泛素化修饰对维甲酸诱导基因I样受体家族(RLRs)信号通路分子调控作用的研究进展

维甲酸诱导基因I样受体家族(retinoid acid-inducible gene-I-like receptors,RLRs)信号通路作为众多抗感染免疫信号通路之一,在诱导促炎细胞因子、趋化因子和I型干扰素产生等方面发挥重要的调控作用。作为蛋白质翻译后修饰之一的泛素化(ubiquitination),是由泛素蛋白(ubiquitin)与目标蛋白上不同的氨基酸位点产生结合来调控蛋白的命运,如启动蛋白酶体途径降解蛋白或激活转运等功能。而RLRs信号通路分子的泛素化修饰既是调控多种效应因子的方式之一,也是病毒经此诱发动物重要疾病以及自身免疫病、慢性炎症的经典路径之一。本文主要综述RLRs信号通路中重要的效应器分子的典型结构特征、泛素化修饰类型和功能,探讨泛素化修饰调控RLRs信号通路关键分子的作用,为相关疾病的干预或治疗提供参考。

NLRP1炎性体促进高糖高胰岛素诱导的肾小球系膜细胞焦亡

目的研究含pyrin结构域NOD样受体家族1(NLRP1)炎性体对高糖高胰岛素诱导的肾小球系膜细胞焦亡(pyroptosis)的调控作用。方法将培养的人肾小球系膜细胞(HRMC)分为4.5 mg/m L葡萄糖处理的高糖组和10μg/m L胰岛素处理的高胰岛素组,分别处理0、12、24、48、72、96 h。在各时间点,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞焦亡,实时定量PCR检测HRMC的NLRP1、白细胞介素1β前体(pro-IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和胱天蛋白酶1前体(pro-caspase-1)的mRNA水平,Western blot法检测NLRP1、IL-1β、TNF-α、caspase-1的蛋白水平;高糖高胰岛素培养的HRMC中转染NLRP1小干涉RNA(si NLRP1),采用以上方法检测上述指标的变化情况。结果高糖高胰岛素处理48 h后,HRMC增殖能力下降、焦亡细胞数目显著增加,NLRP1、pro-IL-1β、TNF-α和pro-caspase-1 mRNA和NLRP1、IL-1β、TNF-α和caspase-1蛋白水平均显著增加;si NLRP1下调HRMC中NLRP1水平后,高糖高胰岛素培养的HRMC细胞焦亡减少,IL-1β、TNF-α和caspase-1表达显著降低。结论高糖高胰岛素处理促进NLRP1的激活从而增加肾小球系膜细胞焦亡和炎症反应,下调NLRP1的表达可抑制高糖高胰岛素诱导的肾小球系膜细胞焦亡和炎症反应。

心痛泰抑制动脉粥样硬化兔炎症反应的作用机理研究

目的观察心痛泰对动脉粥样硬化兔Toll样受体4(TLR4)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、髓过氧化物酶(MPO)、Ras基因家族成员A(Rho A)、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)表达的影响,探讨心痛泰治疗动脉粥样硬化的可能作用机制。方法采用高脂饲料喂养联合免疫损伤建立兔动脉粥样硬化模型,分别予生理盐水、瑞舒伐他汀、心痛泰高、中、低剂量进行干预,采用Western blotting、RT-PCR检测胸主动脉TLR4、p38 MAPK、MPO、Rho A、e NOS蛋白及m RNA的表达水平。结果与空白组比较,模型组TLR4、p38 MAPK、MPO、Rho A蛋白、m RNA的表达均升高,e NOS蛋白、m RNA的表达降低,差异有显著统计学意义(P<0.01);与模型组比较,心痛泰低剂量组MPO蛋白、MPO m RNA、Rho A蛋白、m RNA、p38MAPK m RNA表达均降低,e NOS蛋白、e NOS m RNA表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,心痛泰中剂量组p38MAPK、MPO、Rho A蛋白、m RNA及TLR4 m RNA表达均降低,e NOS蛋白、m RNA表达均升高,差异有显著统计学意义(P<0.05);与模型组比较,心痛泰高剂量组TLR4、p38 MAPK、MPO、Rho A蛋白、m RNA的表达均降低,e NOS蛋白、e NOS m RNA的表达均上升,差异有显著统计学意义(P<0.01);阳性组与心痛泰高剂量组比较,TLR4、p38 MAPK、MPO、Rho A、e NOS蛋白及其m RNA的表达虽有差异,但均无统计学意义(P>0.05)。结论心痛泰可能通过降低TLR4、p38 MAPK、MPO、Rho A蛋白及其m RNA的表达,上调e NOS蛋白、e NOS m RNA的表达,抑制血管内炎症,保护主动脉血管内皮,达到治疗动脉粥样硬化的目的 。

模式识别受体与自噬

模式识别受体识别微生物病原体是天然免疫反应起始的一个重要因素。这些受体可以识别病原微生物共享的保守的分子结构,并诱导下游的信号通路,调节免疫反应。自噬是一个特殊的生物过程,通过隔离并降解细胞大分子、细胞器和病原微生物及其产物,维持细胞的稳态,是调节细胞内代谢反应的重要机制,同时也在天然免疫反应中起到了关键作用。不同的模式识别受体(包括Toll样受体、核酸低聚结构域蛋白样受体、视黄酸诱导基因Ⅰ样受体和DNA感受器)与自噬在天然免疫反应过程中相互调节,模式识别受体参与了自噬的诱导与成熟,自噬也调节了模式识别受体启动的天然免疫反应。本文就模式识别受体与自噬的相互调节领域的研究内容进行综述。

隔药饼灸调节大鼠免疫抑制机制的转录组测序分析

背景:免疫抑制会导致机体免疫功能受损,加重病情。隔药饼灸能有效调节机体免疫功能,提高机体免疫力,但其调节机制目前仍不清楚。目的:基于转录组学的生物信息学技术对隔药饼灸干预的免疫抑制模型大鼠进行测序,探究隔药饼灸调控免疫的机制。方法:将24只SD大鼠随机分为空白组、模型组和隔药饼灸组,每组8只,模型组与隔药饼灸组采用腹腔注射环磷酰胺制备免疫抑制模型,35 mg/kg,连续3 d,造模结束后空白组与模型组不做干预,隔药饼灸组在大鼠中脘、神阙、关元及足三里穴位进行艾炷与药饼结合的隔药饼灸干预,连续10 d,1次/d,干预结束后次日取材。取各组大鼠外周血进行白细胞数量检测;采用Illumina测序平台进行RNA-seq,筛选差异基因,结合GO与KEGG数据库,对差异基因进行生物信息学相关分析。结果与结论:①与空白组比较,模型组白细胞数量显著减少(P<0.001)。②RNA-seq共筛选出模型组与空白组间差异基因3026个,其中1565个上调、1461个下调,隔药饼灸组与模型组间差异基因535个,其中280个上调、255个下调。③韦恩图分析获得模型组与空白组159个下调基因经隔药饼灸干预后上调,蛋白互作网络分析获得Oasl,Oas2,Isg15,Herc6,Mx2,Helz2,Mx1,Syk,Hspa1a及Ret等10个核心靶点;④GO与KEGG分析隔药饼灸调节机体的机制有免疫应答途径、病毒相关、血管新生和自身免疫系统等通路。⑤上述结果证实,实验筛选出隔药饼灸干预免疫抑制与Oasl,Oas2,Isg15,Herc6,Mx2,Helz2及Mx1靶点有明显关联,并且在免疫应答、病毒相关及血管新生等通路中发挥调控作用。

模式识别受体与HPV感染及宫颈癌的相关研究进展

高危型人乳头瘤病毒(HPV)的持续性感染是宫颈癌的主要危险因素,天然免疫系统通过模式识别受体(PRR)诱导促炎症细胞因子及Ⅰ型干扰素释放,在抵御外源微生物过程中发挥重要作用。天然免疫系统障碍使HPV不能被有效清除,HPV持续性感染,最终导致宫颈癌的发生。PRR在HPV感染过程中发挥重要作用,并且其异常表达参与宫颈癌的发生发展过程。此外,调节PRR的表达可以增强宫颈癌细胞的凋亡,在宫颈癌的治疗中具有潜在的临床意义,有望成为宫颈癌治疗的新途径。

乳腺癌组织中FGF-1、TIP30、TLR4、HIF-1α的表达及其与微血管密度的关系

目的探讨乳腺癌组织中酸性成纤维细胞生长因子-1(FGF-1)、TIP30基因(TIP30)、Toll样受体4(TLR4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及其与微血管密度(MVD)的关系。方法选择2014年3月~2017年3月在曲靖市第一人民医院接诊的100例女性乳腺癌患者为研究对象。收集所有患者手术切除病理组织制作石蜡切片,使用SP免疫组织化学法观察乳腺癌组织中FGF-1、TIP30、TLR4、HIF-1α染色结果,并分析其与临床病理因素、MVD之间的关系。结果免疫组化结果显示,100例乳腺癌组织中,FGF-1阳性率为61.00%(61/100),TIP30阳性率为29.00%(29/100),TLR4阳性率为72.00%(72/100),HIF-1α阳性表达率为65.00%(65/100),且FGF-1、TIP30、TLR4、HIF-1α和肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移之间均具有密切关系(P<0.05)。在FGF-1、TLR4及HIF-1α阳性组织中,MVD表达高于阴性组织;在TIP30阳性组织中MVD表达低于阴性组织(P<0.05)。相关性分析结果显示,FGF-1、TLR4及HIF-1α与MVD、肿瘤大小、临床分期、淋巴转移之间均呈正相关(P<0.05),而TIP30和MVD、肿瘤大小、临床分期、淋巴转移呈负相关(P<0.05)。结论在乳腺癌组织中,FGF-1、TLR4、HIF-1α的高表达和TIP30的低表达与MVD关系密切,可促使疾病进展,这为靶向药物治疗乳腺癌提供了新思路。

壮药龙盘止咳方治疗小鼠甲型流感病毒H1N1肺炎的作用及机制

目的:探究壮药龙盘止咳方的抗流感病毒性肺炎作用及其相关机制。方法:BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、高剂量(10.4 g/kg)龙盘止咳方组、低剂量(5.2 g/kg)龙盘止咳方组和龙盘止咳方(10.4 g/kg)+Toll样受体3(TLR3)激动剂聚肌胞苷酸[Poly(I:C),20 mg/kg]组,每组20只。采用甲型流感病毒(IAV)H1N1滴鼻法建立病毒性肺炎模型,观察小鼠一般状态,并每组取10只小鼠,记录15 d的存活率和存活时间;计算肺、脾和胸腺指数;HE染色观察肺组织病理变化;实时荧光定量PCR检测肺病毒载量;ELISA法检测肺匀浆中白细胞介素6(IL-6)、IL-4、干扰素α(IFN-α)、IFN-β和IFN-γ水平;Western blot检测肺组织TLR3/视黄酸诱导基因I(RIG-I)/核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白的表达。结果:对照组小鼠精神状态良好,在实验期间未出现死亡;与对照组相比,模型组小鼠在感染后出现典型的流感症状,小鼠存活率、存活时间、脾指数和胸腺指数显著降低(P<0.05),肺指数,肺组织病理学评分,病毒载量,肺匀浆中IL-6、IL-4、IFN-γ、IFN-α和IFN-β水平,肺匀浆中IFN-γ/IL-4比值,以及肺组织TLR3、胞核NF-κB p65、RIG-I和干扰素β启动子刺激蛋白1(IPS-1)表达均显著增加(P<0.05);与模型组相比,高、低剂量龙盘止咳方组小鼠症状明显减轻,小鼠存活率、存活时间、脾指数、胸腺指数、肺匀浆中IFN-α和IFN-β水平及肺组织RIG-I和IPS-1表达均显著增加(P<0.05),肺指数,肺组织病理学评分,病毒载量,肺匀浆中IL-6、IL-4和IFN-γ水平,肺匀浆中IFN-γ/IL-4比值,以及TLR3和胞核NF-κB p65表达均显著降低(P<0.05);而Poly(I:C)可明显减弱龙盘止咳方对IAV H1N1感染小鼠的肺脏保护作用。结论:壮药龙盘止咳方有减轻IAV H1N1感染小鼠肺损伤的作用,其机制可能与调节TLR3/RIG-I/NF-κB信号通路,抑制过度的先天炎症反应有关。

以STING为代表的天然免疫信号通路在银屑病中的研究进展

银屑病是一种由多因素引起的免疫紊乱疾病。其发病机制复杂,主要以白细胞介素-23/辅助性T细胞17(IL-23/Th17)信号轴为核心,其他关键途径还包括抗病毒信号通路、促炎因子和趋化因子表达以及抗原处理和呈递过程等。在银屑病的皮损环境中存在着各种自身抗原或病原体,其可通过激活模式识别受体[如干扰素基因刺激因子(STING)、Toll样受体(TLR)、维甲酸诱导基因1蛋白(RIG1)等]进而活化下游转录因子[核转录因子κB(NF-κB)、干扰素调节因子(IRF)等]而激活促炎信号,从而促进银屑病的发病进程。本文综述了天然免疫信号通路中的不同模式识别受体在银屑病的发生发展的作用机制,为潜在的治疗靶点做一总结。

RLRs介导的抗病毒免疫效应的研究进展

视黄酸诱导基因1样受体家族(RLRs)是天然免疫系统中重要的病原模式识别受体,在抗病毒免疫的过程中发挥着重要作用。其主要功能是在病毒感染过程中,识别并结合病原体相关分子模式,活化下游信号分子,扩大级联反应,诱导机体天然免疫发生,控制病毒的早期复制与传播,构建机体免疫防御城墙。同时,RLRs及其信号产物还可以参与机体对适应性免疫的调控,影响病毒特异性细胞毒T淋巴细胞的形成,以及在机体对抗持续性病毒感染过程中发挥一定的作用。

4种血清肿瘤标志物在宫颈癌诊断中的应用

目的探讨血清中4种肿瘤标志物(TM)鳞状上皮抗原(SCC-Ag)、诱骗受体3(DcR3)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)和缺氧诱导因子(HIF)-1α联合检测对早期诊断宫颈癌的价值。方法选取宫颈癌患者60例宫颈癌组、健康体检妇女30例(对照组)为研究对象,采用ELISA法检测并分析2组血清中SCC-Ag、DcR3、RhoA及HIF-1α的表达水平。结果宫颈癌组4种TM水平均显著高于对照组(P<0.05),且其表达水平高低与宫颈癌的TNM分期有关。淋巴转移者SCC-Ag和HIF-1α表达水平显著高于非淋巴转移者(P<0.05);宫颈鳞癌中SCC-Ag表达水平显著高于宫颈腺癌(P<0.05)。结论联合检测SCC-Ag、DcR3、RhoA和HIF-1α可作为普查项目,为宫颈癌的筛查、诊治、评估预后提供新的方法和思路。

乙型肝炎病毒抑制巨噬细胞TLR3、Mda-5和RIG-I表达

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)与巨噬细胞上模式识别受体(PRR)的相互作用。方法以不同载量HBV刺激佛波酯(PMA)诱导的单核源巨噬细胞,实时定量PCR检测刺激2、4、12及24h后巨噬细胞Toll样受体3(TLR3)、黑色素瘤分化相关基因5(Mda-5)、视黄酸诱导基因I(RIG-I)表达;以poly I:C刺激与HBV共培养12h的巨噬细胞,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定poly I:C刺激4h后培养上清液中β干扰素(IFNβ-)的分泌水平。结果不同病毒载量组巨噬细胞TLR3表达在2、4、12、24h较对照组下调,且高病毒载量组表达低于低病毒载量组(F值分别为123.64、24.50、6.69、7.61,P均<0.01);Mda-5和RIG-I在上述4个时间点的表达为高病毒载量组低于低病毒载量组(F值分别为36.44、48.58、46.59、12.77;67.68、74.54、18.18、17.76;P均<0.01)。IFNβ-的表达为:阳性对照组>低病毒载量组>高病毒载量组>阴性对照组(F=78.42,P<0.01),表达量分别为(497.2±43.7)、(294.2±48.4)、(92.5±12.3)、(40.4±9.9)pg/mL。结论 HBV能抑制巨噬细胞TLR3、Mda-5和RIG-I表达,致IFN-β分泌下降,可能是其逃逸机体天然免疫的机制之一。

SLC11A1及TLR2基因多态性与耐药肺结核的关联性研究

目的探讨SLC11A1基因rs17235409位点、TLR2基因rs3804099位点多态性与耐药肺结核易感性的关联性。方法采用病例对照研究,选择乌鲁木齐市2018年接受DOTS治疗的肺结核患者,采用卡方检验及多因素Logistic回归分析基因及环境因素与耐药肺结核的关联性。结果研究共纳入148例肺结核患者,耐药患者39例,非耐药患者109例,不同民族、是否有合并症与耐药有关,差异有统计学意义(P均<0.05);SCLA11A1基因rs17435409位点A/A、A/G、G/G在耐药组和非耐药组的分布差异无统计学意义(P均>0.05);TLR2基因rs3804099位点的C/C、C/T、T/T在耐药组和非耐药组的分布差异无统计学意义(P均>0.05);多因素Logistic结果显示肺结核患者的民族、是否有合并症、治疗结局与患者是否耐药有关(P均<0.05)。结论尚未发现SLC11A1基因的rs17235409位点、TLR2基因的rs3804099位点多态性与耐药肺结核有相关性,应结合耐药肺结核患者的其他影响因素,有针对性地采取预防控制措施,降低肺结核患者的耐药率。

VAP患者WISP1/TLR4/整合素β5通路基因及相关炎性因子的表达

目的 探究Wnt1-诱导的信号通路蛋白1(WISP1)/Toll样受体4(TLR4)/整合素β5通路基因及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-8在呼吸机相关性肺炎(VAP)患者中的表达。方法 选取2018年4月-2021年3月绍兴市人民医院收治的120例VAP患者(VAP组)及60例机械通气非VAP患者(对照组),统计VAP患者病原菌分布;比较两组外周血单个核细胞WISP1、TLR4、整合素β5 mRNA相对表达量及血清TNF-α、IL-6、IL-8水平;绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析相关指标预测VAP患者28 d死亡的临床价值。结果 120例患者分离出156株病原菌,革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌分别占51.92%、36.54%、11.54%。VAP组外周血单个核细胞中WISP1、TLR4、整合素β5相对表达量以及血清TNF-α、IL-6、IL-8表达水平较对照组均升高(P<0.05)。VAP组死亡患者外周血单个核细胞中WISP1、TLR4 mRNA相对表达量以及血清TNF-α、IL-6表达水平较存活组均升高(P<0.05)。WISP1 mRNA、TLR4 mRNA、TNF-α、IL-6预测VAP患者28 d死亡的ROC曲线下面积分别为0.886、0.795、0.644、0.876。结论 VAP患者WISP1/TLR4/整合素β5通路激活及相关炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8水平升高,WISP1 mRNA、TLR4 mRNA、TNF-α、IL-6对VAP患者预后有一定预测价值。

节律基因Bmal1对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响及其机制

目的通过体外细胞实验,从分子水平探讨脑和肌肉芳香烃受体核转运样蛋白1(Bmal1)基因对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响及其机制。方法体外培养结直肠癌细胞,运用RNA干扰技术转染Bmal1 siRNA,构建Bmal1基因敲除的结直肠癌细胞株。将体外培养的细胞分为对照组、Bmal1基因敲除组(敲除组)、放疗组、Bmal1基因敲除联合放疗组(联合组)。CCK-8检测各组结直肠癌细胞的增殖能力。RT-qPCR检测各组细胞Bmal1、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA表达水平。Western blot检测各组细胞Bmal1、HIF-1α和VEGF的表达水平。结果CCK-8检测结果显示,细胞增殖能力由强到弱依次为:对照组、敲除组、放疗组、联合组,各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-qPCR检测结果显示,联合组细胞HIF-1α和VEGF mRNA的表达水平在4组细胞中均为最低,分别为对照组的0.40倍和0.38倍,其次为放疗组、敲除组,对照组HIF-1α和VEGF mRNA表达水平最高,各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示,HIF-1α和VEGF在联合组细胞中表达水平最低,分别为对照组的0.45倍和0.35倍,其次为放疗组、敲除组,对照组HIF-1α和VEGF蛋白的表达水平最高,各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论敲除节律基因Bmal1可以增加结直肠癌细胞对放疗的敏感性,其机制可能与调节HIF-1α/VEGF信号通路有关。

溃疡性结肠炎患者血清HIF-1α、Beclin1、TLR4水平与其病情严重程度的关系研究

[目的]研究溃疡性结肠炎(UC)患者血清中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Beclin1、Toll样受体4(TLR4)水平与其病情严重程度的关系。[方法]选取2015-02—2018-02期间100例UC患者为观察组,以同期100例进行健康体检者为对照组,比较2组Beclin1、HIF-1α、TLR4表达水平之间的差异,分析血清中HIF-1α、Beclin1、TLR4水平与UC病情严重程度的相关性,比较血清HIF-1α、Beclin1、TLR4水平单独检测和联合检测的效能。[结果]观察组Beclin1、HIF-1α、TLR4表达水平均显著高于对照组;不同疾病严重程度的UC患者Beclin1、HIF-1α、TLR4表达水平之间差异有统计学意义(P<0.05)。通过两两比较,随着疾病严重程度升高,Beclin1、HIF-1α、TLR4表达水平显著升高;Beclin1、HIF-1α、TLR4表达水平与UC患者的严重程度呈正相关;联合检测的敏感度显著高于单独检测,同时,通过对不同严重程度的临界值比较,轻度UC患者的Beclin1、HIF-1α、TLR4表达水平的临界值分别为3.22、70.44、30.78 ng/mL;中度UC患者分别为4.09、73.45、36.54 ng/mL,重度UC患者分别为5.12、79.09、39.91 ng/mL。[结论]UC患者血清中HIF-1α、Beclin1、TLR4水平与其病情严重程度呈正相关,建议针对患者的HIF-1α、Beclin1、TLR4水平进行治疗方式的及时调整。

TIPE2在脓毒症小鼠急性肺损伤内源性保护机制中的作用:与TREM-1/NLRP3炎症小体信号通路的关系

目的评价肿瘤坏死因子-α诱导蛋白家族8-样蛋白2(TIPE2)在脓毒症小鼠急性肺损伤内源性保护机制中的作用及其与髓样细胞表达触发受体-1(TREM-1)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路的关系。方法雄性野生型小鼠和TIPE2基因敲除小鼠各20只,分别采用随机数字表法分为野生型假手术组(WT-sham组)、野生型急性肺损伤组(WT-ALI组)、TIPE2基因敲除型假手术组(KO-sham组)及TIPE2基因敲除急性肺损伤组(KO-ALI组),每组10只。采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症小鼠急性肺损伤模型。术后24 h时腹主动脉采血样后处死小鼠取肺组织,光镜下观察肺组织病理学结果并行肺损伤评分,确定湿重/干重(W/D)比值,检测髓过氧化物酶(MPO)活性,采用Western blot法检测TIPE2、TREM-1、NLRP3、caspase-1和GSDMD的表达,采用ELISA法检测血清IL-1β和IL-18的浓度。结果与WT-sham组比较,WT-ALI组和KO-ALI组肺损伤评分、W/D比值、MPO活性、肺组织TREM-1、NLRP3、caspase-1、GSDMD表达水平及血清IL-1β和IL-18浓度升高,TIPE2表达下调(P<0.05);与WT-ALI组比较,KO-ALI组肺损伤评分、W/D比值、MPO活性、TREM-1、NLRP3、caspase-1、GSDMD表达水平及血清IL-1β和IL-18的浓度升高,TIPE2表达下调(P<0.05)。结论TIPE2参与了脓毒症小鼠急性肺损伤的内源性保护机制,与抑制TREM-1/NLRP3炎症小体信号通路激活有关。

呼吸道合胞病毒激活RIG-Ⅰ/TLR3信号通路及对SOCS1/3 mRNA表达的影响

目的:探讨视黄酸诱导基因Ⅰ(RIG-Ⅰ)和Toll样受体3(TLR3)两受体在呼吸道合胞病毒(RSV)感染A549细胞后诱导的炎症和抗病毒反应中的作用。方法:应用Real-timePCR方法检测RSV感染A549细胞后0,2,4,8,24hRIG-Ⅰ,TLR3及细胞因子信号转导抑制因子1/3(SOCS1/3)的mRNA的表达水平;用特异性的si-RNA分别抑制RIG-Ⅰ和TLR3两个受体基因的表达,应用Real-timePCR方法检测RSV感染抑制后的A549细胞不同时间点SOCS1/3的mRNA的表达水平。结果:RSV上调RIG-Ⅰ/TLR3两受体及SOCS1/3mRNA的表达(P<0.05);抑制RIG-Ⅰ及TLR3后,SOCS1/3mRNA的表达与对照组相比无差异性(P>0.05)。结论:RSV感染A549细胞后上调负性调节因子SOCS1/3的表达,其表达不依赖RIG-Ⅰ及TLR3受体途径,可能由病毒复制直接诱导。

脓毒症急性肺损伤患者RhoA/ROCK1和NF-κB/NLRP3信号通路及其下游信号分子的变化

目的 分析Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho激酶1(ROCK1)、核因子κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路及其下游信号分子在脓毒症患者急性肺损伤(ALI)中的变化。方法 回顾性分析海口市第四人民医院2018年1月-2020年12月122例脓毒症患者临床资料,其中41例并发ALI(ALI组),81例无ALI(非ALI组),并纳入32名健康体检者作为对照组。脓毒症患者均于入院24 h内收集外周静脉血标本,对照组则收集体检当日外周静脉血。比较3组外周血单个核细胞(PBMCs)NF-κB、NLRP3信使核糖核酸(mRNA)表达水平,并记录NF-κB/NLRP3信号通路上游基因(RhoA、ROCK1)、下游基因[半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(caspase-1)]mRNA表达水平及下游炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18];根据肺损伤预测评分(LIPS)将41例并发ALI的脓毒症患者分为LIPS≥7分组,LIPS<7分组,比较两组上述基因mRNA、炎症因子水平,并评估脓毒症并发ALI患者LIPS评分与上述基因mRNA、炎症因子表达水平的相关性。结果 ALI组LIPS评分高于非ALI组(P<0.05)。ALI组与非ALI组PBMCs NF-κB、NLRP3、RhoA、ROCK1、caspase-1 mRNA相对表达水平及血清IL-1β、IL-18高于对照组(P<0.05),ALI组高于非ALI组(P<0.05)。脓毒症并发ALI患者中,LIPS≥7分组PBMCs NF-κB、NLRP3、RhoA、ROCK1、caspase-1 mRNA相对表达水平及血清IL-1β、IL-18高于LIPS<7分组(P<0.05);Pearson相关性分析显示,LIPS评分与上述各基因mRNA及炎症因子均呈正相关(r=0.389、0.472、0.511、0.539、0.518、0.469、0.457,P均<0.05)。结论 Rho/ROCK、NF-κB/NLRP3信号通路及其下游信号分子可能共同参与了脓毒症ALI的发生发展,临床可针对该发生机制探寻治疗新方向。

HIV感染合并肺部感染患者 CD3+CD4+-T细胞表达的研究

目的探讨α干扰素(Interferon-α,IFN-α)、干扰素诱导基因56(Interferon-stimulated gene 56,ISG56)、粘病毒抵抗蛋白A(Myxovirus resistance protein A,MxA)、免疫调控受体程序性死亡分子1(Programmed death-1,PD-1)和T细胞免疫球蛋白及免疫酪氨酸样抑制基序(T cell immunoglobulin and ITIM domain,TIGIT)对人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)合并肺部感染患者CD3^+CD4^+-T细胞表达的影响。方法选取2016年12月-2017年12月于余姚市市人民医院就诊的52例HIV合并肺部感染患者作为研究组进行研究,另选择同期48例HIV未合并肺部感染患者作为对照组,检测患者外周血CD3^+CD4^+-T细胞表面的IFN-α、ISG56、MxA、PD-1和TIGIT指标水平情况。结果研究组CD3^+CD4^+-T细胞比例高于对照组(P<0.05);研究组IFN-α、ISG56、MxA分别为(15.82±5.31)、(0.74±0.22)、(0.83±0.14)pg/ml低于对照组(P<0.001);研究组TIGIT和PD-1的CD3^+CD4^+-T细胞分别为(23.61±12.83)%、(51.32±13.74)%高于对照组(P<0.05);研究组TIGIT CD3^+CD4^+-T细胞表面百分数与CD4+-T细胞绝对数呈负相关(P=0.027);与病毒载量呈正相关(P=0.001);研究组PD-1CD3^+CD4^+-T细胞表面百分数与CD4+-T细胞绝对数呈负相关(P=0.026);与病毒载量无相关性(P=0.711)。结论HIV合并肺部感染患者,CD3^+CD4^+-T细胞占比上升,IFN-α、ISG56、MxA降低,TIGIT和PD-1升高,相关指标变化证明当受到感染时机体免疫功能会发生紊乱,且与HIV疾病进展具有一定程度的相关性,具有一定的临床价值。