尼罗病毒感染对RIG-I信号通路下游信号分子的激活作用。通过瞬时转染法在A549细胞中过表达RIG-I,观察其对西尼罗病毒感染的影响。结果西尼罗病毒感染能够上调RIG-I的表达,激活IPS-1、IRF-3等下游信号分子,诱导I型IFN的产生。同时,RIG-I的过表达能够抑制西尼罗病毒的增殖。结论RIG-I信号通路介导的固有免疫反应可能在西尼罗病毒感染过程中发挥重要作用。

基于HIF-1信号通路基因变化探讨COPD肺血管病变的发生机制

目的以慢性阻塞性肺疾病(COPD)动物模型为基础,探索COPD肺血管病变发生发展与低氧诱导因子(HIF)-1复合信号通路的关系。方法将30只SD雄性大鼠随机分为正常组10只,模型组20只,模型组后续分为造模6 w组与造模12 w组。以香烟烟雾暴露结合鼻腔滴入内毒素法建立COPD模型,收集正常组、造模6、12 w组肺组织,q-聚合酶链反应(PCR)法检测COPD模型造模后不同时间点HIF-1复合通路关键基因HIF-1α、热休克蛋白(HSP)90、血管内皮生长因子(VEGF)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及内皮素(ET)-1 mRNA表达。结果与正常组相比,COPD模型组黏膜下存在明显的炎细胞浸润,肺泡壁变薄或断裂引起部分肺泡扩大融合形成肺大泡,肺血管也显示出不同程度增生,管壁增厚或管腔变形,微血管数量明显增多。与正常组相比,造模6、12 w后肺组织中HIF-1α、HSP90、VEGF、ET-1 mRNA表达显著上调(P<0.05,P<0.01),且造模12 w后肺组织中HIF-1α、VEGF、iNOS mRNA表达与造模6 w时相比显著上调(P<0.05)。与造模6 w时相比,造模12 w后肺组织中HSP90、ET-1 mRNA表达无显著差异(P>0.05)。与正常组相比,肺组织中iNOS mRNA表达在造模6 w时无显著差异(P>0.05),造模12 w后肺组织中iNOS mRNA表达显著上调(P>0.05)。结论COPD肺血管病变的发生发展与HIF-1复合信号通路的表达相关,且严重程度与造模时长呈正相关。

家禽视黄酸诱导基因-Ⅰ研究进展

天然免疫是机体抵抗病原微生物的第一道防线,视黄酸诱导基因-Ⅰ(RIG-Ⅰ)是细胞质内识别病毒双链RNA的一类模式识别受体,能够识别细胞质中的病毒RNA,诱导宿主细胞产生Ⅰ型干扰素等细胞因子,进而产生相应的抗病毒天然免疫反应。目前对人、小鼠、猪等哺乳动物细胞中RIG-Ⅰ介导的抗病毒天然免疫反应的研究较为深入,对家禽RIG-Ⅰ的相关研究还处于起步阶段。近年来,鸭和鹅的RIG-Ⅰ相继被研究。鸭和鹅RIG-Ⅰ的发现、结构特点、组织表达及其抗流感病毒和其他禽类病毒作用方面的研究都有了新的进展,将为禽类抗病毒和免疫系统研究提供参考。

鼠尾草酸调节PINK1/Parkin信号通路对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞的影响

目的探究鼠尾草酸调节磷酸酶基因(PTEN)诱导假定激酶(PINK)1/E3泛素连接酶(Parkin)信号通路对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)的影响。方法将HBZY-1细胞分为对照组(含糖量5.8 mmol/L),高糖组(含糖量26 mmol/L),低剂量鼠尾草酸组(含50 mg/kg鼠尾草酸),高剂量鼠尾草酸组(含100 mg/kg鼠尾草酸)。采用透射电镜、流式细胞仪观察高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞自噬、凋亡变化状况,Western印迹检测PINK1/Parkin信号通路蛋白的表达量。结果与对照组相比,高糖组、低剂量鼠尾草酸组、高剂量鼠尾草酸组HBZY-1细胞自噬率、PINK1、Parkin、超氧化物歧化酶(SOD)表达显著降低,细胞凋亡率、白细胞介素(IL)-1β、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平显著升高(P<0.05);与高糖组对比,低剂量鼠尾草酸组、高剂量鼠尾草酸组HBZY-1细胞自噬率、PINK1、Parkin、SOD水平显著升高,细胞凋亡率、MDA、TNF-α、IL-1β表达显著下降(P<0.05);与低剂量鼠尾草酸组相比,高剂量鼠尾草酸组的HBZY-1细胞自噬率、PINK1、Parkin、SOD表达上升,细胞凋亡率、TNF-α、MDA、IL-1β表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论鼠尾草酸可加强高糖诱导的肾小球系膜细胞自噬率,抑制HBZY-1的凋亡,可能与其调节PINK1/Parkin信号通路有一定的关联性。

肿瘤细胞Ⅰ型干扰素信号通路及功能相关基因研究

干扰素具有抗病毒、调节细胞生长、抑制肿瘤血管形成以及调节免疫等多种功能 ,这些生物学功能的正常发挥有赖于细胞中多种信号传导通路的开放、功能基因的转录和相互协同。本文主要综述肿瘤细胞 型干扰素所涉及信号传导通路、相关基因的表达和其生物学功能的研究进展。

视黄酸诱导基因-Ⅰ在家禽天然免疫应答中作用的研究进展

家禽的天然免疫应答在抵抗病毒感染的过程中起着关键性作用,视黄酸诱导基因-Ⅰ(retinoic acid inducible gene-Ⅰ,RIG-Ⅰ)作为细胞质内一类识别病毒双链RNA的模式识别受体,与天然免疫应答密切相关。它可通过RNA配体结合病原相关分子模式监测细胞质中的病毒RNA,此过程激活了RIG-Ⅰ及下游线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS),最终导致干扰素调节因子(IRF3/7)和核因子κB(NF-κB)活化,诱导产生Ⅰ型干扰素等免疫细胞因子,进而使细胞做出相应的抗病毒天然免疫反应。但由于鸡体内缺乏RIG-Ⅰ基因,目前大多将鸭源或鹅源RIG-Ⅰ基因转染鸡成纤维母细胞(DF-1)研究RIG-Ⅰ基因在鸡感染禽类病毒时是否具有免疫功能。文章介绍了RIG-Ⅰ在家禽体内的表达及其介导的抗病毒天然免疫信号通路,并简述了RIG-Ⅰ在家禽体内抗病毒作用的研究概况,为抑制家禽病毒的感染和免疫系统研究,以及研制新型抗病毒疫苗或免疫佐剂等提供参考。

Ⅰ型干扰素信号通路上的“刹车系统”:干扰素刺激基因IFIT5

天然免疫是机体抵御外源病原微生物侵入的第一道防线,而Ⅰ型干扰素(IFN-I)信号通路是天然免疫信号通路中关键的组成部分。病毒感染宿主后,由模式识别受体识别并介导产生IFN-I,IFN-I进而通过Jak-STAT信号通路诱导上百种干扰素刺激基因(ISGs)的表达。正常情况下,IFN的产生和其下游信号通路的激活受到精准的调控。

视黄酸诱导基因蛋白Ⅰ在抗禽源病毒先天免疫中的作用研究进展

文章介绍了视黄酸诱导基因蛋白Ⅰ(RIG-Ⅰ)的结构、对病毒的识别机制、抗禽流感病毒与新城疫病毒的先天免疫作用,为其抗病毒机制的深入研究提供参考。

TBK1-IRF7信号通路对γ干扰素诱导基因表达的作用

信号转导及转录活化因子（STAT）和干扰素调节因子（IRF）具有共有的靶基因。该研究发现，在γ干扰素（IFN-γ）作用下STAT1和IRF9调节irf7基因转录。IRF7与STAT1和IRF1协同刺激IFN-γ诱导STAT1靶基因亚型的表达。IRF7介导对Gbp2基因的控制，

HarpinEa促进烟草和蕃茄生长和诱导抗虫的信号通路

用HarpinEa对野生型烟草进行了处理，结果发现，HarpinEa能够促进植株的生长(Enhanced Plant Growth，EPG)，提高内源SA和乙烯的水平，诱导对烟蚜的抗性(Insect Resistance，IR)。相应地，半定量RT-PCR方法检测表明，harpinEa诱导野生型烟草中水杨酸(salicylic acid，SA)信号传导重要调控基因NPR1、效应基因PR-1a、PR-1b以及乙烯信号通路中的ACS6、ETR1、EIN2等基因的表达。在不积累SA的NahG烟草上，harpinEa诱导EPG和IR的能力不受影响，但RP-1a、PR-1b基因的表达水平显著降低。这些结果说明，harpinEa诱导EPG和IR过程与SA信号通路无关，而可能受乙烯信号调节。

视黄酸诱导基因1样受体(RLR)识别和调控的研究进展

天然免疫系统通过模式识别受体(PRR)识别病毒、细菌等病原体的病原体相关分子模式(PAMP),进而启动天然免疫反应、帮助机体清除入侵病原体。视黄酸诱导基因1(RIG-1)样受体(RLR)是PRR中具有DEx D/H-box RNA解螺旋酶结构域的一类受体,目前发现的RLR包括视黄酸诱导基因1(RIG-1/DDX58)、黑素瘤分化相关分子5(MDA5/IFIH1)和遗传学和生理学实验室蛋白2(LGP2/DHX58)。它们参与多种机体生理和病理过程,如抗病毒反应、自身免疫性疾病、肿瘤,其主要功能是识别病毒的寡聚核糖核苷酸,激活线粒体抗病毒信号蛋白[MAVS(IPS-1/VISA/cardif)]等关键接头分子,最终导致转录因子干扰素诱导因子3(IRF3)和核因子κB(NF-κB)活化,诱导1型干扰素和炎性细胞因子,从而介导宿主抗病毒免疫。本文重点阐述RLR在抗病毒免疫反应中识别RNA机制的研究进展。

缺氧诱导因子1α相关信号通路与肿瘤关系的研究进展

缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是细胞缺氧应激状态下活跃的细胞因子,其表达及活性受脯氨酰羟化酶(PHD)/希佩尔林道蛋白(p VHL)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、Bcl-2相关性抗凋亡基因3(BAG3)/热激蛋白70(HSP70)等上游信号通路的调节,并通过特异性识别结合靶基因缺氧反应元件区域,调节其下游靶基因表达,在肿瘤发生过程中起重要作用。

MAPK信号通路参与热激诱导家蚕未受精卵发生孤雌生殖发育的研究

通过检测家蚕未受精卵细胞中参与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的几个关键基因的转录水平,分析热激诱导家蚕未受精卵发生孤雌生殖发育的分子机制。首先基于家蚕未受精卵RNA-seq数据分析表明,在家蚕孤雌生殖系和有性生殖系间,无论是经过热激诱导处理(46℃水浴18 min)或未热激处理的未受精卵,MAPK途径都存在差异表达的基因。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测分析MAPK途径的mos、mek、erk和p38mapk基因在热激诱导前家蚕孤雌生殖系及有性生殖系未受精卵之间的转录水平差异:位于MAPK通路中上游的2个基因mos和mek,无论中系品系还是日系品系中,均表现为在孤雌生殖系表达极显著下调(P<0.01);而位于MAPK通路下游的基因erk和p38mapk,其转录水平在中系品系的孤雌生殖系与有性生殖系间无显著性差异,但在日系品系中则表现为在孤雌生殖系中极显著下调(P<0.01)。qRT-PCR检测分析家蚕孤雌生殖系未受精卵的4个基因在热激诱导孤雌生殖发育过程中的转录水平变化也表现出差异性:热激处理后mos和mek的转录水平极显著下调(P<0.01),并维持在低水平;p38mapk则在热激处理前后保持稳定;而热激处理后erk基因的转录先显著升高(P<0.05),而后逐步下降,并维持在热激处理前的水平。研究结果提示,MAPK途径可能参与了热激诱导家蚕孤雌生殖发育过程。

植物对Hela细胞凋亡相关基因表达和信号转导通路的影响

宫颈癌占妇科恶性肿瘤发病的第一位．发病率有逐年升高和发病年轻化的趋势。其治疗方法主要有手术、放疗和化疗，化疗是子宫颈癌的常规治疗方案。大多数的化疗药物都是通过诱导细胞凋亡杀死肿瘤细胞。细胞凋亡是生物体内普遍存在的一种生理现象．是在体内复杂信号的调节下，

基于报告基因和干扰素-α信号通路的药物筛选模型的建立

目的 建立基于报告基因和干扰素 α(Interferon α)信号通路的药物筛选模型,用于筛选具有IFN α样活性的小分子化合物。方法 构建带有ISRE(IFN αstimulatedresponseelement)靶序列和报告基因的诱导性表达载体,并将其转染入血管内皮细胞 (ECV304 )中,筛选报告基因碱性磷酸酶(SEAP)表达受IFN α诱导的阳性克隆。选取相关的细胞因子干扰素 β、干扰素 γ和生长因子甲状旁腺素(PTH)进行模型特异性考察。结果 ECV304细胞中SEAP的表达受IFN α的诱导并呈现剂量依赖关系,IFN α的最高诱导表达率是IFN β最高诱导表达率的 9 0倍、IFN γ的 8 8倍、PTH的 9 1倍,具有相对特异性。IFN α对ECV304细胞无增殖作用。本方法的Z' 因子为 0 8,说明此模型具有很好的稳定性。结论 本模型的SEAP基因表达水平能够被其特异性配体强诱导表达,利用此模型在 96孔板上用化学发光法测定SEAP基因的诱导表达水平可筛选具有IFN α样活性的小分子化合物。

缺氧诱导因子-1信号转导通路的研究进展

缺氧诱导因子 1(HIF 1)是机体细胞在低氧环境中产生的一种结合DNA蛋白质因子 ,在低氧信号转导中起到一个重要的中介作用 ,通过转录水平参与对低氧反应基因的调控 ,从而使机体对低氧刺激作出复杂的病理生理反应。

RIG-I/NF-κB信号通路在老龄小鼠围术期神经认知障碍中的作用

目的探讨RIG-I/NF-κB信号通路在老龄小鼠围术期神经认知障碍(perioperative neurocognitive disorders,PND)发生中的作用。方法健康雄性15月龄野生型C57BL/6J小鼠36只,随机分为空白组(C组)、假手术组(Sham组)、PND组和RIG-I^(-/-)+PND组,每组9只。PND组和RIG-I^(-/-)+PND组通过胫骨骨折髓内钉内固定手术构建老龄小鼠术后认知功能障碍模型,RIG-I^(-/-)+PND组海马注射RIG-I-siRNA干扰海马RIG-I的表达。C组不做任何处理,Sham组仅麻醉后切开小腿皮肤,不做胫骨骨折处理。术后第1、3、7天分别通过Morris水迷宫行为学实验评估各组的学习记忆能力、采用RT-qPCR法检测海马组织中RIG-I基因表达,Western blot检测RIG-I和NF-κB(p65)蛋白含量,ELISA法测定海马组织中促炎因子白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平。结果与Sham组相比,PND组小鼠在水迷宫训练潜伏期延长(P<0.001),目标象限停留时间与穿越平台次数均减少(P均<0.05)。而RIG-I^(-/-)+PND组小鼠与PND小鼠相比,潜伏期缩短(P<0.001),目标象限停留时间和穿越平台次数均增加(P均<0.05)。相比PND小鼠,RIG-I^(-/-)+PND组小鼠RIG-I基因表达受到抑制(P<0.001)、RIG-I/NF-κB信号通路中RIG-I和NF-κB p65蛋白表达均减少(P均<0.05)、海马中促炎因子IL-6、TNF-α和IL-1β浓度均降低(P均<0.05)。结论在老龄小鼠中,RIG-I基因沉默可以通过抑制RIG-I/NF-κB信号通路激活,降低神经炎症水平,从而改善手术麻醉引起的神经认知功能障碍。

RIG-Ⅰ样受体信号传导通路与调控机制研究进展

视黄酸诱导基因Ⅰ(RIG-Ⅰ)为RLRs受体家族的成员,是比较关键的细胞质内病原体识别受体,可识别细胞内的单链、双链等RNA病毒成分,被激活的RIG-Ⅰ受体及其CARD在TRIM25的作用下连接泛素链使其寡聚化,通过与线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)相互作用,激活MAVS及下游转录因子IRF3和NF-κB,从而诱导Ⅰ型干扰素和炎性因子的表达,最终介导宿主的抗病毒免疫应答。鉴于RIG-Ⅰ持续激活可导致炎性因子对自身细胞的损伤,因此RIG-Ⅰ样受体信号通路受到宿主严格的调控。而某些病毒为逃避宿主细胞的免疫应答,进化出多种机制靶向调节RIG-Ⅰ及MAVS,从而阻断信号通路。论文从RIG-Ⅰ识别病毒机制、激活下游信号传导、宿主细胞对信号传导途径的调控以及病毒逃避机制等方面重点阐述RIG-Ⅰ所介导的天然免疫反应。

紫外线诱导皮肤肿瘤的信号转导通路研究进展

皮肤肿瘤的原因复杂，长期紫外线照射是比较明确的致癌因素。有研究发现，紫外线可导致DNA损伤、特定癌基因的激活、特定抑癌基因的失活及免疫抑制等，但其致肿瘤的具体作用机制尚不十分明确。随着肿瘤分子生物学的进展，有关细胞信号传导与肿瘤发生发展关系的研究越来越受到关注。本文就近年来关于紫外线诱导皮肤肿瘤形成的相关信号转导通路综述如下。