深Ⅱ度烧伤创面磨痂治疗后残留皮肤组织中表皮干细胞标记物角化蛋白19的表达

背景：大面积烧伤往往需要削痂清除痂皮,但削痂手术往往会导致人为因素除去过多的残留再生皮肤组织。目的：观察磨痂治疗深Ⅱ度烧伤创面对残留皮肤组织中表皮干细胞标记物角化蛋白19表达的影响。设计、时间及地点：随机分组对比观察,于2002-10/2004-01在广西医科大学完成。对象：烧伤整形外热烧伤科患者40例,年龄18-37岁,平均烧伤面积为15%-45%,深Ⅱ度烧伤面积为15%-30%。随机分组方法分为磨痂组（n=20）、削痂组（n=20）。方法：磨痂组采用电动磨痂仪对创面进行磨痂,由浅入深磨去坏死组织,至创面基底呈现红色充血,有珠状的小出血点为止。削痂组采用滚轴削痂刀对创面进行削痂,削至创面基底呈瓷白色、组织致密,湿润面有光泽,无网状血管栓塞和呈灰暗棕色的无光泽组织,放松止血带后可见密集点状出血较均匀,但有时因操作原因削痂过深,基底露出脂肪组织。两组创面术后用辐照猪皮覆盖。主要观察指标：取术前、术后小块创面组织以免疫组织化学SP法检测标皮肤再生组织中标记物角化蛋白19的表达,在100倍光学显微镜下,任意选取5个视野计数细胞团的表达数;观察两组创面愈合时间,记录超过4周不愈合的肉芽创面,需要再次手术植皮修复创面。结果：磨痂保留了较多的真皮组织,毛囊,汗腺,皮脂腺等皮肤附件。削痂后创面基底组织有薄层网状组织残留及部分毛囊及汗腺,有些标本视野中可见无真皮组织,为脂肪组织。细胞团的表达数比较结果显示,两组前及术后创面均有创面残留皮肤组织中标记物角化蛋白19表达,磨痂组术前、术后数量无明显变化（P〉0.05）,削痂组术后较术前数量减少（P〈0.05）;磨痂组创面较削痂组提前愈合（P〈0.05）。需要手术植皮创面磨痂组2处,削痂组8处（P〈0.05）。结论：应用磨痂术治疗烧伤深Ⅱ度创面能有效掌握磨痂深度,对组织损伤小,与削痂比较保留更多的再生皮肤组织,通过表皮干细胞的再生,利于创面再上皮修复,缩短创面愈合时间。

多房棘球绦虫角化蛋白的基因克隆、表达及免疫反应性分析

目的克隆表达多房棘球绦虫角化蛋白(EmCNFN)基因,并分析其免疫反应性。方法以细粒棘球绦虫CNFN氨基酸序列为探针,通过电子克隆方法获得EmCNFN基因cDNA全长。设计EmCNFN特异性引物,PCR扩增EmCNFN基因,并进行菌落PCR和测序验证。构建pET32a-EmCNFN原核表达载体,筛选IPTG最适诱导浓度和最适诱导时间进行诱导表达,制备EmCNFN重组蛋白。通过Ni柱层析获取高纯度的EmCNFN重组蛋白。分别用His标签抗体、泡球蚴病患者血清、健康人血清和泡球蚴感染SD大鼠血清、健康SD大鼠血清作一抗,Western blot分析EmCNFN重组蛋白免疫反应性。采用生物信息学软件分析EmCNFN蛋白潜在B、T细胞表位。结果成功获得EmCNFN基因cDNA全长,PCR试验和测序验证其序列正确。优化的IPTG最佳诱导浓度为0.5 mmol/L,最佳诱导时间为8 h。原核表达后通过Ni柱层析,获得了高浓度高纯度的40 ku EmCNFN重组蛋白。Western blot显示,EmCNFN重组蛋白可与His标签抗体、泡球蚴病患者血清和泡球蚴感染SD大鼠血清发生特异性反应。生物信息学软件分析发现,EmCNFN蛋白含有4个潜在B细胞表位,8个潜在T细胞表位。结论成功获得EmCNFN基因cDNA序列,克隆表达、纯化了EmCNFN重组蛋白,该蛋白含有B、T细胞表位,具有免疫反应性,为进一步研究其功能奠定了基础。

青刺果油对角化套膜蛋白和脂质合成酶表达的影响

目的观察2%青刺果油对角化套膜蛋白及脂质合成酶的影响,进一步阐明其修复表皮通透屏障的作用机制。方法将BALB/c小鼠随机分为5组:正常对照组(A组)、模型组(B组)、2%青刺果油组(C组)、基质组(D组)及2%葵花籽油组(E组),每组6只BALB/c小鼠。构建BALB/c小鼠急性表皮通透屏障受损模型后,于C、D、E组小鼠背部受试区均匀涂抹2%青刺果油、基质、2%葵花籽油。分别在干预后4h及24h,检测各组受试区经表皮水分流失(TEWL)以及中间丝相关蛋白(FLG)、兜甲蛋白(LOR)、内披蛋白(INV)、丝氨酸棕榈酰转移酶(SPT)、脂肪酸合成酶(FASN)、三羟基三甲基戊二酰辅酶A(HMGCoA)的m RNA相对表达量。结果分别用2%青刺果油、基质、2%葵花籽油干预急性表皮通透屏障受损模型后4h,A、B、C、D、E组的TEWL分别为(6.52±1.30)、(26.54±3.75)、(24.12±6.06)、(29.21±7.31)、(29.07±6.99);干预后24h,A、B、C、D、E组的TEWL分别为(6.48±0.74)、(10.13±2.23)、(9.16±1.34)、(12.00±1.36)、(11.39±0.66),与B组比较,干预后4h及24h,C、D、E组TEWL值较B组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);C组较D、E组,TEWL值较建模后明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2%青刺果油干预模型后4h及24h,C组FLG的mRNA相对表达量2-△△Ct分别为(1.48±0.20)、(3.09±0.05);LOR的mRNA相对表达量2-△△Ct分别为(1.52±1.52)、(2.11±0.15);FASN的mRNA相对表达量2-△△Ct分别为(13.81±0.58)、(2.20±0.52);HMGCoA的mRNA相对表达量2-△△Ct分别为(2.74±0.58)、(0.95±0.25),较B、D及E组增加;干预后4h,INV的mRNA相对表达量2-△△Ct为(1.50±0.70),SPT的mRNA相对表达量2-△△Ct为(2.23±0.12);较B、D及E组增加。结论2%青刺果油修复受损表皮通透屏障的机制与其增加角化套膜蛋白FLG、LOR和INV以及细胞间脂质合成关键酶SPT、FASN和HMGCoA的mRNA表达相关。

角蛋白饲料加工新技术

针对当前用蛋白饲料加工存在的问题，提出了一种新的膨化复合用蛋白饲料加工工艺，包括原料配制、生产工艺流程和产品营养成分检测等。饲喂结果表明：采用这种加工工艺生产的复合角蛋白饲料，其蛋白质的质量分数超过70％，氨基酸含量平衡，营养成分与饲喂效果均优于优质鱼粉，用它代替鱼粉生产配合饲料，可降低成本10％以上；同时，采用这种技术生产角蛋白饲料不会对环境造成二次污染。

食管癌放疗前后CEA、SCCAg和CYFRA21-1水平的变化

目的探讨食管癌患者放疗前、后癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCCAg)、细胞角化蛋白片段19(CYFRA21-1)水平的变化。方法双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定80例食管癌患者(病例组)放疗前、后CEA、SCCAg、CYFRA21-1,并与30例健康者(健康对照组)作比较,并且对1年内存活组和死亡组患者上述指标水平进行检测。结果病例组CEA、SCCAg、CYFRA21-1水平均明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01);化疗前CEA、SCCAg、CYFRA21-1水平均明显高于化疗后(P<0.05);死亡组患者CEA、SCCAg、CYFRA21-1水平均明显高于存活组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血清CEA、SCCAg、CYFRA21-1水平可为食管癌患者的诊断及疗效判断提供参考。

食管癌新辅助放化疗患者血清肿瘤标记物水平动态变化及意义

目的探讨血清肿瘤标记物水平动态变化判断食管癌新辅助放化疗患者疗效及预后的价值。方法对30例行新辅助放化疗食管癌切除术患者的血清细胞角化素蛋白片段19(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)及糖链抗原19-9(CA19-9)水平行动态观察,分析其变化与临床疗效及预后的关系。结果治疗前CEA阳性者中位生存期明显短于CEA阴性者,P<0.05;CA19-9阳性者中位生存期短于CA19-9阴性者(但因阳性例数过少,无法行统计学处理);CYFRA21-1阳性与阴性者中位生存期无统计学差异。治疗过程中标志物呈下降趋势者中位生存期长于、有效率高于呈上升趋势者,P均<0.05。结论对食管癌新辅助放化疗患者血清CYFRA21-1、CEA及CA19-9联合动态及变化趋势检测,可评价治疗效果及判断预后。

血清 TAM 和 Cyfra21-1检测在食管癌诊断和化疗疗效判定中的价值

目的：探讨血清肿瘤相关物质（tumor associated material，TAM）和角化素蛋白片段19（Cyfra21-1）检测在食管癌诊断和化疗疗效判定中的价值。方法选取2012年9月～2013年9月92例初诊食管癌和术后复发食管癌病人为研究对象，以同时期健康体检者为对照组，分别测定其血清 TAM 和 Cyfra21-1水平，计算检测指标的灵敏度和特异度。另外，收集2012年9月～2014年4月化疗前血清 TAM 和 Cyfra21-1均升高食管癌患者60例，化疗2周期后再次检测 TAM 和Cyfra21-1水平，以有效患者指标下降，进展患者指标上升计算判定符合率。结果92例初诊和术后复发食管癌患者，血清 TAM 升高66例，Cyfra21-1升高47例，灵敏度分别为71.7％和51.1％（χ2＝8.279，P ＝0.004）。对照组50例，TAM 阴性47例，Cyfra21-1阴性46例，TAM 特异度为94.0％，Cyfra21-1特异度为92.0％，差异无统计学意义（χ2＝0.154，P ＝0.695）。接受化疗患者，有效25例，进展11例，TAM 符合率为77.8％，Cyfra21-1符合率为75.0％，差异无统计学意义（χ2＝0.077，P ＝0.781）。结论TAM 和 Cyfra21-1为食管癌诊断和判定疗效的有用指标，并且 TAM 优于 Cyfra21-1。

血清CCL-20、PDGF-BB、CYFRA21-1水平对NSCLC患者靶向治疗效果的预测价值

目的分析血清趋化因子配体20(CCL-20)、血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)、细胞角化素蛋白片段19(CYFRA21-1)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者靶向治疗效果的预测价值。方法选取进行靶向治疗的79例中晚期NSCLC患者,均持续治疗2月,评价患者近期疗效。收集患者一般临床资料,并于治疗前后分别检测患者血清趋化因子CCL-20、PDGF-BB、CYFRA21-1水平,比较不同疗效患者间相关资料差异,分析影响疗效的因素,并利用ROC分析血清趋化因子CCL-20、PDGF-BB、CYFRA21-1水平预测近期疗效的价值。结果79例中晚期NSCLC患者均完成2个月的靶向治疗,治疗总有效率为45.57%(36/79)。有效组共36例,无效组(SD+PD)共43例,2组年龄、性别、病理类型相较无差异(P>0.05);有效组TNMⅢB期、高分化占比高于无效组(P<0.05);有效组治疗前后血清CCL-20、PDGF-BB、CYFRA21-1水平均低于无效组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,治疗前血清CCL-20、PDGF-BB、CYFRA21-1水平为影响疗效的独立因素(OR=9.574,10.903,11.156,P<0.05)。ROC分析结果显示,治疗前血清CCL-20、PDGF-BB、CYFRA21-1水平均具有预测临床疗效的价值(AUC=0.775,0.896,0.669,P<0.05)。结论中晚期NSCLC患者血清CCL-20、PDGF-BB、CYFRA21-1水平与靶向治疗效果有关,可作为靶向治疗近期疗效评估的辅助性指标。

血清CEA、SCC和CYFRA21-1在食管癌放、化疗前后的变化

目的:研究食管癌放、化疗前后血清癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCC)和细胞角化素蛋白片段(CYFRA21-1)的变化。方法:选2014年至2016年接受放化疗的食管癌100例作为研究组,健康体检者26例为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清治疗前、后CEA、SCC、CYFRA21-1水平,分析治疗前后的变化,以及与病理类型、肿瘤浸润度、TNM分期的关系。结果:治疗前研究组血清CEA、SCC、CYFRA21-1水平均明显高于对照组(P<0.05),治疗后研究组均有明显下降(P<0.05);与不同病理分期、肿瘤浸润深度、TNM分期差异明显,其中Ⅲ期、T4期最高(P<0.05)。但与对照组比较无差异(P>0.05)。结论:血清CEA、SCC、CYFRA21-1在不同病理分期、TNM分期及放化疗前后的食管癌患者血清含量不同,对于食管癌患者制定个性化治疗方案以及观察疗效有重要意义。

老年喉癌组织miR-362-3p、miR-217表达变化及其与肿瘤恶性程度相关因子的关联性

目的 探讨老年喉癌(LC)组织miR-362-3p、miR-217表达及其与肿瘤恶性程度相关因子的关联性。方法 选取经手术切除的老年LC组织与癌旁正常喉组织标本作为LC组及癌旁正常喉组各114例,喉良性病变组织标本作为喉良性病变组(96例)。实时聚合酶链反应(PCR)测定标本内miR-362-3p、miR-217表达,分析其与患者一般资料、临床病理参数关系,Logistic回归分析LC发病影响因素,Pearson相关性分析miR-362-3p、miR-217表达与血清肿瘤恶性程度相关因子[鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)、细胞角化素蛋白19片段(CYFRA21-1)、糖类抗原(CA)199、癌胚抗原(CEA)、胸苷激酶(TK)1]关联性。结果 LC组织标本中miR-362-3p表达显著高于喉良性病变组织及癌旁正常喉组织标本,miR-217表达显著低于喉良性病变组织及癌旁正常喉组织标本(P<0.05);临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移LC患者miR-362-3p表达显著高于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者,miR-217表达显著低于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(P<0.05);组织miR-362-3p、miR-217为LC发病独立危险因素(P<0.05);LC患者血清SCCAg、CYFRA21-1、CA199、CEA、TK1表达显著高于喉良性病变患者(P<0.05);LC患者血清SCCAg、CYFRA21-1、CA199、CEA、TK1水平与miR-362-3p表达呈正相关,与miR-217表达呈负相关(P<0.05)。结论 老年LC组织中miR-362-3p、miR-217表达异常,且与恶性程度关系密切,其异常表达是LC发病发展独立危险因素,临床检测LC组织中miR-362-3p、miR-217表达对诊断及评估恶性程度具有重要意义。

全程局部同步推量调强放疗治疗局部晚期食管癌的效果及对3年生存率的影响

目的探讨全程局部同步推量调强放疗(SIB-IMRT)治疗局部晚期食管癌的效果及对3年生存率的影响。方法回顾性分析2018年8月—2019年6月收治的局部晚期食管癌108例的临床资料,根据治疗方法分为研究组和对照组各54例,研究组采用SIB-IMRT治疗,对照组采用序贯加量调强放疗(IMRT)治疗,比较2组临床疗效、糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)、细胞角化素蛋白片段19(CYFRA21-1)、免疫功能[CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+]、3年生存率。结果2组近期客观缓解率比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后研究组CA125、CEA、CYFRA21-1和CD8+水平低于对照组、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+高于对照组(P<0.05,P<0.01)。研究组3年生存率高于对照组,放射性食管炎和放射性肺炎发生率低于对照组(P<0.05)。结论SIB-IMRT治疗局部晚期食管癌可显著降低血清肿瘤标志物水平和放射性肺炎发生率,减少对免疫功能的影响,提高远期生存率。

人角化层糜蛋白酶在子宫颈腺癌中的表达及其临床意义

目的 研究人角化层糜蛋白酶（SCCE）在子宫颈腺癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测子宫颈腺癌45例、子宫颈腺上皮内瘤变（CGIN） 24例和正常子宫颈组织24例中SCCE、雌激素受体（ER）、癌胚抗原（CEA）及波形蛋白（Vimentin）的表达情况.结果 子宫颈腺癌、CGIN和正常子宫颈组中,SCCE的阳性表达率分别为84.44％（38/45）、58.33％（14/24）和8.33％（2/24）,子宫颈腺癌组中SCCE表达率明显高于正常子宫颈组（P＜ 0.012 5）,CGIN组中SCCE表达率高于正常子宫颈组（P＜0.0125）,子宫颈腺癌组与CGIN组SCCE表达率差异无统计学意义（P＞0.0125）.结论 SCCE可以作为子宫颈腺癌早期筛查中的一项新指标,并可作为判断预后的指标.

胃癌手术前后外周静脉血微转移的研究

以癌胚抗原 (CEA)及角化蛋白 2 0 (CK2 0 )为标志物 ,应用巢式逆转录聚合酶链反应 (Nested,RT-PCR)检测 5 0例胃癌患者术前、后外周静脉血微转移 ,并探讨其与肿瘤生物学因素、手术操作的关系。结果表明 ,胃癌患者术前外周静脉血业已存在微转移 ,可促进微转移的发生 ;检测胃癌术前、后外周静脉血微转移不仅能评估胃癌侵袭转移状态 。

生长因子对猪深Ⅱ°烧伤创面愈合的协同作用

创面愈合受多种肽类生长因子的调控。本研究用活检标本的细胞ＤＮＡ周期分析、创面愈合的图象积分和用抗角化蛋白荧光抗体技术观察上皮愈合等方法来探讨基因重组的人表皮生长因子（ＥＧＦ）和基因重组的碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对猪深Ⅱ°烧伤创面愈合的调控。实验结果表明，浓度合适的ＥＧＦ或ｂＦＧＦ能促进烧伤创面的愈合，其愈合率与应用于创面生长因的剂子量有量效关系；二种生长因子同时使用，对创面的愈合有协同促进作用。

卵巢上皮癌组织中CK7 mRNA的表达

目的探讨细胞角化蛋白7(CK 7)mRNA对卵巢上皮癌的诊断价值。方法用RT-PCR法检测了39例卵巢上皮癌组织中CK 7 mRNA的表达,同时检测了26例良性卵巢上皮性肿瘤及16例正常卵巢组织作对照。结果卵巢上皮癌组织中CK 7 mRNA的阳性表达率为100%;良性卵巢上皮性肿瘤组织中CKmRNA的阳性率为34.62%;正常卵巢组织中无CK 7mRNA的表达。结论CK 7是卵巢上皮癌特异的一个肿瘤标志物;CK 7 mRNA的检测是卵巢上皮癌诊断的有效方法。

大肠癌向肝内微转移的临床观察

目的 :观察大肠癌患者手术时癌细胞向肝内发生微转移的情况。方法 :手术中抽取门静脉血 2 ml,以癌胚抗原(CEA)表达和角化蛋白 19(K19)表达癌细胞为标记物 ,应用巢式反转录聚合酶链反应 (Nested Rt- PCR)对 5 5例术中患者 ,并以术后患者和正常人各 12例为对照进行了检测。结果 :大肠癌患者两项标记物皆为阳性者在 Dukes A期已经出现 ,随分期提高而逐步上升 ,也随癌细胞恶性程度升高而增高。结论 :用门静脉血检测大肠癌患者在手术时癌细胞向肝内发生微转移的情况比其它方法的阳性率更高。

RT-PCR方法检测外周血CK-20在膀胱癌微转移灶的临床意义

目的 研究膀胱癌微转移的情况及临床意义。方法 以靶向细胞角蛋白 2 0 (Cyokeratinck 2 0 )逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)检查 91例膀胱癌微转移情况。结果 91例膀胱癌中检出CK 2 0mRNA37例 ,阳性率 41% ,其中证实有转移的 2 0例中 17例阳性 ( 85 % ) ,发现无淋巴结转移的Ⅰ～Ⅱ期患者行TRRBP术后 15个月 2例复发者CK 2 0 mRNA均表达阳性 ;2 5例健康对照组均为阴性。结论CK 2 0RT PCR较常规组织学检查具有更高敏感性 ,提高了微转移的检出率 ,对判断患者预后 ,指导术后辅助治疗具有重要意义。

第2个高硫酸化毛发角蛋白相关蛋白（KAP）基因域存在于人类21号染色体上

通过对基因库数据库非人类毛发角蛋白相关蛋白基因序列的分析得出，可能有2个人类角蛋白相关蛋白基因簇存在于21号染色体上。其中之一已被确认，位于染色体21q22．1。第2个位于21号染色体22q23，约90Kb，存在16个KAP基因和2个KAP假基因。

头发为什么会变白?

头发由角化蛋白组成,在其形成时,黑色素细胞会产生两种不同的“染料”,一种为真黑素,可使头发成深黑色到浅褐色;另一种为嗜铬黑素,使头发呈亚麻色至金黄色或深红色。根据黑素颗粒大小、形态。